一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置及使用方法
1.本发明属于植物基因工程技术领域,尤其涉及一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置及使用方法。
背景技术:
2.萱草是一种具有较高的观赏价值的园林植物。目前,为了进一步对萱草的种质资源进行研究,植物基因工程技术已经成为了一种常规的研究方法,其中农杆菌介导转化法是最常见的转基因方法之一。
3.农杆菌介导转化法是利用农杆菌质粒上的t-dna将外源基因转移到到受体中的方法。该方法具有实验操作简便,转化效率高以及遗传稳定性好等优点,是目前应用最广泛的转基因方法之一。侵染作为该方法的第一步,也是最为关键的一步。其常规操作是将受体材料消毒处理后转移至培养皿中,随后倒入侵染液侵染适当时间,将浸泡完成的受体材料夹取到无菌的定性滤纸上在超净工作台上风干受体材料表面菌液,最后将处理完成的受体材料转移回培养基上培养。其主要缺点在于:1从培养瓶到培养皿到定性滤纸再到培养瓶,操作步骤繁琐,期间多次直接接触受体材料,增加了污染风险;2在浸泡受体材料和风干受体表面菌液时需反复翻动受体,易造成受体材料组织损伤及增加其污染风险;3受体长时间暴露在超净工作台上,耗时且增加污染几率;4实验过程中重复机械性操作较多,不利于大规模受体材料的侵染操作。
4.有鉴于此,特提出本发明。
技术实现要素:
5.针对现有技术中存在的问题,本发明的目的是提供一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置及使用方法。
6.为了实现上述目的,本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置,包括旋转架、侵染管、侵染液槽和吹气扇;所述旋转架包括支腿、手轮和柔性固定卡箍,若干所述柔性固定卡箍沿手轮的外圆周方向均布用于固定侵染管,所述支腿用于支撑手轮;所述侵染管包括管体和与管体开口端螺纹连接的透气盖,所述管体上均布有若干通孔;所述吹气扇和侵染液槽交替轮换放置在手轮正下方;当旋转所述手轮时,通过所述柔性固定卡箍带动侵染管依次且完全浸入侵染液槽中;所述吹气扇的出风口朝向手轮。
7.优选地,所述管体的材质采用不锈钢;
8.优选地,所述透气盖由pp材料构成;
9.优选地,所述吹气扇包括自进风口至出风口依次设置的空气滤膜和扇叶,以及马达和电池仓;所述电池仓为马达供电,所述马达驱动扇叶;
10.优选地,一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的使用方法,包括如下步骤:
11.首先,将愈伤组织装入所述侵染管内,通过所述侵染管的管口螺纹拧上透气盖,将若干所述侵染管分别与旋转架通过柔性固定柔性固定卡箍可拆卸链接,将侵染液注入所述
侵染液槽后,放置于所述旋转架的支腿中间,然后转动所述旋转架的手轮浸泡受体材料;当操作完成后,移除所述侵染液槽,将所述吹气扇置于旋转架支腿中间,并打开所述吹气扇吹干受体材料表面菌液,最后,将受体材料转移回培养瓶中。
12.本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置及使用方法,具有如下有益效果:
13.1.本发明结构简单,操作便捷,通过在旋转架上设置若干用于固定侵染管的柔性固定卡箍,可以方便、快捷地将大批量对侵染管内的受体进行侵染,节约侵染液,同时,通过柔性固定卡箍固定,方便拆卸更换。
14.2.旋转架、侵染管、侵染液槽和吹气扇的主体材料均采用不锈钢,坚固耐用,且易于清洗和高温高压灭菌处理,透气盖和空气滤膜均为一次性用品,大大降低了受体的染菌风险。
15.3.本发明在使用时,利用柔性固定卡箍将侵染管固定在旋转架上,只需在实验开始和结束时接触受体,实验操作过程中只需移动侵染液槽和吹气扇,极大的减少了移动受体的次数,降低了受体的染菌风险。
附图说明
16.图1为本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的结构示意图。
17.图2为本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的旋转架的结构示意图。
18.图3为本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的侵染管的结构示意图。
19.图4为本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的侵染液槽的结构示意图。
20.图5为本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的吹气扇的结构示意图。
21.图中:
22.1、柔性固定卡箍2、手轮3、支腿4、透气盖5、管体6、通孔7、侵染液槽8、电池仓9、扇叶10、空气滤膜。
具体实施方式
23.下面结合具体实施例和附图对本发明做进一步说明,以助于理解本发明的内容。
24.如图1-5所示,为本发明提供的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置,包括旋转架、侵染管、侵染液槽7和吹气扇。如图2所示,旋转架包括支腿3、手轮2和柔性固定卡箍1,若干柔性固定卡箍1沿手轮2的外圆周方向均布用于固定侵染管,支腿3用于支撑手轮2。如图3所示,侵染管包括管体5和与管体5开口端螺纹连接的透气盖4,管体5上均布有若干通孔6,管体5的材质采用不锈钢,透气盖4由pp材料构成。
25.吹气扇和侵染液槽7交替轮换放置在手轮2正下方。当旋转手轮2时,通过柔性固定卡箍1带动侵染管依次且完全浸入侵染液槽7中。如图5所示,吹气扇的出风口朝向手轮2。吹气扇包括自进风口至出风口依次设置的空气滤膜10和扇叶9,以及马达和电池仓8;电池仓8
为马达供电,马达驱动扇叶9。
26.一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的使用方法,包括如下步骤:
27.首先,将愈伤组织装入侵染管内,通过侵染管的管口螺纹拧上透气盖4,将若干侵染管分别与旋转架通过柔性固定柔性固定卡箍1可拆卸链接,将侵染液注入侵染液槽7后,放置于旋转架的支腿3中间,然后转动旋转架的手轮2浸泡受体材料;当操作完成后,移除侵染液槽7,将吹气扇置于旋转架支腿3中间,并打开吹气扇吹干受体材料表面菌液,最后,将受体材料转移回培养瓶中。
28.本发明的工作原理:
29.使用时,将受体材料装入侵染桶中,盖上透气盖4,通过柔性固定柔性固定卡箍1将多个侵染管固定在旋转架上,将侵染液槽7放置在旋转架支腿3中间,转动手轮2完成侵染管内受体浸泡菌液操作,将吹气扇替换侵染液槽7,开启吹气扇吹干受体表面菌液。完成操作后将侵染管取下,将转移受体至培养瓶中,即完成侵染。
30.本发明解决了常规农杆菌介导的萱草愈伤组织遗传转化实验中大批量侵染操作时需反复倾倒菌液,翻动愈伤组织和自然风干愈伤组织耗时,不易吹干和易受污染等技术问题,省去了繁琐的重复实验操作,缩短了农杆菌附着在愈伤组织伤的时间,使农杆菌介导萱草愈伤组织遗传转化更快捷简便,具有较高的实用价值,有利于推广应用。
31.本文中应用了具体个例对发明构思进行了详细阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离该发明构思的前提下,所做的任何显而易见的修改、等同替换或其他改进,均应包含在本发明的保护范围之内。
技术特征:
1.一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置,其特征在于,包括旋转架、侵染管、侵染液槽和吹气扇;所述旋转架包括支腿、手轮和柔性固定卡箍,若干所述柔性固定卡箍沿手轮的外圆周方向均布用于固定侵染管,所述支腿用于支撑手轮;所述侵染管包括管体和与管体开口端螺纹连接的透气盖,所述管体上均布有若干通孔;所述吹气扇和侵染液槽交替轮换放置在手轮正下方;当旋转所述手轮时,通过所述柔性固定卡箍带动侵染管依次且完全浸入侵染液槽中;所述吹气扇的出风口朝向手轮。2.根据权利要求1所述的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置,其特征在于,所述管体的材质采用不锈钢。3.根据权利要求1所述的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置,其特征在于,所述透气盖由pp材料构成。4.根据权利要求1所述的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置,其特征在于,所述吹气扇包括自进风口至出风口依次设置的空气滤膜和扇叶,以及马达和电池仓;所述电池仓为马达供电,所述马达驱动扇叶。5.根据权利要求1所述的一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:首先,将愈伤组织装入所述侵染管内,通过所述侵染管的管口螺纹拧上透气盖,将若干所述侵染管分别与旋转架通过柔性固定柔性固定卡箍可拆卸链接,将侵染液注入所述侵染液槽后,放置于所述旋转架的支腿中间,然后转动所述旋转架的手轮浸泡受体材料;当操作完成后,移除所述侵染液槽,将所述吹气扇置于旋转架支腿中间,并打开所述吹气扇吹干受体材料表面菌液,最后,将受体材料转移回培养瓶中。
技术总结
本发明公开了一种利用农杆菌侵染萱草愈伤组织的装置及使用方法,包括旋转架、侵染管、侵染液槽和吹气扇;旋转架包括支腿、手轮和柔性固定卡箍,若干柔性固定卡箍沿手轮的外圆周方向均布用于固定侵染管,支腿用于支撑手轮;侵染管包括管体和与管体开口端螺纹连接的透气盖,管体上均布有若干通孔,管体的材质采用不锈钢,透气盖由pp材料构成;吹气扇和侵染液槽交替轮换放置在手轮正下方;当旋转手轮时,通过柔性固定卡箍带动侵染管依次且完全浸入侵染液槽中;吹气扇的出风口朝向手轮;吹气扇包括自进风口至出风口依次设置的空气滤膜和扇叶,以及马达和电池仓;电池仓为马达供电,马达驱动扇叶。达驱动扇叶。达驱动扇叶。