2024年3月20日发(作者:小时候的味道)
葡萄酒制作实训报告
葡萄酒制作实训报告
《葡萄酒的制作》
实验报告
一、材料:
葡萄(3斤挑选紫红色大个新鲜葡萄,颜色越深越好,注
意葡萄上的白色菌尘要完好)
白砂糖(8两白砂糖要细而散不能有融化粘滞现象)
二、用物器皿:
大矿泉水瓶(1个)、小矿泉水瓶(1个)、细纱布(1
块)、保鲜膜、大水杯(1个)
三、制作过程:
1、将大矿泉水瓶洗净放在太阳下晒干备用。
2、将买来的葡萄放在水龙头下冲洗干净,注意不要用手
碰触葡萄,以免弄掉葡萄表面菌尘。
3、将洗净得大串葡萄剪成小串,放到阴凉通风处待干
(表皮不能有一点水分)。
4、将已干得葡萄捏碎,将皮、肉、籽都放入备用大矿泉
水瓶中(葡萄不得过瓶2/3)
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5、将保鲜膜覆于瓶口,旋上瓶盖(瓶盖不能过紧)6、将
其静置于阴凉通风处两周,每天清晨观察一次。
7、用纱布将葡萄酒过滤于大水杯中,再倒入小矿泉水瓶
中密封。
四、观察内容:
第一天:葡萄上面有泡泡冒出,颜色还未变,糖部分融
化;
第二天:泡泡增多,瓶底颜色稍变红,糖部分融化;第三
天:水分增多,葡萄上面有白色物,颜色变深的宽度较大,糖
大部分融化;第四天:颜色继续加深;
第五天:颜色呈酒红色,基本覆盖全部葡萄,糖基本融化
完;第六天:靠近已有闻已有酒味;第七~十四天:基本不变
一个月后:不冒泡泡,颜色呈紫红色,滤出五、结果:
葡萄酒呈紫红色、澄清,旋开小矿泉水瓶口有酒香味溢出
略有一点甜味,入口有浓郁酒香略带涩甜味道。
六、体会感受:
这是一次考验耐心的体验,等待水瓶晒干、等待葡萄晾
干、等待酿制成酒,每天都欣喜的观察它的变化。第一次酿制
葡萄酒,当成酒时,那种激动和欣喜是不言而喻的。
一次亲手制作,学会的不仅是它的制作方法,它让我对酒
有了更大的兴趣和更深入的了解,我国酒文化始于夏朝,从古
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到今人们一点点的发现它对于治病和养生的重大意义。中医饮
食调护中有多种药酒的制作方法,更大可能的发挥了酒和药的
功能。
灿烂的酒文化等待着新一代人去学习传承和发展!
葡萄酒制作实验报告
学院:护理学院
班级:201*级护理丙班
学号:3100601219
姓名:张蓓蓓
扩展阅读:葡萄酒的酿造实验报告
葡萄酒的酿造及其中酵母菌对发酵过程的影响
实验设计方案
一、前言:
葡萄酒是用新鲜的葡萄或葡萄汁经发酵酿成的酒精饮料。
通常分红葡萄酒和白葡萄酒两种。前者是红葡萄带皮浸渍发酵
而成;后者是葡萄汁发酵而成的。我们所要酿造的是红葡萄
酒。
葡萄酒有增进食欲,滋补作用的作用。葡萄酒中含有糖、
氨基酸、维生素、矿物质。这些都是人体必不可少的营养素。
它可以不经过预先消化,直接被人体吸收。非凡是对体弱者,
经常饮用适量葡萄酒,对恢复-健康有利。同时还有助于消
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化,葡萄酒能刺激胃酸分泌胃液,每60-100克葡萄酒能使胃
液分泌增加120毫升。
自酿的葡萄酒,不用添加发酵剂,也不添加任何防腐剂和
澄清剂。家酿的葡萄酒利用葡萄皮上的野生酵母菌分解葡萄中
的糖份转化为酒精,另加点糖提高酒精度。一般保质期不超过
两年,所以成酒后应在两年内喝光。
二、实验目的:
1、熟悉酿造葡萄酒的过程和原理。2、学会葡萄酒中酵母
菌的分离纯化。3、熟悉酵母菌形态观察和菌落计数法
4、对比来说明,酵母菌对葡萄酒发酵的影响,杀菌剂
(SO2)对发酵过程的影响。
三、材料和仪器:
(一)材料:葡萄3斤(因葡萄还未上市,可用提子代
替,苏果超市有,但比较贵)。
白糖半斤
(二)仪器:1、主发酵器:玻璃罐(坛、瓶)、陶瓷
坛、能耐受酒精又对人无害的塑料瓶罐等均可。
2、二次发酵容器及装酒的容器:可以用空酒瓶、饮料
瓶、矿泉水瓶等都可3、一根细塑料管。用来在发酵完成后利
用虹吸法将葡萄酒从发酵容器中倒出。
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4、木棒或筷子。用来在发酵过程中搅拌葡萄皮和葡萄
汁。5、丝袜或细纱布。用来过滤葡萄酒汁。
四、实验步骤:
(一)葡萄酒的酿造
1、清洗:将主发酵器(即玻璃坛等)充分洗干净,控
干。
2、浸泡:将葡萄摘除蒂,把剪好的葡萄冲洗干净后用淡
盐水浸泡十分钟左右,这是为了去掉葡萄皮上的农药和其他有
害物质,再次冲洗,晾干至表面没有水珠。
3、装瓶:将葡萄捏破,葡萄肉连同葡萄皮挤到主发酵器
中。当把葡萄装到发酵器容量的70%左右时,停止装葡萄,盖
上盖子,但不要完全拧紧。
1
4、发酵:将装好葡萄的发酵器放在28℃恒温培养箱内。
葡萄装入发酵器后,大约会在12个小时以内启动发酵,表现
为葡萄汁中有较多气泡产生。在发酵启动后,每天两次用木棒
或筷子将葡萄皮压入酒液中,然后盖上盖子。
5、加糖:发酵启动后一到两天内,放入250g白糖,作用
是提高酒精度。发酵启动后三到四天时,再次放入白糖
250g,将糖浸入葡萄汁中搅拌均匀。
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6、二次发酵:当酒精发酵完成后,首先利用虹吸法,将
葡萄酒汁倒入二次发酵器,然后将剩下的葡萄皮、籽、糟等用
丝袜或细纱布过滤,过滤后的酒液也混入二次发酵器中。葡萄
皮、籽、糟扔掉。注意二次发酵器留有1/10空隙,盖子也不
要拧的很紧。放在阴凉处。二次发酵主要是苹果酸-乳酸发
酵,不再产生酒精。
7、加入澄清剂,加入少量酒精。二次发酵完成,即得到
葡萄酒原酒。8、口味:自酿出的葡萄酒是酸的,还有一些的刺
激性味。附:葡萄酒的质量检测
葡萄酒的质量指标是现行国家标准GB/T15037-94中规定
的检验指标;色泽:紫红、深红、宝石红、红微带棕色
澄清程度:澄清透明、有光泽、无明显悬浮物(使用软木
塞封口的酒允许有3个以下不大于1mm的软木渣)。葡萄酒应
是澄清的,若酵母菌生长,则会出现浑浊,所以要检测出我们
自酿的葡萄酒中酵母菌的含量是否合格。
香气:具有纯正、优雅、怡悦、和谐的果香甜味:具有纯
净、幽雅、爽怡的口味和新鲜
(二)酵母菌的分离纯化
1、制备葡萄酒稀释液
取发酵2-3天时的葡萄酒液,称量1g于盛有99mL无菌水
的三角瓶中,充分振荡,此即为10-2浓度的菌悬液。用无菌
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移液管吸取悬液0.5mL于4.5mL无菌水试管中,用移液管吹吸
三次,摇匀,此即为10-3浓度。同样方法,依次稀释到10-
7。稀释过程需在无菌室或无菌操作条件下进行。(稀释倍数
是根据微生物的数量进行选择,不固定。可以直接涂布、或划
线法分离纯化。)
2、涂布法分离(酵母菌定量分离用)
依前法向无菌培养皿中倾倒已融化并冷却至45~50℃的
马铃薯葡萄糖培养基,待平板冷凝后,用无菌移液管分别吸取
三个不同稀释度(10-4,10-5,10-6)菌悬液0.1mL-0.2,依次
滴加于相应编号已制备好的马铃薯葡萄糖培养基平板上,右手
持无菌玻璃涂棒,左手拿培养皿,并用拇指将皿盖打开一缝,
在火焰旁右手持玻璃涂棒于培养皿平板表面将菌液自平板中央
均匀向四周涂布扩散,切忌用力过猛将菌液直接推向平板边缘
或将培养基划破。
3培养观察接种后的所有平板倒置与适宜温度培养箱中培
养。大约28-30度,时间两到三天。将葡萄分为两组发酵,一
组为空白对照,另一组加入提取出的酵母菌,观察其在发酵过
程中酵母菌的生长对葡萄酒发酵时间的影响。
4、酵母菌形态观察
2
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将每个发酵阶段的葡萄汁用显微镜观察其中酵母菌的菌体
特征
(三)酵母菌的检测
利用血球计数法测定
材料与仪器:
葡萄酒汁,血球计数板,显微镜,盖玻片,无菌毛细管。
操作步骤:
1、镜检计数室
在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则
需清洗后才能进行计数。2、加样品
将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的细口滴
管将稀释的葡萄酒汁由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多),让
菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室,一般计数室均能
充满菌液。注意不可有气泡产生。
3.显微镜计数
静止5分钟后,将血球计数板置于显微镜载物台上,先用
低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。在计
数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。一
般样品稀释度要求每小格内约有510个菌体为宜。每个计数室
选5个中格(可选4个角和中央的中格)中的菌体进行计数。
位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。如遇酵母出
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芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作两个菌体计数。计数
一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。
4.清洗血球计数板
使用完毕后,将血球计数板在水笼头上用水柱冲洗,切勿
用硬物洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每
小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复
洗涤至干净为止。实验结果:次数各中格中细胞数112345注
意事项:
1、各类容器一定要洗干净,葡萄在酿制过程中不能碰到
油污、铁器、铜器、锡器等,但可以接触干净的不绣钢制品。
2、在发酵时,发酵器的盖子一定不要盖死,防止爆炸。
3、糖不要多放,那样会影响发酵过程,产生我们不希望
的成分,如果想喝甜葡萄酒,可以在发酵完成后饮用时加糖。
2345平均菌液浓度/(个/ml)3
五、具体操作过程和实验现象及分析
(一)第一次发酵:
葡萄的清洗,捏碎,装罐,加盖(稍微透氧)做成两个瓶
葡萄酒,一瓶对照(加入分离纯化后的酵母菌),一瓶空白。
将两个发酵罐放在28恒温培养箱中发酵。注意不要太用力搓
洗葡萄,以防把葡萄皮上的野生酵母菌洗掉。
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每天都到实验室里,将浮在上面的葡萄按下去,以便皮上
的酵母菌得到充分的利用。加糖:第一次加糖发酵两天后,第
二次发酵五天后。每次每瓶加75克糖。
(二)第一次培养和观察:(1-3天)
实验准备:制备PDA培养基,灭菌,低温保存;培养皿灭
菌,制备无菌水并保存。
1、据实验方案,12小时后酒精发酵启动,所以1天后,
我们提取了适量葡萄汁,进行酵母菌的分离培养。取0.5ml的
葡萄汁,梯度稀释成10-1,10-2……10-6,采用平板涂布的
方法,进行第一次培养。取10-4,10-510-6的三个梯度的稀释
菌液进行涂布接种,每个梯度三个培养皿。涂布完成后,放入
28℃恒温培养箱倒置培养,一到两天。
2、葡萄汁的制片观察:
取适量葡萄汁和无菌水混合,再附上载玻片,置于十倍镜
下观察
现象:由于葡萄汁成分非常多,所以镜头里背景很模糊,
而且,只能观察到很少的类似于酵母菌的单个细胞,放置于
40倍镜下,观察也不是很清楚,其他大多是杂菌和杂物在乱
跑。(分析,发酵未真正启动,葡萄皮上的酵母菌,还未在葡
萄汁中大量繁殖,所以是视野里的现象模糊,酵母菌很少)
3、葡萄酒的观察现象
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从之前强烈的果香味转变为有淡淡的酒香味,而且3-4天
时,发酵罐中有大量的气泡,葡萄皮颜色变暗,葡萄汁增多,
且颜色更深。
葡萄酒中的酵母菌的观察,此时,由于,酵母菌的大量繁
殖,在显微镜的视野里已经能,观察到很清晰的酵母菌个体,
而且数量较多,图像背景亮了很多,(可能是酵母菌的生长抑
制了其他杂菌的生长,是的葡萄之中的杂质变得很少了。)
4、三天后,去取培养好的九个培养基,观察其中菌落的
生长情况
现象:实验结果似乎没有那么理想,培养基中的菌落,可
谓五彩缤纷,有白色的菌落,有黄色的粉状的菌落,有绿色的
干燥的菌落,最多的就是黑色霉菌的菌落,散发出来的味道更
偏于霉菌的味道,而且,大多的菌落干燥,且成绒毛丝状。
显微镜观察:尽量挑取一些,纯净的白色菌落的菌种,和
无菌水混合置于显微镜下观察,发现,菌种不纯,有一些清晰
可见的酵母菌细胞,但也参杂着一些霉菌的特征结构。
结果处理方案:挑取一些疑似的白色菌种,进行涂布培
养,方法同上,培养1-2天。
同时,也要再做一个备份,万一,白色的菌落不是酵母
菌,所以,再取此时的葡萄汁,再做六个培养基,进行培养,
原理同上。
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(三)第二次培养观察:(4-5天)
葡萄酒里发酵现象的观察:葡萄酒里产生了浓郁的酒精味
到,而且葡萄酒里有很多泡沫。
4
疑似菌落的观察:观察上次疑似菌种培养基的培养结果,
发现效果还是不佳,虽然有很少的的黑色霉
菌生长,但是通过显微镜观察,发现,它应该是霉菌的一
种,而不是酵母菌
备份培养基的观察:有意外的收获,发现,备份的六个培
养基,酵母菌生长的都很好,有很多的乳白色的圆形斑点,湿
润且光滑,闻起来有酒香味,且没有其他的杂菌,很符合,酵
母菌的菌落培养特征。且通过显微镜的观察,观察到了很清晰
的酵母菌细胞。
对比分析:第一次培养的失败的原因:
1、可能是刚一开始,葡萄汁中的酵母菌很少,而稀释的
倍数太大,导致涂布培养时,其他杂菌的数量优势甚于酵母
菌,所以才会出现那样的结果。
2、也有可能在超净工作台进行涂布操作时,没有严格做
到无菌,培养基被污染。
3、而备份成功的缘由是3-4天时,酵母菌生长旺盛,抑
制了其他杂菌的生长,使得生长出来的菌落,很纯净。
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(四)第三次培养观察:(6-7天)
准备工作:PDA培养基的制备,麦芽汁培养基的制备,培
养皿的灭菌。
将备份培养基中长出的酵母菌,进行涂布接种,在10-
4、10-5、10-6三个稀释度,每组做四个培养基(两个PDA,
两个麦芽汁),做好后放入28度恒温的培养箱内进行培养。
观察:两天后取出观察,PDA培养基上菌落长势良好,
10-4的两个培养基上菌落数过多,无法计数,而10-5、10-6
的培养基上,菌落分布均匀,可以计数。
可能是由于涂布不均匀的问题,麦芽汁培养基上菌落,太
过集中,没有PDA上生长的好。
由于时间的有限,我们将此组培养基的菌种接种到对照的
葡萄酒中。由于7天左右已经是酒精发酵的后期,我们发现在
空白的葡萄酒中,已经几乎看不到气泡,而在对照的试验中,
我们发现还有很多的泡沫,而且酒精味更浓。
(五)第二次发酵
8-9天后,过滤进行第二次发酵,发现葡萄果肉大部分已
变为酒,发酵基本完成,过滤出的葡萄酒,颜色呈暗紫色,而
且很浑浊。葡萄酒放入到第二次发酵罐中进行二次发酵。二次
发酵过程中,葡萄酒中会有一些很细腻的小泡冒出,葡萄酒在
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慢慢变得澄清。由于发酵过程控制的好,葡萄酒没有发生酸
败,而是酒精度很高,味道很冲。
六、实验建议:
1、酵母菌的纯化需要一定的时间,要充分估计自己的时
间。
2、将纯化后的酵母菌接种进行发酵,需要培养获得一定
的数量,即种子的制备,建议将分离的酵母菌用麦芽汁培养基
进行培养,需要一定的体积,按照5%的接种量进行培养种
子,以利于加快发酵速度。
3、制备葡萄酒是否有足够的时间,请考虑。按照设计
量,不进行也可以。4、若没有葡萄,可用提子代替。
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