5-Fu尿嘧啶对人体胚胎肾细胞的抑制作用

更新时间:2024-03-31 13:19:53 阅读: 评论:0

2024年3月31日发(作者:大全邮箱)

5-Fu尿嘧啶对人体胚胎肾细胞的抑制作用

5-Fu尿嘧啶对人体胚胎肾细胞的抑制作用

摘要:

运用MTT测定细胞活力的方法,检测经过不同浓度的5-氟尿嘧啶培养2天细胞的生

长状况,计算不同浓度5-FU对细胞生长的抑制率。实验结果表明,在一定的浓度范围内,

随着5-FU浓度的提高,细胞的抑制率也提高;而10ug/ml的5-FU已经对细胞有比较明

显的抑制作用。5-FU浓度达到150ug/ml左右时对细胞的抑制作用趋于最大,浓度再增

大对细胞的抑制率基本稳定在75%左右不再上升。

5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),是尿嘧啶5位的氢被氟取代的衍生物,是以抗代

谢物而起作用,在细胞内转化为有效的氟尿嘧啶脱氧核苷酸后,通过阻断脱氧核糖尿苷酸

受细胞内胸苷酸合成酶转化为胸苷酸,而干扰DNA的合成。氟尿嘧啶同样可以干扰RNA

的合成。常用于治疗肿瘤。但由于5-FU对用药的患者有比较大的毒副作用,为治疗结果

带来更多的不利影响,且此药通常用于治疗胃癌[5],对宫颈癌细胞会有多大疗效,用药的

浓度等基本的药理信息还比较缺乏。本实验用宫颈癌细胞做体外药物抑制效果实验,尝试

探讨5-FU对细胞的抑制作用大小以及其用药浓度,为临床用药量研究提供基础资料。

关键词:5-氟尿嘧啶、细胞、MTT法、抑制率

引言:

MTT法作用原理

MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,

汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一

种黄颜色的染料。

MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥

珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色(或蓝色)结晶甲瓒(Formazan)

并沉积在细胞中;在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比。二甲基亚砜(DMSO)

能溶解细胞中的甲瓒,因此用酶联免疫检测仪在490nm或570nm波长处测定其光吸收值,

可间接反映活细胞数量。由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶,因此加入MTT不会有反应。该

方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验

以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。

MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检

测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT吸光度最好在0-0.7范围内。同时,利用

已知浓度细胞培养后的吸光度可以生成细胞生长趋势曲线,通过该曲线可推测出某一未知

浓度细胞的原始接种浓度。

5-氟尿嘧啶抑制癌细胞生长原理

恶性肿瘤患者由于肿瘤细胞无止境地分裂、增殖而不断地消耗宿主的营养物质,以及

宿主因荷瘤状态所存在的代谢紊乱,机体常存在不同程度的营养不良,严重者导致恶液质,

体质下降。5-氟尿嘧啶能够抑制癌移植瘤的生长并诱导瘤细胞的凋亡。5-氟尿嘧啶能选择

性地攻击DNA碱基的氮原子,特别是鸟嘌呤的第7位氮原子,和胞嘧啶的第3位氮原子

结合。由于和DNA呈交叉联接,对DNA的构型有明显影响,使双螺旋解旋使分子变短;

可与DNA形成链内交联,也可形成链间交联或DNA-蛋白质间的交叉联结,由于其可使

DNA的模板作用失活,从而抑制DNA合成而抑制肿瘤的生长。

5-Fu尿嘧啶对人体胚胎肾细胞的抑制作用

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标签:细胞   浓度   氟尿嘧啶   生长   抑制   检测   实验   测定
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