土壤可溶性有机氮,硝态氮,铵态氮和微生物量氮测定

2024年4月1日发(作者：上课传纸条)

土壤可溶性有机氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮最方便最简单的测定方法

1.母液制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在

25℃下培养7~15d。取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml

精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿

沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。干燥器放入25℃培养箱中24

小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，

一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（未熏蒸为空白直接称取

15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。其中熏蒸后的土壤过滤

液为A母液，未熏蒸的土壤过滤液为B母液。母液要是不及时测定，需立即在-15℃以下

保存

2.测定

可溶性有机氮=可溶性全氮-（铵态氮+硝态氮）

要是有流动分析仪器还有TOC的话可以利用A母液测得碳氮减去B母液的碳氮含量

根据公式计算得出微生物碳氮，可以用B母液测的铵态氮、硝态氮和可溶性全氮，是很方

便的。

以下的是用传统的方法测定以上指标，经过852个土壤样品试验结果还是很好的。

土壤可溶性全氮测定

氧化剂:将6g NaOH 和30g K

2

S

2

O

8

溶于蒸馏水中并定容至1 L(K

2

S

2

O

8

比较难溶，

在低于60℃得瑟水浴中溶解，高于60℃配置的溶液至其氧化性失效，NaOH制成溶液，

致其温度达到常温后与K

2

S

2

O

8

溶液混合定容至1L)

测定：移取A母液10ml至消化试管，加入10ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到

120℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A

220

和A

275

，空白需加入1ml氧化剂并

同时作水浴处理。（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。）

标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为

100mg/L的氮标准贮存液。稀释10倍即为10mg/L的氮标准溶液。吸取氮标准溶液（梯

度为0ml，1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml；对应浓度分别为0 mg/L，0.02 mg/L，

0.04 mg/L，0.06 mg/L，0.08 mg/L，0.10 mg/L，0.12mg/L）于50ml容量瓶中，各加

入1ml氧化剂并定容，得氮的标准系列，与样品同样消煮测定A

220

和A

275

。以A（A=

A

220

-A

275

）为纵标，氮浓度为横标绘制标准曲线。

硝态氮测定1

注：硝态氮测定1仅适合于农田土壤，腐殖质含量比较低的土壤，森林土壤和腐殖质

含量比较高的土壤不适用，因为森林土壤和腐殖质高的土壤有腐植酸的颜色，干扰比色可

采用硝态氮测定2进行测定

测定：移取B母液5ml定容至50ml容量瓶中，使用紫外分光光度计测定即可，在

220nm和275nm直接测定A220和A275，用校正吸光度A=A220-A275查得硝酸根浓

度，空白为去离子水。

NO3--N标准曲线：0.1631g硝酸钾溶解定容至1L，制得浓度为100mg/L的硝酸根