2024年3月15日发(作者:乡土中国读后感)
硫酸铵盐析法沉淀蛋白质
硫酸铵盐析法是一种常用的蛋白质分离和富集方法。下面是关
于这种方法的相关参考内容。
硫酸铵盐析法是一种重要的蛋白质分离和纯化方法,可以根据
蛋白质在不同硫酸铵饱和度下的溶解度差异来实现目标蛋白质
的分离和富集。该方法不仅简单易行,而且能够得到相对纯度
较高的蛋白质制备样品。硫酸铵盐析法在生物化学、分子生物
学和生物制药等领域得到了广泛应用。
硫酸铵盐析法的步骤主要包括以下几个方面:
1. 配制硫酸铵溶液:精确称量所需分析纯硫酸铵,加入适量的
去离子水,搅拌溶解,制备成不同浓度的硫酸铵溶液,通常可
以利用浓度梯度来进行控制。
2. 样品溶解:将目标蛋白质样品用适量的缓冲液溶解,以达到
适宜的溶解浓度。
3. 硫酸铵盐析:将步骤2中的蛋白质样品滴加至已配制好的硫
酸铵溶液中,滴加时需充分混匀,待溶液静置后观察,并进行
适当的调整,使得蛋白质快速沉淀。常见的硫酸铵饱和度为
20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%和90%。
4. 沉淀收集:将形成的蛋白质沉淀用离心机进行离心分离,收
集上清液和沉淀,并用冷盐溶液或冷酸淋洗沉淀,以去除残存
的盐类和杂质。
5. 蛋白质重悬:将沉淀用适量的缓冲液重悬,使其再溶解。
6. 蛋白质纯化:可以根据需要选择适当的纯化方法对蛋白质进
行进一步纯化,如色谱层析、电泳分离等。
除了硫酸铵盐析法,还有一些其他常见的蛋白质分离和富集方
法,包括酒精沉淀法、酸沉淀法、离子交换层析和亲和层析等。
这些方法在不同的研究领域和实验目的下都有其适用性和局限
性。
综上所述,硫酸铵盐析法是一种简单易行、高效可靠的蛋白质
分离和富集方法。通过控制不同硫酸铵饱和度下的溶解度差异,
可以实现目标蛋白质的纯化和富集。这种方法在生物化学、分
子生物学和生物制药等领域得到了广泛应用,为蛋白质研究提
供了重要的技术支持。
参考文献:
1. Bommarius AS, Blum JK, Abrahamson MJ, et al. "Effects of
ammonium sulfate on the heat activation of Bacillus caldovelox
glutamate dehydrogena." Biochimica et Biophysica Acta (BBA)
- Protein Structure and Molecular Enzymology. 1990, 1039(1): 45-
50.
2. Hu Z, Hong P, Domigan L, et al. "Optimization of condition for
the isolation of canola proteins by ammonium sulfate
precipitation." J. Food Process. Prerv. 1997, 21(4): 335-348.
3. Laemmli UK. "Cleavage of structural proteins during the
asmbly of the head of bacteriophage T4." Nature. 1970,
227(5259): 680-685.
4. Pierce Biochemicals. Protein Precipitation with Ammonium
Sulfate, Technical Bulletin. Pierce Biochemicals, 2020.
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