一种速生抗逆型中国对虾配套系的选育方法

本发明属于中国对虾育种技术领域，具体涉及一种速生抗逆型中国对虾配套系的选育方法。

中国对虾又称东方对虾，俗称对虾、明虾，是我国黄渤海沿海区域重要的养殖物种，在养殖发展盛期(1990年前后)养殖产量达20万吨左右，占我国对虾养殖产量的70％。但自1993年对虾病毒性疾病暴发以来，中国对虾的养殖总产量急剧下降，直到2000年以后才逐渐恢复生产，近年来年养殖面积30-40万亩，养殖产量4-5万吨。近年来养殖水环境的污染、频繁的极端天气严重影响着中国对虾的生长环境，异常的养殖环境因子的胁迫抑制中国对虾的生长发育，导致对虾减产甚至死亡。

我国国家渔业水质标准(GB11607-89)中要求渔业水域的水质中非离子氨浓度≤0.02mg/L，但在实际池塘养殖过程中，由于放养密度大、过量投饵及排泄物的多年累积等原因，常常会导致池塘氨氮含量偏高，从而引起对虾免疫力和抵抗力下降，生长缓慢，发生疾病，甚至造成急性、慢性中毒而死亡，给养殖业带来相当大的危害。pH值作为水环境生态平衡的指标，每增加一个pH值单位，水体中非离子氨的浓度就增加10倍。正常pH值条件下中国对虾幼虾24h存活率在95％以上，随着pH升高存活率会显著下降，pH9.4条件下对虾幼体6h时死亡率可达85％，24h全部死亡。且与凡纳滨对虾和日本囊对虾等其他主养物种相比，中国对虾高pH胁迫的耐受性最低，在同一高pH胁迫条件下，凡纳滨对虾和日本囊对虾的存活率分别为54.6％和97％，而中国对虾的存活率仅为13.3％。因此，发掘具有优异抗逆性状的中国对虾种质材料，培育生长速度快和抗逆能力强的中国对虾新品种，以适应和抵抗养殖环境因子带来的各种胁迫和不良刺激是当前对虾育种工作的首要任务之一。

目前中国对虾的选育主要以体选育、家系选育为主，选育目标多为单个性状的选育，难以满足当前养殖产业对多元化新品种的需求。配套系育种是选育具不同优良性状的中国对虾专门化品系，通过多系配套和杂交，筛选出杂交优势好符合生产需求的商品代。所以急需开展中国对虾的配套系育种工作，培育出生长速度快、抗逆能力强的新种质，提高中国对虾的养殖成功率和良种覆盖率，推动产业稳定可持续发展。

本发明要解决的技术问题在于提供了一种速生抗逆型中国对虾配套系的选育方法，该方法充分利用已培育出的中国对虾“黄海1号”、“黄海3号”和“黄海4号”新品种的遗传资源优势，在保持各品种优良的生长和抗逆性能的基础上，充分发挥品种间杂交优势，将优良性状进行聚合，培育出生长速度快和对环境胁迫耐受能力强的中国对虾配套系。

本发明是通过如下技术方案来实现的：

一种速生抗逆型中国对虾配套系的选育方法，包括以下操作步骤：

(1)收集中国对虾“黄海1号”体进行纯繁，选择生长性能优异的个体组建基础体，作为配套系母系的祖代来源；

(2)收集中国对虾“黄海3号”和“黄海4号”体进行纯繁，分别从两个体中选择对养殖水体中高氨氮和高pH胁迫耐受能力强的个体组建基础体，作为配套系父系的祖代来源；

(3)从中国对虾“黄海1号”纯繁体中选择生长优良雌虾和雄虾亲本作为祖代，采用人工授精技术进行杂交，选育出生长性能优质的家系作为专门化母系；

(4)从中国对虾“黄海3号”纯繁体中选择耐高氨氮胁迫能力强的雄虾亲本，从中国对虾“黄海4号”纯繁体中选择耐高pH胁迫能力强的雌虾亲本作为祖代，采用人工授精技术进行杂交，选育出抗逆能力强的家系作为专门化父系；

(5)从专门化母系中选择雌虾，从专门化父系中选择雄虾，采用人工授精技术进行杂交，获得速生抗逆型中国对虾配套系。

其进一步的技术方案是：

步骤(1)中中国对虾“黄海1号”体具生长速度快的优良性状，品种登记号为GS01001-2003；

步骤(2)中中国对虾“黄海3号”体耐氨氮胁迫能力强，品种登记号为GS-01-002-2013；中国对虾“黄海4号”耐高pH值胁迫能力强，品种登记号为GS-01-003-2020。

步骤(3)中雌虾和雄虾亲本的选择标准为：体质健壮、附肢完整、体表光洁，雌虾卵巢发育丰满、体长大于14cm、体重大于37g；雄虾精荚为乳白，体长大于12cm、体重大于24g。

步骤(3)中专门化母系的培育方法包括如下操作步骤：

S1，选择生长性状优良的雌虾和雄虾亲本，采用人工授精技术按1:1比例进行杂交，生产出F1代；

S2，从F1代中选育出生长速度快的家系3-5个，自F2代开始进行家系内自交；

S3，经过连续3个世代的选育，最终选育出生长性状表现最好的家系作为专门化母系。

其中专门化母系的培育方法步骤S3中专门化母系的亲本选择标准为：体质健壮、附肢完整、体表光洁，雌虾卵巢发育丰满，体长大于16cm、体重大于47g；雄虾精荚为乳白，体长大于13cm、体重大于31g。

步骤(4)中中国对虾“黄海3号”雄虾亲本选择标准为：氯化铵浓度为64mg/L胁迫96h条件下存活个体，雄虾体长大于12cm、体重大于21g；中国对虾“黄海4号”雌虾亲本选择标准为：pH9.2胁迫96h条件下存活的个体，未交尾雌虾体长大于14cm、体重大于33g。

步骤(4)中专门化父系的培育方法包括如下操作步骤：

S1，选择中国对虾“黄海3号”的雄虾和中国对虾“黄海4号”的雌虾，采用人工授精技术进行杂交，生产出F1代；

S2，从F1代中选育出耐高氨氮和高pH值胁迫能力强的家系3-5个，自F2代开始进行家系内自交；

S3，经过连续3个世代的选育，最终选育出抗逆能力最强的家系作为专门化父系。

其中专门化父系的培育方法步骤S3中专门化父系亲本的选择标准为：仔虾耐高氨氮和高pH能力较父母代提高30％以上，雌虾卵巢发育丰满、体长大于14cm、体重大于36g，雄虾精荚为乳白、体长大于13cm、体重大于27g。

步骤(5)中从专门化母系中选择雌虾，从专门化父系中选择雄虾进行杂交，获得配套系优质商品虾，体质健壮、附肢完整、体表光洁，生长性能和抗逆能力均比亲本有所提高。仔虾耐高氨氮和高pH值能力较祖代提高20％以上，收获雌虾体长大于15cm、体重大于43g，收获雄虾体长大于13cm，体重大于29g。

图1是本发明所述的培育速生抗逆型中国对虾配套系的技术流程图。

为使本发明的特征及优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细说明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

实施例1：中国对虾配套系祖代基础体的收集

中国对虾“黄海1号”、“黄海3号”和“黄海4号”均为国家审定的水产新品种，品种登记号分别为GS01001-2003、GS-01-002-2013、GS-01-003-2020，各具不同优异的生产性能，其中中国对虾“黄海1号”具有生长速度快的优良性状，中国对虾“黄海3号”对养殖水体中的氨氮胁迫耐受能力强，中国对虾“黄海4号”对养殖水体中的高pH值耐受能力强。实施地点设在昌邑市海丰水产养殖有限责任公司，所用亲本材料也购自昌邑市海丰水产养殖有限责任公司，养殖环境和管理条件基本一致，可以排除人为及环境因素对选育造成的误差，提高选育效果的准确度。采用完全双列杂交模式对3个体的生长、耐氨氮和高pH值胁迫的性状进行了测试，结果如下表所示。

实施例2：中国对虾配套系母系祖代的性能选择标准

2015年10月中国对虾“黄海1号”养殖体收获时，从中国对虾“黄海1号”养殖体中挑选体格健壮、生长性能良好的未交尾雌虾和雄虾各100尾进行单独留种与越冬，统计其体长和体重，作为配套系母系的祖代。收集的中国对虾“黄海1号”未交尾雌虾体长为14.65-15.35cm，体重37.01-42.37g；雄虾体长12.7-13.62cm，体重24.02-27.53g。

实施例3：中国对虾配套系父系祖代的性能选择标准

2015年4月对收集的中国对虾“黄海3号”和“黄海4号”基础体的亲虾进行苗种繁育，待幼体发育至体长约1.0cm的仔虾时进行胁迫实验。

(1)从中国对虾“黄海3号”体中随机选取10万尾仔虾，采用浓度为64mg/L的氯化铵胁迫96h后存活个体约2.5万尾放入室外池塘中进行养殖。2015年10月收获时，挑选体格健壮、生长性能良好的雄虾100尾进行单独留种与越冬，统计其体长和体重，作为配套系祖代的父本，雄虾体长12.16-12.98cm，体重21.89-22.53g。

(2)从中国对虾“黄海4号”体中随机选取10万尾仔虾，在pH＝9.2的条件下胁迫96h后存活个体约3.1万尾放入室外池塘中进行养殖。2015年10月收获时，挑选体格健壮、生长性能良好的未交尾雌虾100尾进行单独留种与越冬，统计其体长和体重，作为配套系祖代的母本，未交尾雌虾体长为14.11-14.85cm，体重33.59-35.94g。

实施例4：专门化母系的培育

2016年4月从收集的中国对虾“黄海1号”越冬体中，挑选体质健壮的未交尾雌虾和雄虾各30尾，采用人工授精技术，按1:1比例进行杂交。将人工授精后的亲虾单独放入200L聚乙烯桶中进行产卵和孵化。待各个家系的幼体发育至体长约1.0cm的仔虾时放入室外池塘，在同一条件下进行养殖和测试。2016年10月收获时对各家系的体长和体重进行测量，选留出性状表现好的家系3-5个，自F2代开始进行家系内自交，经过连续3代的选育，选出性状表现最好的家系作为专门化母系，雌虾体长16.07-17.14cm，体重47.63-55.12g；雄虾体长13.88-14.92cm，体重31.36-35.63g。

实施例5：专门化父系的培育

2016年4月从中国对虾“黄海3号”越冬体中，挑选体质健壮的雄虾30尾，从中国对虾“黄海4号”体中，挑选体质健壮的未交尾雌性30尾，采用人工授精技术，按1:1比例进行杂交。将人工授精后的亲虾单独放入200L聚乙烯桶中进行产卵和孵化。待各个家系的幼体发育至体长约1.0cm的仔虾时，随机选取10万尾进行耐氨氮和耐高pH值胁迫实验，存活率控制在3％-5％，放入室外池塘进行养殖。2016年10月收获时对各家系的体长和体重进行测量，统计养殖成功率，选留出性状表现好的家系3-5个，自F2代开始进行家系内自交，经过连续3代的选育，选育出生长速度快且抗逆能力强的家系作为专门化的父系，仔虾耐高氨氮和高pH能力较父母代提高31.2％，雌虾体长14.07-15.04cm，体重36.63-38.32g；雄虾体长13.18-14.09cm，体重27.36-28.22g。

实施例6：中国对虾配套系的培育

利用专门化父系与专门化母系进行杂交，生产出速生抗逆型中国对虾配套系商品虾，体质健壮，规格整齐，遗传性状稳定，生长性能和抗逆能力均比亲本有所提高。仔虾耐高氨氮和高pH值能力较祖代提高21.6％，收获雌虾体长15.27-16.1cm，体重43.16-46.33g；收获雄虾体长13.38-14.39cm，体重29.13-31.01g。整个中国对虾配套系的培育的技术流程如图1所示。