灵芝三萜类药理作用研究

2024年4月1日发(作者：心太累)

灵芝三萜类药理作用研究

1．灵芝属三萜类新化合物

对灵芝脂溶性成分的研究在20世纪80年代达到了高潮，1982 年

Kubota等

[ 2 ]

首次分离到灵芝酸A(ganoderic acid A)和灵芝酸

B(ganoderic acid B) ，1988年从灵芝属中分离得到103种三萜类新

化合物

[ 3 ]

。

自1991年以来，从灵芝属真菌的子实体、孢子粉和菌丝体中先后

又分离到19个三萜类新化合物

[ 4～14 ]

，用波谱技术对其化学结构进行

了鉴定。

2．药理作用

2. 1 保肝作用 王明宇等

[ 15 ]

从赤芝子实体中得到粗组分GT ，

进一步经硅胶柱色谱得5个组分(GT1～GT5) ，经HPLC检测证实该

GT和GT2 主要含灵芝酸A和赤芝酸A(lucidenic acid A) 。实验表明

GT和GT2 对四氯化碳、氨基半乳糖苷和卡介苗+脂多糖所致的3种肝

损伤模型小鼠有较好的保肝作用，可明显降低模型动物的血清ALT和

肝脏TG含量，并不同程度减轻动物肝损伤。在小鼠免疫性肝损伤

(BCG + LPS)原代肝细胞体外培养试验中，作者观察到GT(015 ， 510 ，

50 ， 100μg·mL- 1)和GT2(015 ， 210 ，10 ，50μg·mL- 1)可不同

程度地降低损伤肝细胞上清液中ALT活性和NO的含量，与阳性对照

药马洛替酯(malotilate)作用相似。

2. 2 抗肿瘤作用 Toth等

[ 16 ]

首先报道了灵芝三萜类化合物的药

理活性。作者从赤芝菌丝体中提取得到6个有细胞毒活性的三萜类化

合物ganoderic acidU ，V ，W ，X ， Y和Z ，体外实验表明能明显

抑制小鼠肝肉瘤(HTC)细胞的增殖。Lin等[ 17 ]从赤芝子实体中分离到

2个三萜类化合物灵芝醛A和双氢灵芝醛A ，体外实验表明两者有较

强的抑瘤活性，对人肝肉瘤细胞和KB细胞ED50值均在1～11μg·mL-

1，以灵芝醛A作用最强。

2. 3 抗HIV21及HIV21蛋白酶活性 Min等

[ 6 ]

从赤芝孢子粉

中分离得到ganoderic acidβ，lucidumol B ，ganodermanondiol ，

ganodermanontriol和ganolucidic acidA。体外试验表明对HIV21

蛋白酶活性有明显抑制作用，其IC50分别为20 ，50 ，90 ，70和

70μmol·L- 1;此外，ganoderic acid A ，ganoderic acid B 和

ganoderic acidC1 亦 有 中 度 的 抑 制 作 用， 其IC50 为140～

430μmol·L- 1。作者认为羊毛甾烷型母核C23或C224 ，C225位上

的羟基是其抗HIV21蛋白酶活性的必需基团。Sahar等

[ 5 ]

用生物活性

追踪法从赤芝子实体的甲醇提取物中分离得到13个化合物。在抗

HIV21活 性 的 初 筛 实 验 中， 化 合 物ganoderiol F 和

ganodermanontriol可抑制由HIV21诱导的MT24细胞的细胞毒效

应，两者IC100均为718μg·mL- 1，而且此浓度仅为其细胞毒浓度的

50 %。抗HIV21蛋白酶实验采用受试物与重组HIV212PR及其合成底

物体外共孵育，15 min 后三氟乙酸(TFA)终止反应，经HPLC方法检测

水解产物和剩余底物，根据相对峰面积计算IC50值。结果发现

ganoderic acid B和ganoderiol B的抑 制 作 用 最 强( IC50 均 为

0117 mmol·L- 1) ;ganoderiol F ， ganoderic acid C1 ， 3β， 5

α2dihydroxy26β2methoxyergosta27 ，222diene ， ganoderic

acidα， ganodericacid H和ganoderiol A 有中度抑制作用，其

IC50 在0118～0132mmol·L- 1。在对HIV21反转录酶的实验中，13

个化合物在浓度低于0125mmol·L- 1时，均无抑制活性。尽管实验对

所试化合物的构效关系未能得到明确的结论，但作者认为有Δ7(8)，

Δ9(11)双键结构的羊毛甾烷型三萜化合物与抗HIV21活性密切相关，

而甾醇类化合物(compound 10～12)则无此活性。

2. 4 抑制血管紧张素转化酶( ACE) Morigiwa

[ 19 ]

报道用

Friedland和Silverstein方法测定10个灵芝三萜类化合物在体外对

ACE酶的作用，发现ganodericacid F 对ACE有抑制作用，其IC50

为417×10- 6mol·L- 1，其他9个化合物IC50在1×10- 5～1×10-

4mol·L- 1范围内。

2. 5 抑制胆固醇合成 Komoda等

[ 20 ]

报道，用大鼠肝细胞

1×104×g离心得到的亚细胞上清液为体外反应体系，发现羊毛甾醇类

衍生物72酮2羊毛甾282烯23β2醇、14α2甲基2胆甾272烯23β，

15 α2二醇和羊毛甾272烯23β，15 α2二醇均可抑制由羊毛甾或24 ，

252二羟基羊毛甾至胆固醇的生物合成。认为C27位羰基或C215位

α2羟基是抑制胆固醇合成的必需基团。此外，作者经由methyl

ganoderate C人工合成了化合物

VI(252demethyl2lanost272oxo282en27β，15 α2diol) ，证实其在

体外能抑制胆固醇生物合成，药物终浓度为20和40μmol·L- 1时，

抑 制 率 分 别 为72 %和84 %。Shiao等[ 21 ]在大鼠的高胆固醇饲料

中加入灵芝的菌丝体，可显著降低血清和肝脏中胆固醇和甘油三酯的

含量，并指出其有效成分是三萜类，主要是ganodermicacid R和S ，

可抑制食物中的胆固醇吸收。目前认为，灵芝中的氧化三萜类化学结

构与哺乳动物胆固醇生物合成途径中羊毛甾醇后的中间体类似，可抑

制胃肠道吸收食物中的胆固醇。这些氧化三萜类还抑制胆固醇合成过

程中的限速酶 32羟232甲戊二酸单酰辅酶A(HMG2CoA)还原酶，并

因此而抑制胆固醇合成。体外实验，在考莱烯胺(cholesteramine)预

处理的大鼠肝切片培养中加入灵芝所含的氧化三萜类，可使[ 223H ]醋

酸盐和[ 2214C ]羟基戊酸参入胆固醇合成减少。可见这些氧化三萜类

还影响胆固醇生物合成过程中羟基戊酸后的环节。

2. 6 镇痛作用 Koyama等

[ 22 ]

报道，用醋酸扭体法为活性筛选

指标，从灵芝子实体的二氯甲烷提取物部分经硅胶柱色谱和HPLC制

备得到4个具有镇痛活性的灵芝三萜类化合物：ganoderic acids A ，

B ， G和H。按剂量3～5mg·kg- 1sc 给药可产生较好的镇痛效果，

扭体反应抑制率在30 %～64 %( P< 0105) ，其中以ganoderic acid

H效果好。同时，作者对比分析了ganoderic acid H 和 与 其 结 构 十

分 相 似 的compound C6 的镇痛作用，认为ganoderic acid H作用

强的原因是其C212位上的羟基被乙酰化，由此增加了该化合物的吸收

度，而compound C6 的C212位上的取代基为羟基。

2. 7 对 血 小 板 聚 集 的 影 响 Su 等[ 23～24 ]报 道

ganodermic acid S (GAS ，化学名：lanosta27 ，9(11) ，

242triene23β，15 α2diacetoxy2262oic acid)对TXA2 在人源血小板

中信号传导途径的影响。发现GAS对TXA2 拟似物U46619所诱导的

人源硅胶过滤处理的血小板(GFP)聚集具有明显抑制作用，可延迟血小

板发生形态改变的时间，减少血小板的初始聚集并降低其聚集 百 分 率，

该 抑 制 作 用 有 剂 量 依 赖 性。2μmol·L- 1GAS抑制率即可达到

50 % ;当浓度增加至715和10μmol·L- 1时，可完全抑制血小板聚集，

但不能对抗TXA2 所致血小板形态改变。细胞内[ Ca2 +]i测定显示

GAS能明显抑制U46619诱导的血小板内[ Ca2 +]i增加;此外，可强烈

抑制由U46619诱导的二乙酰甘油的形成。这表明GAS可能抑制了

U46619对PLCβ1的诱导活化。TXB2 生成测定实验显示GAS可显著

抑制由U46619诱导的TXB2 生成，提示GAS可能抑制PLA2 的活化。

作者还测定了血小板内cAMP水平，发现单用GAS不影响静息血小板

细胞的cAMP水平，但是能剂量依赖性地升高PGE1 诱导的血小板内

cAMP水平;U46619能够抑制PGE1 或PGE1 + GAS诱导的血小板

cAMP水平增高，其抑制率可达40 % ，表明GAS不能对抗U46619

的这一抑制作用。作者采用蛋白免疫印迹法检测了血小板中蛋白2酪

氨酸磷酸化的形成，结果显示GAS对早期的蛋白2酪氨酸磷酸化无抑

制作用，但可明显抑制第2、第3期的磷酸化反应，对p53～58及

p51的抑制率可达30 % ;与此同时，对其余蛋白质磷酸化反应的抑制

率则超过70 %。提示GAS可能抑制了与整合蛋白αII b β3 启动及血

小板聚集有密切相关的蛋白2酪氨酸磷酸化过程。根据这些实验研究

结果，作者认为GAS是通过抑制血小板2TXA2 反应系统中

TXRα2Gq2PLCβ1信号传导通道的蛋白2酪氨酸磷酸化过程，使二乙

酰甘油和[ Ca2 +]i水平降低，最终抑制血小板的脱颗粒和聚集; GAS并

不影响血小板2TXA2 反应系统中的另一信号传导通道TXRβ2Gi。推测

这两个通道的脂质微环境有所不同， GAS 可能更易于与前者的微脂质

区结合，从而抑制该通道的信号传导。

2. 8 抑制真核细胞D NA多聚酶活性 Mizushina等

[ 29 ]

从赤芝

中分离得到2个新三萜类化 合 物lucidenic acid O 和lucidenic

lactone ，两者在体外对真核细胞DNA多聚酶的活性都有选择性抑制

作用。Lucidenic acid O和lucidenic lactone 不仅对小牛DNA多聚

酶α和大鼠DNA多聚酶β，而且对HIV21反转录酶亦有抑制作用，

但是对原核细胞DNA多聚酶和其他DNA代谢酶，如T7 RNA多聚酶、

DNA酶I的活性没有影响。

3.展望

有悠久药用历史的灵芝是中医药学宝库中的珍品，拥有广泛的生

物活性。灵芝所含的三萜类化合物结构复杂，分子中功能基团较多，

目前除了少数化合物进行了药理活性研究之外，多数未进行活性研究。

有必要采用现代科学技术方法对其药理作用、构效关系、作用机理等

方面进行深入和系统地研究，为开发利用灵芝资源打下坚实的基础。