一种青稞遗传转化体系及转基因青稞培育方法
1.本发明属于转基因植物领域，具体涉及一种青稞遗传转化体系及转基因青稞培育方法。
背景技术：
2.青稞(学名：hordeum vulgare l.)是禾本科大麦属植物，是藏族主要的粮食作物，也是青藏高原最具特的农作物之一。青稞作为大麦的一种特殊类型，其营养成分也较水稻、小麦、玉米为高，是食用、饲用、酿造及药用兼用的作物。在粮食作物中，青稞具有高蛋白质、高纤维、高维生素、低脂肪、低糖等特点。其蛋白质含量为6.35-21.00％，平均值为11.31％，高于小麦、水稻、玉米。淀粉含量为40.54-67.68％，平均值为59.25％，普遍含有74-78％支链淀粉，有些甚至高达或接近100％。粗脂肪为1.18-3.09％，平均值为2.13％，比玉米和燕麦低，但高于小麦和水稻；它还含有降胆固醇作用的油酸、亚油酸、亚麻酸等；可溶性纤维和总纤维含量均高于其它谷类作物；青稞富含b族维生素、维生素c等；所含微量元素钙、磷、铁、铜、锌、锰、硒都高于玉米，其中，铁的含量高于小麦、水稻；同时，青稞含有18种氨基酸，尤以人体必需氨基酸较为齐全。由于青稞具有优异的营养价值，本领域研究人员一直致力于选育优异的青稞品种。
3.目前青稞品种选育的主要手段依旧是传统育种，但随着分子生物学技术的迅猛发展，转基因技术被认为是创新作物种质和选育新品种的有效技术之一。因此，建立青稞遗传转化体系可以为青稞功能基因研究和青稞品种定向改良提供技术支撑。
4.然而，能够作为植物遗传转化受体的再生系统众多：如胚芽种子、胚轴、根、创伤植株等；植物基因转化所常用的农杆菌介导法所涉及的农杆菌接种侵染方式也各有不同。受体、接种方法以及培养条件等诸多因素对遗传转化体系构建的影响复杂；因此，尽管目前已经研发出多种转基因植株如转基因番茄、玉米等，但以青稞为基础建立的遗传转化体系仍鲜有报道。
技术实现要素：
5.本发明的目的在于提供一种能够有效构建青稞遗传转化体系，并培育得到转基因青稞植株的方法。
6.本发明提供了一种转基因青稞阳性材料，它是侵染根癌农杆菌的青稞种子，所述青稞种子的种胚露白长度为3～5mm。
7.进一步地，所述根癌农杆菌是含有质粒的根癌农杆菌，所述质粒携带目的基因；优选地，所述根癌农杆菌是根癌农杆菌eha105，和/或所述质粒是pbi121质粒或pcambia1303质粒。
8.本发明还提供了上述的转基因青稞阳性材料的建立方法，包括如下步骤：
9.(1)选择种胚露白长度3～5mm的青稞种子刺胚接种侵染根癌农杆菌；
10.(2)侵染结束后的种子在24
±
2℃培养室中黑暗条件下培养2～3天。
11.进一步地，步骤(1)所述刺胚接种侵染根癌农杆菌的条件为：真空条件下侵染30～40min。
12.进一步地，步骤(1)所述刺胚接种的针刺次数为1～3次。
13.进一步地，步骤(2)所述培养是将侵染结束后的种子接种于共培养培养基培养；所述共培养培养基是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：
14.2,4-二氯苯氧乙酸1～3mg/l、激动素0.1～0.5mg/l、甘露醇8～12g/l、脯氨酸0.3～0.8g/l、谷氨酰胺0.3～0.8g/l、水解酪蛋白0.5～1g/l、五水硫酸铜1～1.5mg/l、蔗糖25～35mg/l、乙酰丁香酮90～110μmol/l；
15.优选地，所述共培养培养基是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：2,4-二氯苯氧乙酸1.5mg/l、激动素0.2mg/l、甘露醇10g/l、脯氨酸0.5g/l、谷氨酰胺0.5g/l、水解酪蛋白0.8g/l、五水硫酸铜1.25mg/l、蔗糖30mg/l、乙酰丁香酮100μmol/l。
16.更进一步地，所述ms培养基是ms固体培养基，所述添加剂还含有植物凝胶。
17.本发明还提供了一种转基因青稞的培养方法，包含如下步骤：
18.1)将权利要求1所述的转基因青稞阳性材料接种到选择萌发培养基中培养，筛选得到萌发的植株；
19.2)将步骤1)得到的萌发的植株转入选择成苗培养基培养，获得转基因青稞；
20.所述选择萌发培养是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：
21.2,4-二氯苯氧乙酸1～3mg/l、激动素0.1～0.5mg/l、甘露醇8～12g/l、脯氨酸0.3～0.8g/l、谷氨酰胺0.3～0.8g/l、水解酪蛋白0.5～1g/l、五水硫酸铜1～1.5mg/l、蔗糖25～35mg/l、头孢霉素300～350mg/l，还含有卡那霉素100～150mg/l或潮霉素20～80mg/l；
22.所述选择成苗培养基是含有如下浓度的添加剂的1/2ms培养基：
23.α-萘乙酸0.3～0.8mg/l、硫酸铵0.8～1.2g/l、脯氨酸0.3～0.8g/l、谷氨酰胺0.3～0.8g/l、水解酪蛋白0.5～1g/l、五水硫酸铜1.3～1.8mg/l、蔗糖25～35mg/l、头孢霉素300～350mg/l，还含有卡那霉素100～150mg/l或潮霉素20～80mg/l。
24.进一步地，所述选择萌发培养是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：
25.2,4-二氯苯氧乙酸1.5mg/l、激动素0.2mg/l、甘露醇10g/l、脯氨酸0.5g/l、谷氨酰胺0.5g/l、水解酪蛋白0.8g/l、五水硫酸铜1.25mg/l、蔗糖30mg/l、头孢霉素300mg/l，还含有卡那霉素100mg/l或潮霉素50mg/l；
26.所述选择成苗培养基是含有如下浓度的添加剂的1/2ms培养基：
27.α-萘乙酸0.5mg/l、硫酸铵1g/l、脯氨酸0.5g/l、谷氨酰胺0.5g/l、水解酪蛋白0.8g/l、五水硫酸铜1.5mg/l、蔗糖30mg/l、头孢霉素300mg/l，还含有卡那霉素100mg/l或潮霉素50mg/l。
28.更进一步地，所述ms培养基是ms固体培养基，所述添加剂还含有植物凝胶；所述1/2ms培养基是1/2ms固体培养基，所述添加剂还含有植物凝胶。
29.本发明的有益效果：本发明以青稞种子为转化受体，通过刺胚接种侵染根癌农杆菌，成功构建青稞遗传转化体系并培育得到青稞转基因植株，工艺简单、培养周期短，为青稞功能基因研究和青稞品种定向改良奠定了基础。
30.本发明术语解释：
31.种胚露白：种子胚根伸长过程露出白小芽。
32.青稞遗传转化体系：遗传转化体系建立包括：从种子预培养、摇菌、侵染、种子选择培养、种子萌发成苗。因此，青稞遗传转化体系是指整个侵染青稞种子过程的方法步骤条件。
33.目的基因：希望转入青稞中表达的任何核苷酸片段。
34.显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
35.以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
36.图1为萌芽的转基因青稞。
37.图2为青稞转基因植株。
38.图3为转gus基因青稞植株和未转基因青稞植株的染效果对比。
39.图4为转gus基因青稞植株的凝胶电泳检测结果(其中m为marker，p为菌液阳性对照，u为双蒸水阴性对照)。
40.图5为转hvul5h11228.2基因青稞植株的凝胶电泳检测结果。
具体实施方式
41.本发明所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
42.本发明使用的青稞种子是青稞c1品种的饱满、无虫害的种子，并经过浸种、消毒处理，形成青稞种胚无菌体系。
43.所述的浸种、消毒处理按照本领域技术人员所掌握的常规技术手段进行，作为举例说明，典型的处理方法如下：
44.浸种：常温浸种法浸种，每隔4-5小时换一次水，浸种1天。
45.消毒：在无菌操作台中，先用75％的酒精将种子消毒30s，再用12％的次氯酸钠溶液消毒25min，无菌水冲洗2-3次。
46.在刺胚接种前，种子经过预培养至露白。培养基和培养的方法按照本领域技术人员所掌握的常规手段选择进行。作为举例说明，典型的预培养培养基为：ms培养基+2.0mg/l 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-d)+0.2mg/l激动素(kt)+1.0g/l硫酸铵+0.5g/l脯氨酸+0.5g/l谷氨酰胺+0.8g/l水解酪蛋白+1.5mg/l五水硫酸铜+30g/l蔗糖，并加3.5g/l植物凝胶固化形成ms固体培养基；培养条件为光照下培养2～3天。
47.实验中所用的菌株为根癌农杆菌eha105，含有pbi121质粒或者含有pcambia1303质粒，并携带gus基因(编码β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase，gus)的基因，是一种广泛用作转基因植物的报告基因)。
48.本发明根癌农杆菌侵染液按照如下方法制备：
49.从-70℃冰箱中取出所保存的菌株，用接种环在含有100mg/l km的lb固体培养基上划线，然后将划好的平板倒置于28℃恒温箱中黑暗条件下培养直至产生单菌落。在平板上选取单一菌落并将其转入含有100mg/l km lb液体培养基中，然后置于28℃恒温摇床上
180r/min振荡过夜培养。当菌液的od值＝0.6时，将三角瓶中的菌液转入到50ml离心管中，4500r/min离心8min，去掉上清液。向含有农杆菌菌体的50ml离心管中加入含有100μmol/l乙酰丁香酮(as)和45g/l葡萄糖的ms液体培养基。然后置于28℃恒温摇床上180r/min进行农杆菌菌株的重悬培养。重悬2h后的菌液od值为0.6-0.8，用于青稞种胚的侵染。
50.实施例1、建立青稞刺胚遗传转化体系
51.选择种胚露白长度3mm的青稞种子，放在盛有根癌农杆菌侵染液的培养皿中进行刺胚接种(刺胚位置为盾片下，不伤害芽点)：蘸取菌液刺胚1针(不刺透)，再抽真空5min并侵染30min处理，侵染完成后，种子放于滤纸上吸干菌液；
52.将侵染结束后的种子3*3排列接种于共培养培养基中，置于24
±
2℃培养室中黑暗条件下共培养2天。
53.所述共培养培养基是：ms培养基+1.5mg/l 2,4-d+0.2mg/l kt+10.0g/l甘露醇+0.5g/l脯氨酸+0.5g/l谷氨酰胺+0.8g/l水解酪蛋白+1.25mg/l无水硫酸铜+30g/l蔗糖+100umol/l as，并加4.0g/l植物凝胶固化形成的ms固体培养基。
54.实施例2、建立青稞刺胚遗传转化体系
55.参照实施例1的方法，刺胚接种为刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液。其余条件不变。
56.实施例3、建立青稞刺胚遗传转化体系
57.参照实施例1的方法，刺胚接种为刺透1针。其余条件不变。(刺透和不刺透以刺针是否穿透胚尖为划分标准)。
58.实施例4、建立青稞刺胚遗传转化体系
59.参照实施例1的方法，刺胚接种为不刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液。其余条件不变。
60.实施例5、建立青稞刺胚遗传转化体系
61.参照实施例1的方法，刺胚接种为不刺透1针，侵染时间为40min。其余条件不变。
62.实施例6、建立青稞刺胚遗传转化体系
63.参照实施例1的方法，刺胚接种为不刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液，侵染时间为40min。其余条件不变。
64.实施例7、建立青稞刺胚遗传转化体系
65.参照实施例1的方法，刺胚接种为刺透1针，侵染时间为40min，共培养时间为3天。其余条件不变。
66.实施例8、建立青稞刺胚遗传转化体系
67.参照实施例1的方法，刺胚接种为刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液，侵染时间为40min，共培养时间为3天。其余条件不变。
68.实施例9、建立青稞刺胚遗传转化体系
69.参照实施例1的方法，青稞种子露白长度为5mm，侵染时间为40min。其余条件不变。
70.实施例10、建立青稞刺胚遗传转化体系
71.参照实施例1的方法，青稞种子露白长度为5mm，刺胚接种为刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液，侵染时间为40min。其余条件不变。
72.实施例11、建立青稞刺胚遗传转化体系
73.参照实施例1的方法，青稞种子露白长度为5mm，刺胚接种为不刺透1针，侵染时间为40min。其余条件不变。
74.实施例12、建立青稞刺胚遗传转化体系
75.参照实施例1的方法，青稞种子露白长度为5mm，刺胚接种为不刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液，侵染时间为40min。其余条件不变。
76.实施例13、建立青稞刺胚遗传转化体系
77.参照实施例1的方法，青稞种子露白长度为5mm，侵染时间为40min，共培养时间为3天。其余条件不变。
78.实施例14、建立青稞刺胚遗传转化体系
79.参照实施例1的方法，青稞种子露白长度为5mm，刺胚接种为刺透3针，每刺一针蘸取一次菌液，侵染时间为40min，共培养时间为3天。其余条件不变。
80.实施例15、转基因青稞植株的培养
81.1、选择萌发培养
82.将实施例1共培养结束的材料料接种于选择萌发培养基，进行选择培养，过程中及时更换新鲜培养基防止个别菌液侵染过盛导致材料死亡，培养至萌发(图1)。
83.选择萌发培养基为：ms培养基+1.5mg/l 2,4-d+0.2mg/l kt+10.0g/l甘露醇+0.5g/l脯氨酸+0.5g/l谷氨酰胺+0.8g/l水解酪蛋白+1.25mg/l无水硫酸铜+30g/l蔗糖+300mg/l头孢霉素+100mg/l卡那霉素，并加4.0g/l植物凝胶固化形成的ms固体培养基。
84.2、选择成苗培养
85.将萌发的小植株切下转入选择成苗培养基中，培养获得转基因植株。
86.选择成苗培养基为：1/2ms培养基+0.5mg/lα-萘乙酸+1.0g/l硫酸铵+0.5g/l脯氨酸+0.5g/l谷氨酰胺+0.8g/l水解酪蛋白+1.5mg/l无水硫酸铜+30g/l蔗糖+300mg/l头孢霉素+100mg/l卡那霉素，并加3.5g/l植物凝胶固化形成的ms固体培养基(图2)。
87.实施例16、转基因青稞植株的培养
88.参照实施例15的方法，仅将选择萌发培养基中的卡那霉素换为50mg/l的潮霉素。
89.以下通过实验例证明本发明的有益效果。
90.发明人前期采用青稞愈伤为受体构建遗传转化体系发现，构建的转基因青稞阳性材料在后期增殖培养、成苗培养过程中，芽体总是较弱，易被菌覆盖，难以获得以青稞愈伤为受体，进行遗传转化的植物。
91.实验例1、抗生素敏感性分析
92.将种胚露白长度分别为1mm、3mm、5mm的三种材料切掉后半部分，接种于不同处理的培养基中。培养基为ms+1.5mg/l 2,4-d+0.2mg/l kt+10.0g/l甘露醇+0.5g/l脯氨酸+0.5g/l谷氨酰胺+0.8g/l水解酪蛋白+1.25mg/l五水硫酸铜+30g/l蔗糖+卡那霉素+潮霉素；并加4.0g/l植物凝胶固化形成ms固体培养基，卡那浓度分别为0、30、50、70、100、150、200mg/l，潮霉素浓度分别为0、5、10、20、50、80、100mg/l，每隔两天记录芽体长势情况。如表7和表8所示，卡那霉素150mg/l、潮霉素80mg/l达到90％的以上的抑制生长，因此，实际培养基中选择添加100mg/l的卡那霉素或者50mg/l的潮霉素能够达到合理的筛选效果。
93.此外，头孢霉素可以在抑制农杆菌同时对植物伤害最小，选择在筛选培养基中另加入300mg/l的浓度。
94.表1青稞种子卡那浓度筛选
[0095][0096][0097]
表2青稞种子潮霉素浓度筛选
[0098][0099][0100]
实验例2、青稞种子刺胚转化实验条件筛选
[0101]
1、实验方法
[0102]
参照实施例1的方法，选择调整不同的种子露白长度、调整是否抽真空的条件、侵染时间、共培养时间、刺胚程度、针刺数量等参数，以共培养结束时的gus瞬间表达率和后期芽体长势筛选最适遗传转化条件。
[0103]
2、实验结果
[0104]
如表3所示：
[0105]
表3
[0106]
[0107]
[0108][0109]
可见，种子露白在3～5mm时，均能够刺胚接种制备得到转基因青稞阳性材料。并且选择萌发培养过程中发现，1mm芽体的种子被菌液侵染过于彻底，大部分已失去活性而死亡，3mm与5mm的长势较好。因此，以露白3～5mm的种子作为遗传转化受体，是成功构建转基因青稞阳性材料的关键。
[0110]
进一步，结合gus瞬时表达率和成本考虑，以种子露白3mm、振荡侵染30min、抽真空5min、共培养2天为最优选的构建条件，刺透与否对构建效果的影响不大。
[0111]
实验例3、转基因植株的组织化学染分析和pcr检测
[0112]
1、实验方法：
[0113]
(1)转基因植株gus组织化学染分析：未转化植株(ck)为阴性对照，对转基因植株进行gus组织化学染分析：将按照表3中第35组别的操作处理的叶片完全展开的10cm左右青稞幼苗a～e放于1.5ml离心管中，加入适量配制好的gus染工作液至完全覆盖材料，黑塑料袋包好后摇床摇动1小时，静置6-7小时后，将材料转入75％酒精中脱2-3次，每次4个小时，待阴性材料为白，阳性材料蓝斑点稳定时，放置30％酒精中保存。
[0114]
(2)转基因植株的pcr检测
[0115]
以转基因植株和未转化植株为材料，进行gus转基因植株的pcr检测。双蒸水作为阴性对照(u)，含gus基因的根癌农杆菌菌液为阳性对照(p)，转基因植株1～4(均为按照表3中第35组别的操作处理培养得到的幼苗)
[0116]
2、实验结果：
[0117]
染结果如图3所示，相比于未转化gus基因的青稞幼苗ck，转化gus基因的幼苗有明显的染效果。
[0118]
凝胶电泳检测结果如图4所示，可见，转基因植株都扩增得到了目的条带。
[0119]
实验例4、其他转基因植株的pcr检测目标基因
[0120]
1、实验方法：
[0121]
参照实施例1的方法，将根癌农杆菌中的质粒已换为携带hvul5h11228.2基因(是pr1基因的一种，参见“hongjun,yuan,xingquan,et al.gene coexpression network analysis combined with metabonomics reveals the resistance responses to powdery mildew in tibetan hulless barley.[j].scientific reports,2018.”)的pcambia1301质粒，制备得到转基因青稞。收取t1种子后播种后进行叶片采集和dna提取，进行pcr检测。以未转化植株作为阴性对照。
[0122]
2、实验结果
[0123]
如图5所示，可见，转基因植株可成功扩增得到目的基因分子量大小条带；以上结果说明，本发明构建的青稞遗传转化体系适合多种不同的外源基因的转入和表达。
[0124]
综上，本发明以青稞种子为转化受体，通过刺胚接种侵染根癌农杆菌，建立了青稞遗传转化体系，可以成功获得转基因青稞阳性材料并培育得到青稞转基因植株，工艺简单、培养周期短，为青稞功能基因研究和青稞品种定向改良奠定了基础。
技术特征：
1.一种转基因青稞阳性材料，其特征在于，它是侵染根癌农杆菌的青稞种子，所述青稞种子的种胚露白长度为3～5mm。2.如权利要求1所述的转基因青稞阳性材料，其特征在于，所述根癌农杆菌是含有质粒的根癌农杆菌，所述质粒携带目的基因；优选地，所述根癌农杆菌是根癌农杆菌eha105，和/或所述质粒是pbi121质粒或pcambia1303质粒。3.权利要求1或2所述的转基因青稞阳性材料的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)选择种胚露白长度3～5mm的青稞种子刺胚接种侵染根癌农杆菌；(2)侵染结束后的种子在24
±
2℃培养室中黑暗条件下培养2～3天。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述刺胚接种侵染根癌农杆菌的条件为：真空条件下侵染30～40min。5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述刺胚接种的针刺次数为1～3次。6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述培养是将侵染结束后的种子接种于共培养培养基培养；所述共培养培养基是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：2,4-二氯苯氧乙酸1～3mg/l、激动素0.1～0.5mg/l、甘露醇8～12g/l、脯氨酸0.3～0.8g/l、谷氨酰胺0.3～0.8g/l、水解酪蛋白0.5～1g/l、五水硫酸铜1～1.5mg/l、蔗糖25～35mg/l、乙酰丁香酮90～110μmol/l；优选地，所述共培养培养基是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：2,4-二氯苯氧乙酸1.5mg/l、激动素0.2mg/l、甘露醇10g/l、脯氨酸0.5g/l、谷氨酰胺0.5g/l、水解酪蛋白0.8g/l、五水硫酸铜1.25mg/l、蔗糖30mg/l、乙酰丁香酮100μmol/l。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述ms培养基是ms固体培养基，所述添加剂还含有植物凝胶。8.一种转基因青稞的培养方法，其特征在于，包含如下步骤：1)将权利要求1所述的转基因青稞阳性材料接种到选择萌发培养基中培养，筛选得到萌发的植株；2)将步骤1)得到的萌发的植株转入选择成苗培养基培养，获得转基因青稞；所述选择萌发培养是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：2,4-二氯苯氧乙酸1～3mg/l、激动素0.1～0.5mg/l、甘露醇8～12g/l、脯氨酸0.3～0.8g/l、谷氨酰胺0.3～0.8g/l、水解酪蛋白0.5～1g/l、五水硫酸铜1～1.5mg/l、蔗糖25～35mg/l、头孢霉素300～350mg/l，还含有卡那霉素100～150mg/l或潮霉素20～80mg/l；所述选择成苗培养基是含有如下浓度的添加剂的1/2ms培养基：α-萘乙酸0.3～0.8mg/l、硫酸铵0.8～1.2g/l、脯氨酸0.3～0.8g/l、谷氨酰胺0.3～0.8g/l、水解酪蛋白0.5～1g/l、五水硫酸铜1.3～1.8mg/l、蔗糖25～35mg/l、头孢霉素300～350mg/l，还含有卡那霉素100～150mg/l或潮霉素20～80mg/l。9.如权利要求8所述的培养方法，其特征在于，所述选择萌发培养是含有如下浓度的添加剂的ms培养基：2,4-二氯苯氧乙酸1.5mg/l、激动素0.2mg/l、甘露醇10g/l、脯氨酸0.5g/l、谷氨酰胺0.5g/l、水解酪蛋白0.8g/l、五水硫酸铜1.25mg/l、蔗糖30mg/l、头孢霉素300mg/l，还含有卡那霉素100mg/l或潮霉素50mg/l；所述选择成苗培养基是含有如下浓度的添加剂的1/2ms培养基：
α-萘乙酸0.5mg/l、硫酸铵1g/l、脯氨酸0.5g/l、谷氨酰胺0.5g/l、水解酪蛋白0.8g/l、五水硫酸铜1.5mg/l、蔗糖30mg/l、头孢霉素300mg/l，还含有卡那霉素100mg/l或潮霉素50mg/l。10.如权利要求8或9所述的培养方法，其特征在于，所述ms培养基是ms固体培养基，所述添加剂还含有植物凝胶；所述1/2ms培养基是1/2ms固体培养基，所述添加剂还含有植物凝胶。
技术总结
本发明提供了一种转基因青稞阳性材料，它是侵染根癌农杆菌的青稞种子，所述青稞种子的种胚露白长度为3～5mm。本发明建立了青稞遗传转化体系，以青稞种子为转化受体，通过刺胚接种侵染根癌农杆菌，可以成功获得转基因青稞阳性材料并培育得到青稞转基因植株，工艺简单、培养周期短，为青稞功能基因研究和青稞品种定向改良奠定了基础。向改良奠定了基础。向改良奠定了基础。
