首页 > 试题

分光光度法测金葡浓度11月22日

更新时间:2024-12-23 12:24:38 阅读: 评论:0

2024年3月20日发(作者:行远)

用分光光度法粗测金黄色葡萄球菌菌悬液的浓度

实验目的:

通过

对同一菌液同时测吸光度值与平板菌落计数,将两个结果

做标准曲线。标准曲线做出后,通过测吸光度值间接反应菌悬液的浓

度,用于指导菌悬液的制备。

实验设备: U-2900 型

分光光度计

波长为600nm

比色皿厚度: cm

实验材料:空白对照液:0.9%无菌氯化钠溶液

稀释液:0.9%无菌氯化钠溶液

营养肉汤培养基

实验菌种:金黄色葡萄球菌(新鲜培养物)

实验步骤:

1.将金黄色葡萄球菌的新鲜培养物接种至营养肉汤培养基中,在30~

35℃恒温培养箱中培养18~24h。

2. 在无菌阳性室按无菌操作将培养后的金黄色葡萄球菌用0.9%无菌

氯化钠溶液稀释成不同浓度的菌悬液 。具体为分别吸取营养肉汤培

养液0.1ml,0.2ml,0.3ml,0.4ml,0.5ml,0.6ml,0.7ml到10ml 0.9%无菌

氯化钠溶液中,稀释成7种不同浓度的原始菌悬液。序号分别为1-7

号。

2.1平板菌落计数法测活菌浓度

取14个营养琼脂培养基平板,分别从每个原始菌液中,取0.2m

l的菌悬液,用平板涂布法,涂于平板中,标明序号,每个稀释度涂

2块平板. 37℃培养箱培养72 h后,可见菌落形成,选取菌落数在3

0~300间的平板进行计数,每组稀释度相同的平板取平均值作为菌落

数. 计算出原菌液细菌浓度,作为细菌菌液的标准浓度。

2.2分光光度法测菌悬液吸收值

同时将以上5种原始菌液在波长为600nm下测定吸光度。用0.9%

无菌氯化钠溶液作为空白对照,记录各原始菌液的吸光度值。

表一:平板菌落计数与吸光度值对比记录

序号

吸取原培养加样到平稀释

液的量(ml)板上的量倍数

---原始菌液

1

2

3

4

5

6

7

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

(ml)

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

5倍

5倍

5倍

5倍

5倍

5倍

5倍

平板计数菌落数

(cfu)

0.058

0.067

0.074

0.082

0.088

0.102

0.105

原始菌液的

吸光度值 含菌量(cfu)

3 结果计算

对同一菌液同时测吸光度值与进行平板菌落计数,将平板菌落计数所得菌液

浓度作为细菌标准浓度c. 根据所测出A值以及相对应的标准浓度c值,作出标

准曲线。

本文发布于:2024-03-20 06:19:59,感谢您对本站的认可!

本文链接:https://www.wtabcd.cn/zhishi/a/88/58234.html

版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。

本文word下载地址:分光光度法测金葡浓度11月22日.doc

本文 PDF 下载地址:分光光度法测金葡浓度11月22日.pdf

标签:平板   浓度   菌落
留言与评论(共有 0 条评论)
   
验证码:
推荐文章
排行榜
Copyright ©2019-2022 Comsenz Inc.Powered by © 实用文体写作网旗下知识大全大全栏目是一个全百科类宝库! 优秀范文|法律文书|专利查询|