葡萄酒制作实训报告

更新时间:2024-03-20 09:06:02 阅读: 评论:0

2024年3月20日发(作者:小时候的味道)

葡萄酒制作实训报告

葡萄酒制作实训报告

葡萄酒制作实训报告

《葡萄酒的制作》

实验报告

一、材料:

葡萄(3斤挑选紫红色大个新鲜葡萄,颜色越深越好,注

意葡萄上的白色菌尘要完好)

白砂糖(8两白砂糖要细而散不能有融化粘滞现象)

二、用物器皿:

大矿泉水瓶(1个)、小矿泉水瓶(1个)、细纱布(1

块)、保鲜膜、大水杯(1个)

三、制作过程:

1、将大矿泉水瓶洗净放在太阳下晒干备用。

2、将买来的葡萄放在水龙头下冲洗干净,注意不要用手

碰触葡萄,以免弄掉葡萄表面菌尘。

3、将洗净得大串葡萄剪成小串,放到阴凉通风处待干

(表皮不能有一点水分)。

4、将已干得葡萄捏碎,将皮、肉、籽都放入备用大矿泉

水瓶中(葡萄不得过瓶2/3)

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5、将保鲜膜覆于瓶口,旋上瓶盖(瓶盖不能过紧)6、将

其静置于阴凉通风处两周,每天清晨观察一次。

7、用纱布将葡萄酒过滤于大水杯中,再倒入小矿泉水瓶

中密封。

四、观察内容:

第一天:葡萄上面有泡泡冒出,颜色还未变,糖部分融

化;

第二天:泡泡增多,瓶底颜色稍变红,糖部分融化;第三

天:水分增多,葡萄上面有白色物,颜色变深的宽度较大,糖

大部分融化;第四天:颜色继续加深;

第五天:颜色呈酒红色,基本覆盖全部葡萄,糖基本融化

完;第六天:靠近已有闻已有酒味;第七~十四天:基本不变

一个月后:不冒泡泡,颜色呈紫红色,滤出五、结果:

葡萄酒呈紫红色、澄清,旋开小矿泉水瓶口有酒香味溢出

略有一点甜味,入口有浓郁酒香略带涩甜味道。

六、体会感受:

这是一次考验耐心的体验,等待水瓶晒干、等待葡萄晾

干、等待酿制成酒,每天都欣喜的观察它的变化。第一次酿制

葡萄酒,当成酒时,那种激动和欣喜是不言而喻的。

一次亲手制作,学会的不仅是它的制作方法,它让我对酒

有了更大的兴趣和更深入的了解,我国酒文化始于夏朝,从古

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到今人们一点点的发现它对于治病和养生的重大意义。中医饮

食调护中有多种药酒的制作方法,更大可能的发挥了酒和药的

功能。

灿烂的酒文化等待着新一代人去学习传承和发展!

葡萄酒制作实验报告

学院:护理学院

班级:201*级护理丙班

学号:3100601219

姓名:张蓓蓓

扩展阅读:葡萄酒的酿造实验报告

葡萄酒的酿造及其中酵母菌对发酵过程的影响

实验设计方案

一、前言:

葡萄酒是用新鲜的葡萄或葡萄汁经发酵酿成的酒精饮料。

通常分红葡萄酒和白葡萄酒两种。前者是红葡萄带皮浸渍发酵

而成;后者是葡萄汁发酵而成的。我们所要酿造的是红葡萄

酒。

葡萄酒有增进食欲,滋补作用的作用。葡萄酒中含有糖、

氨基酸、维生素、矿物质。这些都是人体必不可少的营养素。

它可以不经过预先消化,直接被人体吸收。非凡是对体弱者,

经常饮用适量葡萄酒,对恢复-健康有利。同时还有助于消

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化,葡萄酒能刺激胃酸分泌胃液,每60-100克葡萄酒能使胃

液分泌增加120毫升。

自酿的葡萄酒,不用添加发酵剂,也不添加任何防腐剂和

澄清剂。家酿的葡萄酒利用葡萄皮上的野生酵母菌分解葡萄中

的糖份转化为酒精,另加点糖提高酒精度。一般保质期不超过

两年,所以成酒后应在两年内喝光。

二、实验目的:

1、熟悉酿造葡萄酒的过程和原理。2、学会葡萄酒中酵母

菌的分离纯化。3、熟悉酵母菌形态观察和菌落计数法

4、对比来说明,酵母菌对葡萄酒发酵的影响,杀菌剂

(SO2)对发酵过程的影响。

三、材料和仪器:

(一)材料:葡萄3斤(因葡萄还未上市,可用提子代

替,苏果超市有,但比较贵)。

白糖半斤

(二)仪器:1、主发酵器:玻璃罐(坛、瓶)、陶瓷

坛、能耐受酒精又对人无害的塑料瓶罐等均可。

2、二次发酵容器及装酒的容器:可以用空酒瓶、饮料

瓶、矿泉水瓶等都可3、一根细塑料管。用来在发酵完成后利

用虹吸法将葡萄酒从发酵容器中倒出。

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4、木棒或筷子。用来在发酵过程中搅拌葡萄皮和葡萄

汁。5、丝袜或细纱布。用来过滤葡萄酒汁。

四、实验步骤:

(一)葡萄酒的酿造

1、清洗:将主发酵器(即玻璃坛等)充分洗干净,控

干。

2、浸泡:将葡萄摘除蒂,把剪好的葡萄冲洗干净后用淡

盐水浸泡十分钟左右,这是为了去掉葡萄皮上的农药和其他有

害物质,再次冲洗,晾干至表面没有水珠。

3、装瓶:将葡萄捏破,葡萄肉连同葡萄皮挤到主发酵器

中。当把葡萄装到发酵器容量的70%左右时,停止装葡萄,盖

上盖子,但不要完全拧紧。

1

4、发酵:将装好葡萄的发酵器放在28℃恒温培养箱内。

葡萄装入发酵器后,大约会在12个小时以内启动发酵,表现

为葡萄汁中有较多气泡产生。在发酵启动后,每天两次用木棒

或筷子将葡萄皮压入酒液中,然后盖上盖子。

5、加糖:发酵启动后一到两天内,放入250g白糖,作用

是提高酒精度。发酵启动后三到四天时,再次放入白糖

250g,将糖浸入葡萄汁中搅拌均匀。

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6、二次发酵:当酒精发酵完成后,首先利用虹吸法,将

葡萄酒汁倒入二次发酵器,然后将剩下的葡萄皮、籽、糟等用

丝袜或细纱布过滤,过滤后的酒液也混入二次发酵器中。葡萄

皮、籽、糟扔掉。注意二次发酵器留有1/10空隙,盖子也不

要拧的很紧。放在阴凉处。二次发酵主要是苹果酸-乳酸发

酵,不再产生酒精。

7、加入澄清剂,加入少量酒精。二次发酵完成,即得到

葡萄酒原酒。8、口味:自酿出的葡萄酒是酸的,还有一些的刺

激性味。附:葡萄酒的质量检测

葡萄酒的质量指标是现行国家标准GB/T15037-94中规定

的检验指标;色泽:紫红、深红、宝石红、红微带棕色

澄清程度:澄清透明、有光泽、无明显悬浮物(使用软木

塞封口的酒允许有3个以下不大于1mm的软木渣)。葡萄酒应

是澄清的,若酵母菌生长,则会出现浑浊,所以要检测出我们

自酿的葡萄酒中酵母菌的含量是否合格。

香气:具有纯正、优雅、怡悦、和谐的果香甜味:具有纯

净、幽雅、爽怡的口味和新鲜

(二)酵母菌的分离纯化

1、制备葡萄酒稀释液

取发酵2-3天时的葡萄酒液,称量1g于盛有99mL无菌水

的三角瓶中,充分振荡,此即为10-2浓度的菌悬液。用无菌

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移液管吸取悬液0.5mL于4.5mL无菌水试管中,用移液管吹吸

三次,摇匀,此即为10-3浓度。同样方法,依次稀释到10-

7。稀释过程需在无菌室或无菌操作条件下进行。(稀释倍数

是根据微生物的数量进行选择,不固定。可以直接涂布、或划

线法分离纯化。)

2、涂布法分离(酵母菌定量分离用)

依前法向无菌培养皿中倾倒已融化并冷却至45~50℃的

马铃薯葡萄糖培养基,待平板冷凝后,用无菌移液管分别吸取

三个不同稀释度(10-4,10-5,10-6)菌悬液0.1mL-0.2,依次

滴加于相应编号已制备好的马铃薯葡萄糖培养基平板上,右手

持无菌玻璃涂棒,左手拿培养皿,并用拇指将皿盖打开一缝,

在火焰旁右手持玻璃涂棒于培养皿平板表面将菌液自平板中央

均匀向四周涂布扩散,切忌用力过猛将菌液直接推向平板边缘

或将培养基划破。

3培养观察接种后的所有平板倒置与适宜温度培养箱中培

养。大约28-30度,时间两到三天。将葡萄分为两组发酵,一

组为空白对照,另一组加入提取出的酵母菌,观察其在发酵过

程中酵母菌的生长对葡萄酒发酵时间的影响。

4、酵母菌形态观察

2

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将每个发酵阶段的葡萄汁用显微镜观察其中酵母菌的菌体

特征

(三)酵母菌的检测

利用血球计数法测定

材料与仪器:

葡萄酒汁,血球计数板,显微镜,盖玻片,无菌毛细管。

操作步骤:

1、镜检计数室

在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则

需清洗后才能进行计数。2、加样品

将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的细口滴

管将稀释的葡萄酒汁由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多),让

菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室,一般计数室均能

充满菌液。注意不可有气泡产生。

3.显微镜计数

静止5分钟后,将血球计数板置于显微镜载物台上,先用

低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。在计

数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。一

般样品稀释度要求每小格内约有510个菌体为宜。每个计数室

选5个中格(可选4个角和中央的中格)中的菌体进行计数。

位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。如遇酵母出

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芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作两个菌体计数。计数

一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。

4.清洗血球计数板

使用完毕后,将血球计数板在水笼头上用水柱冲洗,切勿

用硬物洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每

小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复

洗涤至干净为止。实验结果:次数各中格中细胞数112345注

意事项:

1、各类容器一定要洗干净,葡萄在酿制过程中不能碰到

油污、铁器、铜器、锡器等,但可以接触干净的不绣钢制品。

2、在发酵时,发酵器的盖子一定不要盖死,防止爆炸。

3、糖不要多放,那样会影响发酵过程,产生我们不希望

的成分,如果想喝甜葡萄酒,可以在发酵完成后饮用时加糖。

2345平均菌液浓度/(个/ml)3

五、具体操作过程和实验现象及分析

(一)第一次发酵:

葡萄的清洗,捏碎,装罐,加盖(稍微透氧)做成两个瓶

葡萄酒,一瓶对照(加入分离纯化后的酵母菌),一瓶空白。

将两个发酵罐放在28恒温培养箱中发酵。注意不要太用力搓

洗葡萄,以防把葡萄皮上的野生酵母菌洗掉。

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每天都到实验室里,将浮在上面的葡萄按下去,以便皮上

的酵母菌得到充分的利用。加糖:第一次加糖发酵两天后,第

二次发酵五天后。每次每瓶加75克糖。

(二)第一次培养和观察:(1-3天)

实验准备:制备PDA培养基,灭菌,低温保存;培养皿灭

菌,制备无菌水并保存。

1、据实验方案,12小时后酒精发酵启动,所以1天后,

我们提取了适量葡萄汁,进行酵母菌的分离培养。取0.5ml的

葡萄汁,梯度稀释成10-1,10-2……10-6,采用平板涂布的

方法,进行第一次培养。取10-4,10-510-6的三个梯度的稀释

菌液进行涂布接种,每个梯度三个培养皿。涂布完成后,放入

28℃恒温培养箱倒置培养,一到两天。

2、葡萄汁的制片观察:

取适量葡萄汁和无菌水混合,再附上载玻片,置于十倍镜

下观察

现象:由于葡萄汁成分非常多,所以镜头里背景很模糊,

而且,只能观察到很少的类似于酵母菌的单个细胞,放置于

40倍镜下,观察也不是很清楚,其他大多是杂菌和杂物在乱

跑。(分析,发酵未真正启动,葡萄皮上的酵母菌,还未在葡

萄汁中大量繁殖,所以是视野里的现象模糊,酵母菌很少)

3、葡萄酒的观察现象

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从之前强烈的果香味转变为有淡淡的酒香味,而且3-4天

时,发酵罐中有大量的气泡,葡萄皮颜色变暗,葡萄汁增多,

且颜色更深。

葡萄酒中的酵母菌的观察,此时,由于,酵母菌的大量繁

殖,在显微镜的视野里已经能,观察到很清晰的酵母菌个体,

而且数量较多,图像背景亮了很多,(可能是酵母菌的生长抑

制了其他杂菌的生长,是的葡萄之中的杂质变得很少了。)

4、三天后,去取培养好的九个培养基,观察其中菌落的

生长情况

现象:实验结果似乎没有那么理想,培养基中的菌落,可

谓五彩缤纷,有白色的菌落,有黄色的粉状的菌落,有绿色的

干燥的菌落,最多的就是黑色霉菌的菌落,散发出来的味道更

偏于霉菌的味道,而且,大多的菌落干燥,且成绒毛丝状。

显微镜观察:尽量挑取一些,纯净的白色菌落的菌种,和

无菌水混合置于显微镜下观察,发现,菌种不纯,有一些清晰

可见的酵母菌细胞,但也参杂着一些霉菌的特征结构。

结果处理方案:挑取一些疑似的白色菌种,进行涂布培

养,方法同上,培养1-2天。

同时,也要再做一个备份,万一,白色的菌落不是酵母

菌,所以,再取此时的葡萄汁,再做六个培养基,进行培养,

原理同上。

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(三)第二次培养观察:(4-5天)

葡萄酒里发酵现象的观察:葡萄酒里产生了浓郁的酒精味

到,而且葡萄酒里有很多泡沫。

4

疑似菌落的观察:观察上次疑似菌种培养基的培养结果,

发现效果还是不佳,虽然有很少的的黑色霉

菌生长,但是通过显微镜观察,发现,它应该是霉菌的一

种,而不是酵母菌

备份培养基的观察:有意外的收获,发现,备份的六个培

养基,酵母菌生长的都很好,有很多的乳白色的圆形斑点,湿

润且光滑,闻起来有酒香味,且没有其他的杂菌,很符合,酵

母菌的菌落培养特征。且通过显微镜的观察,观察到了很清晰

的酵母菌细胞。

对比分析:第一次培养的失败的原因:

1、可能是刚一开始,葡萄汁中的酵母菌很少,而稀释的

倍数太大,导致涂布培养时,其他杂菌的数量优势甚于酵母

菌,所以才会出现那样的结果。

2、也有可能在超净工作台进行涂布操作时,没有严格做

到无菌,培养基被污染。

3、而备份成功的缘由是3-4天时,酵母菌生长旺盛,抑

制了其他杂菌的生长,使得生长出来的菌落,很纯净。

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(四)第三次培养观察:(6-7天)

准备工作:PDA培养基的制备,麦芽汁培养基的制备,培

养皿的灭菌。

将备份培养基中长出的酵母菌,进行涂布接种,在10-

4、10-5、10-6三个稀释度,每组做四个培养基(两个PDA,

两个麦芽汁),做好后放入28度恒温的培养箱内进行培养。

观察:两天后取出观察,PDA培养基上菌落长势良好,

10-4的两个培养基上菌落数过多,无法计数,而10-5、10-6

的培养基上,菌落分布均匀,可以计数。

可能是由于涂布不均匀的问题,麦芽汁培养基上菌落,太

过集中,没有PDA上生长的好。

由于时间的有限,我们将此组培养基的菌种接种到对照的

葡萄酒中。由于7天左右已经是酒精发酵的后期,我们发现在

空白的葡萄酒中,已经几乎看不到气泡,而在对照的试验中,

我们发现还有很多的泡沫,而且酒精味更浓。

(五)第二次发酵

8-9天后,过滤进行第二次发酵,发现葡萄果肉大部分已

变为酒,发酵基本完成,过滤出的葡萄酒,颜色呈暗紫色,而

且很浑浊。葡萄酒放入到第二次发酵罐中进行二次发酵。二次

发酵过程中,葡萄酒中会有一些很细腻的小泡冒出,葡萄酒在

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慢慢变得澄清。由于发酵过程控制的好,葡萄酒没有发生酸

败,而是酒精度很高,味道很冲。

六、实验建议:

1、酵母菌的纯化需要一定的时间,要充分估计自己的时

间。

2、将纯化后的酵母菌接种进行发酵,需要培养获得一定

的数量,即种子的制备,建议将分离的酵母菌用麦芽汁培养基

进行培养,需要一定的体积,按照5%的接种量进行培养种

子,以利于加快发酵速度。

3、制备葡萄酒是否有足够的时间,请考虑。按照设计

量,不进行也可以。4、若没有葡萄,可用提子代替。

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葡萄酒制作实训报告

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标签:发酵   葡萄   葡萄酒   酵母菌   观察   进行   培养基   计数
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