硫酸铵盐析法沉淀蛋白质

2024年3月15日发(作者：中华二十四孝)

硫酸铵盐析法沉淀蛋白质

硫酸铵盐析法是一种分离纯化蛋白质的常用方法，它是利用硫酸铵

的沉淀能力将蛋白质从溶液中分离出来。本文将详细介绍硫酸铵盐

析法的原理、步骤和注意事项。

一、硫酸铵盐析法的原理

硫酸铵是一种常用的沉淀剂，它在水中溶解度随温度的升高而增加。

利用这个特性，可以通过逐渐加入硫酸铵，使蛋白质逐渐从水溶液

转移到硫酸铵溶液中，最终沉淀出来。硫酸铵盐析法的原理是蛋白

质和硫酸铵形成复合物，使溶液中蛋白质的溶解度降低，从而沉淀

出来。

二、硫酸铵盐析法的步骤

1.制备蛋白质溶液：将需要分离纯化的蛋白质加入缓冲液中，使其

溶解。

2.加入硫酸铵：逐渐加入一定比例的硫酸铵至蛋白质溶液中，搅拌

均匀。

3.离心：将混合液离心，使蛋白质沉淀。

4.洗涤：用冷硫酸铵水洗涤沉淀，去除杂质。

5.再溶解：用适量的缓冲液再次溶解沉淀的蛋白质。

三、硫酸铵盐析法的注意事项

1.硫酸铵的加入应逐渐进行，以免过饱和而导致蛋白质不完全沉淀。

2.离心速度和时间应根据所用离心机的不同而确定。

3.洗涤次数应足够多，以免残留的硫酸铵对蛋白质产生影响。

4.蛋白质的再溶解要充分，以保证蛋白质的活性和稳定性。

5.硫酸铵盐析法不能用于分离具有相似结构的蛋白质，因为它们的

沉淀能力相似。

四、总结

硫酸铵盐析法是一种简单有效的蛋白质分离方法，适用于大多数蛋

白质的纯化。它的优点是操作简单，成本低廉，同时可以同时去除

杂质和离子。但是，硫酸铵盐析法也有其局限性，比如不能分离具

有相似结构的蛋白质。因此，在选择分离方法时，应根据实验要求

和蛋白质的特性来确定最适合的方法。