Th细胞（能分泌多种细胞因子的细胞）

Th细胞（能分泌多种细胞因子的细胞）

Th细胞 （能分泌多种细胞因子的细胞） 次浏览 | 2022.09.18 10:13:28 更新 来源 ：互联网 精选百科 本文由作者推荐 Th细胞能分泌多种细胞因子的细胞

辅助性T细胞（helper T cell)，简称Th细胞，能分泌多种细胞因子。Th细胞是根据功能分类的一个T细胞亚群。Th2细胞主要分泌IL-4，IL-5，IL-6和IL-10等，主要功能为刺激B细胞增殖并产生免疫球蛋白G(immunoglobulinG，IgG)1和免疫球蛋白E(immunoglobulinE，IgE)抗体，与体液免疫有关。

少数Th细胞被称为Th3细胞，它除分泌大量的IL-4和IL-10外，主要高表达TGF-β，但是不分泌IL-2和IFN-γ，可以下调抗原递呈细胞(antigenprenting cells，APC)及Th1细胞的活性，起免疫抑制作用。未接触抗原的T细胞被称为Th细胞前体(Thcell precursor)，他们通过接触天然免疫细胞摄取的抗原而分化成一种不确定的状态，称为Th0细胞。

中文名

Th细胞

外文名

helper T cell)

分类

T细胞亚群

功能

刺激B细胞增殖并产生免疫球蛋白G

特性及功能分类

Th细胞是根据功能分类的一个T细胞亚群。据其分泌的细胞因子的不同可分为Th0、Th1、Th2和Th3四个亚型。Th1细胞主要分泌白细胞介素(interleukin，IL)-2，干扰素(interferon，IFN)-γ，IFN-a，肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)-β等，主要介导细胞毒和局部炎症有关的免疫应答，辅助抗体生成，参与细胞免疫及迟发型超敏性炎症的发生，故称为炎症性T细胞，可被视为相当于迟发型超敏反应T细胞(TDTH细胞)。因而，Th1细胞在机体抗胞内病原体感染中发挥重要作用。

主要功能

Th0细胞既分泌Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ，又分泌Th2型细胞因子IL-4，可在不同信号的刺激下分化为Th1或Th2细胞。Th1和Th2细胞除分泌不同的细胞因子，发挥不同的免疫作用外，他们各自细胞的表面受体也有许多的不同。

不同的表面受体不仅可以作为分离Th1/Th2细胞的表面标志物，而且直接影响Th1/Th2细胞对一些细胞因子的反应能力，从而调控着Th1/Th2细胞的分化与功能(表1)。趋化因子受体CXCR-3和CCR-5的表达是Th1细胞的标记(优先表达于Th1细胞的分子有b2肾上腺能受体、淋巴细胞激活基因子3、CDW150、CD162、CD49f/CD29等)，而CCR-3，CCR-4，CCR-7和CCR-8只能在Th2细胞表达，CD30也只与Th2细胞有关。

Th1细胞持续表达免疫球蛋白黏液素3(T cell immunoglobulin mucin 3，Tim-3)并可能通过半乳凝素类-9(Tim-3-galectin-9)途径抑制Th1细胞介导的免疫反应和诱导外周免疫耐受。

胞内细胞检测

Schauer等对胞内细胞因子的测定作出综合评价，标本来源包括末梢血单个核细胞、肿瘤细胞、组织细胞等，检测方法常用免疫组化法，主要为碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（APAAP）技术和测定mRNA的荧光原位杂交技术（FISH），此外还有显微荧光法，将单个细胞用多聚甲醛固定，皂素渗透后，行间接免疫荧光染色，以及Schauer等介绍的用刺激剂PMA（佛波酯）和Ionomycin刺激细胞，使细胞因子向高尔基体积聚，用BFA或Monensin阻断细胞因子向胞膜外转运，然后用流式细胞仪检测的方法。

总的来说TH1型细胞因子的检测相对容易，因为TH1型细胞能表达大量IL-2或IFN-γ，而TH2型细胞因子如IL-4、IL-5、IL-10的检测相对困难，主要原因是TH2型细胞在标本中的出现频率较低，所以有人建议用CD45RO+细胞来代替TH2的检测。

酶联免疫点法

（enzme-linked immunospot assay，ELISA）将抗细胞因子抗体包被反应板，加入待测T细胞，孵育一段时间后，加酶标记抗细胞因子抗体的酶作用底物，通过细胞的比色印迹法检测信号，最后通过图像扫描或专用的酶标仪进行分析。ELISPOT法引入生物素，亲合素放大系统后，灵敏度大为提高，在测定产生细胞因子阳性细胞频度方面，与流式细胞仪法相平行，但后教养可同时描述细胞性质和其他因子的产生情况，且结果更为客观，ELISPOT法一般双ELISA夹心法灵敏，因为其充分利用细胞因子在细胞分泌部位聚集浓度高的特点，并且ELISPOT法能够对每个细胞的分泌物定量。

核酸杂交法

这是一类利用细胞因子的基因探针检测特定细胞因子基因表达的技术，绝大多数细胞因子mRNA在T细胞中只短暂存在，其存在的量与T细胞产生细胞因子的量有很好的相关性，所以，在大多数情况下，细胞内mRNA的量可以反映细胞产生细胞因子的情况，目前反有公认的细胞因子的基因均已克隆化，故能较容易地得到某一细胞因子的cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探行，利用基因探针检测细胞因子mRNA表达的方法多种多样，常使用斑点杂交、Northern blot、逆转录PCR、细胞或组织原位杂交等。

实验的关键在于制备高质量的核酸探针和获得合格的待测物（提取的mRNA样品或细胞/组织标本）。核酸探针是指一段用放射性同位素或其他标记物（如生物素、地高辛等）标记并与目的基因互补的DNA片段或单链DNA、RNA。根据其来源可分为cDNA探针、寡核苷酸探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northerm blot，而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。

核酸探针技术的应用已经程序化，以cDNA探针为例主要包括：质粒DNA的提取；靶DNA自段的分离；靶DNA片段标记；待测样品mRNA的提取，标记cDNA探针对待检样品的杂交；放射自显影或显色分析。近年来RT-PCR检测特异性mRNA的方法广泛用于细胞因子研究领域。该法具有灵敏、快速等优点，甚至从1~10个细胞中就可检出的特异mRNA，适于科研或临床检测。

流式细胞仪检测法

流式细胞术（flow cytkmetery，FCM）其基本原理是：用刺激剂PMA、ionomycin（离子霉素）体外激活淋巴细胞，用蛋白转运抑制如黄能霉素（monensin）阻止细胞因子分泌到细胞外，细胞内蛋白质转运方式被打乱，引起细胞因子向高尔基体积聚，用流式细胞仪便可测出增强细胞因子。这一技术的发展使得以往通过T细胞克隆方式在几个月才能回答的问题，在几个小时内就能得以解决。该技术成为单细胞水平上检测细胞因子产生的标准分析方法，尽管细胞因子标记流式细胞技术具有其他方法无可比拟的优越性，但是在操作过程中，需要对细胞进行刺激、阻断、固定、穿透和标记，任何一个环节都会影响实验结果。

流式细胞仪法常用检测指标为以CD4设门进行FCM分析。通过CD4+细胞中IFN-γ和IL-4的表达来确定TH1/TH2细胞的百分率[9-10]。以CD3/CD8设门，用FCM检测分析TH1/TH2细胞的表达率，结果准确可靠，操作方便快捷，是检测TH1/TH2细胞较理想的方法[11-12]。近年来发现CD4+T细胞向不同的方向极化，细胞表面表达不同趋化因子受体（chemokine receptor），趋化因子受体CCR5主要表达于TH1细胞表面，是TH1细胞的特异性标记，因此，利用针对趋化因子受体的特异性单克隆抗体来测定TH不同亚群特异笥较高，而且操作较简单。CCR5和CCR3抗体是最近开发出来的，但只能反映TH细胞数量上的变化，其与功能（细胞因子分泌）的变化不否一致，有待进一步的研究。

对体液和细胞免疫的作用

TH细胞起始于能分泌IL-2的前身细胞，经最初的刺激，这些细胞发育为THO细胞，它能分泌几种细胞因子，包括IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-5和IL-10.根据细胞因子的作用，THO细胞能发育成为TH1或TH2细胞。[1]IFN-γ和IL-12有利于TH1的发育，而IL-4和IL-10有利于TH2的发育。TH1细胞分泌IFN-γ，TH2分泌IL-4，然而这两种亚类均等地分泌其他几种细胞因子（如IL-3，GM-CSF，TNF-α）。一般地说，TH1有利增强细胞免疫，而TH2有利于增强体液免疫。

参考资料