抗人球蛋白配血试验

2024年3月27日发(作者：美丽的晚霞)

抗人球蛋白配血试验

红细胞表面被大量的IgG抗体分子及补体分子C3、C4的片段所包绕，这些包绕物均为人球

蛋白，不足引起凝集反应，这种红细胞称为致敏红细胞。而抗人球蛋白血清(anti—globulin)，

可以与致敏红细胞作用发生凝集，即红细胞表面的人球蛋白与抗人球蛋白血清发生特异性反

应而使红细胞凝集，抗人球蛋白分子起着搭桥作用，从而证明IgG抗体的存在。

(2)材料

1)受血者和供血者血清及5%红细胞悬液(红细胞需洗涤3次)。

2)抗人球蛋白血清(最适稀释度)。

3)抗D血清。

4)AB型血清。

5)5%Rh(D)阳性红细胞悬液。

(3)操作

1)取小试管3支，分别标明主侧管(Ps+Dc)即受血者血清加供血者红细胞，次侧管(Pc+DS)即受

血者红细胞加供血者血清，自身对照管(Ps+Pc)，即受血者血清加受血者红细胞。

2)主侧管内加受血者血清4滴和供血者5%红细胞悬液1滴；次侧管加供血者血清4滴和受

血者红细胞悬液1滴；自身对照管内分别加受血者自身血清4滴和自身红细胞悬液1滴。摇

匀混合，置37℃水浴30～60分钟，每隔15分钟振摇1次试管，促进反应。

3)取出试管以生理盐水洗涤红细胞3次，末次弃尽盐水。

4)各管内加最适稀释度抗人球蛋白血清2滴混匀。

5)以3 500r/min离心15秒。肉眼观察。

6)同时用抗D血清和AB型血清按上述与Rh(D)阳性红细胞做阳性、阴性对照。

(4)结果分析

先看阳性、阴性对照管是否符合，如对照无问题，再看Ps+Dc及Ds+Pc管有否凝集，无凝集

就可输用。如Ds+Pc管显凝集，须看自身对照管。如自身对照管也显凝集，说明受血者红细

胞上已有抗体吸收。假如Ds+Pc管凝集不强于对照管，可输用。Ps+Dc管有凝集时不能输用。

(5)报告方式

1)Ps+Dc抗人球蛋白试验阳(阴)性。

2)Pc+Ds抗人球蛋白试验阳(阴)性。

(6)注意事项

1)抗人球蛋白配血试验须用受血者血清而不能用血浆，因抗凝剂是抗补体的，对某些需要补

体的抗体可能不能显示。

2)假如遇到1例受血者，其血清具有一种抗体，既不是自身抗体，又对许多人的红细胞均显

凝集，又急需输血时，可试用其兄弟、姐妹的血液做交配，可能会有配合的。

3)自身免疫性溶血性贫血病人有时血清中有非特异性抗体。对每一个供血者的Ps+Dc管均呈

凝集，此时要参照自身对照，如 Ps+I)c管反应比较弱，受血者又急需输血，也可输给。如几

个供血者中反应有强有弱，就选择反应弱的。最好先确定受血者的抗体有否型特异性，如受

血者有抗e则选用R2R2血液，除特异性抗体之外，还有非特异的，还需注意有无同族抗体。

4)本试验Ps+Dc及Ds+Pc管致敏用血清量太多，这是因抗人球蛋白试验致敏时用的血清量愈

大愈敏感。做配血试验时受血者可能有极弱的抗体，不易检出，在输给不合的血液后出现溶

血。

为此将致敏用的血清多加一些，如受血者标本很少，也可按常规做法即血清2滴加供血者压

积红细胞1滴。

2 PEG-IAT法

间接抗人球蛋白试验(IAT)是一种较理想配血试验，但因试验所需时间长，临床急需输血时使

用极不方便。因此，我们实验室对IAT试验进行改良，在原试验基础上添加了聚乙二醇(PEG)

试剂，即称PEG-IAT试验。PEG为一种无电荷的大分子物质，加入反应溶液中，可增加反应

速度，有利于反应物之间相互碰撞，易形成免疫复合物，提高抗原抗体的敏感性。传统的

IAT试验需37℃水浴60分钟，而改良后PEG-IAT试验，只需37℃水浴5分钟。王振芳等改良

后的PEG-IAT配血试验，经多年临床观察，认为该方法时间短，且敏感性高、特异性强，可

作为常规配血技术。PEG- IAT试验详见《上海医学检验杂志))1997；12(2)：95。

(1)材料

1)受、供者的血清及5 %红细胞悬液(红细胞洗3次)。

2)抗人球蛋白的血清。

3)抗D血清。

4)AB型血清。

5)5%Rh(D)阳性红细胞悬液。

6)3%PEG溶液。

(2)操作

1)取小试管3支，分别标明主侧管(Ps+De)，即受血者血清加供血者红细胞，次侧管(Pc+Ds)即

受血者红细胞加供血者血清，自身对照管(Ps+Pc)，即受血者血清加受血者红细胞。

2)主侧管内加受血者血清1滴和供血者5%红细胞悬液1滴；次侧管加供血者血清1滴和受

血者红细胞悬液1滴；自身对照管内分别加受血者自身血清1滴和自身红细胞悬液1滴。

3)主侧、次侧、自身对照3管分别加入3%PEG溶液2滴。

4)混匀，置37℃水浴5分钟。

5)取出以上各管，以生理盐水洗涤3次，末次弃尽盐水。

6)各管内加最适稀释度抗人球蛋白血清1滴，并混匀。

7)以3500r/min离心15秒，肉眼观察。

8)同时用抗D血清和AB型血清按上述与Rh(D)阳性红细胞做阳性、阴性对照。

(3)结果分析

同抗人球蛋白配血试验结果分析。

(4)报告方式

1)Ps+Dc PEG-IAT有(无)凝集、溶血。

2)Pc+Ds PEG-IAT有(无)凝集、溶血。

参 考 文 献

[1]王培华.输血技术学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2002:126-131.

[2]中华人民共和国卫生部.卫医发[2000]184号,临床输血技术规范.

[3]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M],第3版.南京:东南大学出版

社,2006:262-264.