环脂肽的研究进展

2024年3月12日发(作者：数学周记怎么写)

专论与综述　中　国　酿造　２０１６年第３５卷第１２期　

总第２９８期　●　。　●　

环脂肽的研究进展　

黎循航　，张言周，，魏志文ｔ，管政兵　，蔡宇杰　，廖祥儒　

（１．江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡２１４１２２；２．江西农业大学生物科学与工程学院，江西南昌３３００４５；　

３．盐城师范学院，江苏盐城２２４０５１）　

摘要：脂肽主要通过微生物的非核糖体合成酶途径合成。由于其具有广谱抗菌活性、生物表面活性剂活性、低毒、可生物降解等多种　

佣废弃物生产日Ｉ觇　亨面综述其研究进展。　

生物学功能而引起人们广泛的关注。环脂肽是由非极性的脂　ｉ酸链结合极性的氨基酸肽链部分陶Ｊ茂，其中，氨基酸肽链自身成环或与部分　

脂肪酸链结合成环。从环脂肽的结构、生物合成机制、合成调控、发酵方式、产量抛　翱　

关键词：环脂肽；非核糖体合成酶；生物合成机制；合成调控；废弃物　

中图分类号：Ｑ一１　文章编号：０２５４—５０７１（２０１６）１２—０００５—０７　ｄｏｉ：１０．１１８８２／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５４—５０７１．２０１６．１２．００２　

Ｒｅｃｅｎｔ　ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　ｃｙｃｌｉｃ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　

ＬＩ　Ｘｕｎｈａｎｇ　，ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎｚｈｏｕ。，ＷＥＩ　Ｚｈｉｗｅｎ　，ＧＵＡＮ　Ｚｈｅｎｇｂｉｎｇ　，ＣＡＩ　Ｙｕｊｉｅ　，ＬＩＡＯ　Ｘｉａｎｇｒｕ　

ｆ１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＭｉｎｉｓＯｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｊｉａｎｇｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ２１４１２２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ　

Ｅｎｇｉｎｅｅｎｎｇ，ＪｉａｎｇｘｉＡｇｒＤｕｌｔｕｒｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４５，Ｃｈｉｎａ；３．Ｙａｎｃｈｅｎｇ　Ｔｅａｃｈｅｒｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉ￣Ｙａｎｃｈｅｎｇ２２４０５１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　ａｒｅ　ｐｒｉｍａｒｉｌｙ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ　ｂｙ　ｎｏｎｆｉｂｏｓｏｍａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｎｔｙｈｅｔａｓｅｓ　ＯｑＲＰＳｓ）ｏｆ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ．Ｄｉｖｅｒｓｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｓｕｃｈ　

ａｓ　ｂｒｏａｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｎｔｉａｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｂｉｏｓｕｒｆａｃｔａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｌｏｗ　ｔｏｘｉｃｉｙ　ｔａｎｄ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　ａｔｔｒａｃｔｅｄ　ｍａｎｙ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ’ａｔｔｅｎｔｉｏｎ．　

Ｃｙｃｌｉｃ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　ａｒｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄ　ｗｉｈ　ｎｏｎ－ｐｏｌｔｒ　ｆａａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｃｈａｉｎ　ｃｏｖａｌｅｎｔ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｐｏｌａｒ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｃｈａｉｎ，ｗｈｅｒｅｂｙ，ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｐｅｐｔｉｄｅ　

ｃｈａｉｎ　ｃｏｖａｌｅｎｔ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｃｙｃｌｉｃ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｃｈａｉｎ　ｏｒ　ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅ　ｉｎ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｂｉｏｓｙｎ－　

ｔｈｅｔｉｃ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ，ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｐａｔｔｅｍ，ｙｉｅｌｄ　ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｓｔｒａｔｅｇｙ　ａｎｄ　ｗａｓｔｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅ－　

ｖｉｅｗｅｄ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｃｙｃｌｉｃ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ；ｎｏｎｒｉｂｏｓｏｍａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅｓ；ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ；ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｅｇｒｕｌａｔｉｏｎ；ｗａｓｔｅ　

细菌和真菌感染是造成农作物和采收后水果蔬菜腐　

败损失的主要因素。尤其在过去的几十年里随着农产品　

产量的增加，病虫害导致的经济损失越来越严重。为应对　

越演越烈的病害，人们对农药的需求愈加强烈。但是，大　

量农药的使用不仅导致农作物根际土壤微生物生态系统　

的平衡被破坏及植物病原菌的抗药性的产生，而且使病　

虫害的抗药性增加，并对环境造成严重危害。因此，研发　

更为绿色环保的防治方法来替代单一化学农药备受　

关注。　

制、合成调控、发酵方式、产量优化策略及利用废弃物生产　

脂肽等方面的研究进展进行了总结。　

１环脂肽结构　

依据肽链的拓扑结构的不同，微生物所产生脂肽可以　

分为环状脂肽和线状脂肽。环状脂肽包括多粘菌素（ｐｏｌｙ－　

ｍｙｘｉｎ）、达托霉素（ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ）隶面活『生素（ｓｕｒｆａｃｔｉｎ）、伊枯　

草菌素（ｉｍｆｉｎ）、芬荠素（ｆｅｎｇｙｃｉｎ）、ｐａｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｎ和ｐｓｅｕ—ｄｏ－　

ｆａｃｔｉｎ等。　

１．１　Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　

此外，随着抗生素的发现及广泛应用，病原微生物对　

常用抗生素产生耐药性增强的现象普遍出现，如越来越　

多的多重耐药病原细菌的出现给人类健康带来巨大的威　

胁。研究发现从微生物中寻找新的抗菌物质是有效缓解　

病原菌耐药性产生的解决方案之一。　

脂肽是细菌产生的具有多种生物活性物质。其中环　

脂肽在抑制植物病原菌和多重耐药病原细菌方面均展现　

独特的能力。本文对近年来环脂肽的结构、生物合成机　

收稿日期：２０１６．０９—１７　

一

Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ是由类芽孢杆菌（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐｐ．）产生的　

类阳性环状十元脂肽，见图１（１）。其中肽链部分ｃ末端　

的７个氨基酸构成环状，另Ｐｂ３个氨基酸呈链状与脂肪酸侧　

链连接【１】。Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ发现于２０世纪４Ｏ年代后期，起初用于　

治疗革兰氏阴性细菌感染，但临床应用发现其对人体具　

有显著的肾毒性和神经毒素危害而被限制使用。近年来，　

随着临床多重耐药病原菌的出现，ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ再次成为可　

用于治疗此类革兰氏阴性病原菌的备选抗生素。其中　

基金项目：无锡农业科技支撑项目（ＣＬＥ０１Ｎ１３１０）；江苏省产学研前瞻项目（ＢＹ２０１４０２３．２８）；江西省青年科学基金（２０１２２ＢＡＢ２１４０２７）。　

作者简介：黎循航（１９７８．），男，讲师，博士，主要从事微生物次级代谢产物研究工作。　

＋通讯作者：廖祥儒（１９６４一），男，教授，博士，主要从事生物化学与分子生物学研究工作。　

６．２。’　№　２　

‘　‘　Ｓ　Ｉｅｒｉａ　Ｏ　Ｎ　２９８　

．

．　

Ｇｈｉｎａ　Ｂｒｅｗｉ

ｎａ　

ｔ￣ｒｅｗｔｎｇ　

Ｆｏｒｕｍ　ａｎｄ　Ｓｕｍｍａｒｙ　

ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｂ和ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｅ由于抗病原菌效果较强和毒副　

病［３］。Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ在钙离子存在的情况下，与细菌细胞质膜　

中的阴性的磷脂酰甘油发生交互作用，破坏细胞膜的完　

整性，起到抗菌作用。　

１．３　Ｐａｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｎ　

作用相对较低而得以临床应用。但有临床报道表明　

ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｂ能够引起患者体内组胺释放导致机体血管舒　

张和血压降低［２】。　

ｎ、Ｒ——Ｌ－Ｄａｂｌ——Ｌ・ＴｂＪ２——Ｄ－Ｄａｂ３——Ｌ・Ｄａｂ４——Ｌ－Ｄａｂ５——Ｄ・ＬｃＬ￣６——Ｌ－Ｔｈｒ７——Ｌ－Ｄａｂ８——Ｌ－Ｄａｂ９——Ｌ－Ｔｌｒｌ０　

Ｐａｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｎ是由溶硫胺类芽孢杆菌（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　

ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）ＯＳＹ．ＳＥ产生带正电荷的环状脂肽，由１３　

ｐｏｌ３ａｎｙｘｍ　Ａ　

ｐｏ１）ａｕ３ｘｉｎ　Ｂ　Ｌ－Ｄａｂ３；Ｄ－Ｐｈｅ６；Ｌ－Ｌ　Ｉｌ７　

个氨基酸和ｃ１５脂肪酸酰基侧链构成，见图ｌ（３）。Ｐａｅｎｉ．　

ｂａｃｔｅｒｉｎ对包括单增李斯特菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ　ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、　

Ｌ－ｅｒｒｓ．Ｌ・　ｐ７…ＤＡｌａｓ　Ｌ－　ｐ９　Ｌ－ＧｌｙＬ０　

ｐｏｌ３ａｕ３＂ｇａａ　Ｅ：Ｌ－Ｄａｂ３：Ｄ－Ｌｅｕ６；Ｌ－Ｌｅａ１７　

Ｒ　７，ｊ６－　基辛酸或仲辛酸　

２）Ｒ　Ｌ－Ｔｒｐｌ…ＤＡｓａ２　Ｌ－脚３　Ｌ－Ｔｈｒ４…ＬＧｌｙ５　

ＭＲＳＡ、大肠杆菌（Ｅｓ　ｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｈ３　Ｏ１５７：Ｈ７、伤寒沙门氏　

ｄｏｐｔｏｌｌｌｙｅｍ　Ｌ———————————————————一　ＫＤＩ１３　３ｌｎ－（Ｙｌｕｌ２一Ｄ—ｓ　ｌ１　

Ｒ　ｙ　甓酰　

（３）Ｒ　Ｏｍ１　Ｖａｌ２　

Ｒ　ｙ　受酰　

４、Ｒ　Ｌ－Ｇｂｔ　Ｉ．－Ｓｅｒ２　Ｌ－Ｔｈｒ３　Ｌ－Ｌｅｕ４　Ｌ　

ｐｓｅｍｌｏｆｎｅｍ　Ｉ　ｌ——————————————————　

懈ｅｎｄｏ　ｃｌｎ【ｊ　Ｌ　Ｌｅｔｓ　

Ｒ　棕榈酸侧磷　

ＣＨ，　

５）ＣＨ　－ＣＨ。（ＣＨ２）　－ＣＩ４。ＣＨ２－ＣＯ　Ｌ－Ｇ１ｕＩ　

ｓｘｎｆａｏｔｉｎ　Ｉ、：Ｉ卜７　Ｌ—Ｌ．Ｌｅｕ７　Ｄ．ＬＡ　

ｓｔｔｒｆａ￣ｔｉｎ　Ｂ　ｎ＝８　

￣ｔｒｆａｏｔｆｉｌ　Ｃ。ｎ＝９　

ｓｘｔｒｆａｅｔ／，１　Ｄ　ｎ＝ｌ０　

６）ｃＨ　’（ｃＨ２）

。　

ｎ

０Ｉ２　。∞　Ｌ一　１　。。ｌｒ、Ｔ２　。’Ａ蜘。　Ｌ。Ｇｌ　’４　

ＮＨ　Ｉ　一Ｓ　７　Ｄ’Ａ，￣１６　Ｌ．Ｐｒｏ５　

１ｔｍｌＩｌＡ　

ｂａ￣ｉｌｌｏｍｙｏｉｎ　Ｌ　Ｌ－Ａｓｐｌ　Ｌ－ｓｅ—Ｌ－Ｇｌｕ５　Ｄ・ｓ　６　Ｌ－１１Ⅱ７　

ｂａｅｉｌｌｏｍｙｏｉｎ　Ｄ．Ｌ一：ｋ￣ｌｌ、１．－Ｐｒｏ４，Ｌ－Ｇｈｔ５．１）・Ｓｅｔ６．Ｌ－Ｔｈｒ７　

ｂａｅｉｌｌｏｎｎｏｉｎ　Ｆ　Ｌ－Ａ　１、Ｉ　－Ｇｉｎ４．Ｉ．－Ｐｎ＾Ｄ－　ｎ６　Ｌ・１１１｜７　

ｍｙｏｏｓｕｂｔｉｌｉｎ：Ｌ－　１、Ｌ￣ｌｎ４　Ｌ－ＰｒｏＳ　Ｄ・Ｓｅｔ６　Ｉ．－ＡＳｈ７　

ｌＰｌ０－１３　

（ＪＨ　

ＣＨ　－（ＣＨ　２）．ａＪＩＩ－ＣＰＩ　２＂ＣＯ　Ｌ－Ｇｌｕｌ　Ｄ。（　２　、ｌＴ３　Ｄ’Ｔｈｒ４　Ｌ－Ｇｌｕ５　

９　

ｍ　Ａ　　Ｉ一ｌｉｅｌ０　Ｉ　－Ｉ、忡　Ｌ－（Ｈｌｌ８　

ｔ￣ｎｇｙｃｉｎ　Ｂ　Ｄ－Ｖａｌ６　

ｎｌ２．Ｉ，　

图１不同脂肽结构　

Ｆｉｇ．１　Ｐｒｉｍａｒｙ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　

１．２　Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ　

Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ是由玫瑰孢链霉菌解淀粉芽孢杆菌　

（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｏｓｐｏｒｕｓ）产生的一种酸性环脂肽，见　

图１（２）。由１３个氨基酸组成，其中在Ｋｙｎｌ３的羧基和Ｔｈｒ４　

的羟基间形成酯键，构成包含ｌ０个氨基酸的大环内酯链，　

环Ｐｂ３个氨基酸残基连接Ｃ　。～ｃ。　脂肪酸酰基链。Ｄａｐｔｏ．　

ｍｙｃｉｎ对包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ—ｒｅ．　

ｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｌ＇ｅｕｓ，ＭＲＳＡ）、耐万古霉素肠球菌　

（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ．ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ，ＶＲＥ）和耐青霉素肺炎　

链球菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，ＰＲＳＰ）　

在内的革兰氏阳性多重耐药菌具有很好的防治效果。　

２００３年最先被美国食品药品监督管理局（ｆｏｏｄ　ａｎｄ　ｄｒｕｇ　

ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ＦＤＡ）批准在美国上市，商品名为Ｃｕｂｉｃｉｎ，　

可用于皮肤感染、心内膜炎、脊髓炎、软组织感染、炭疽　

菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉ）在内的革兰氏阳性和革兰氏阴性细　

菌具有杀菌活性　。体外试验表明，ｐａｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｎ所带正电　

荷能够与大肠杆菌外膜层带负电荷的内毒素结合，破坏　

细胞膜的完整性，造成钾离子从胞内流出［５】。　

１．４　Ｐｓｅｕｄｏｆａｃｔｉｎ　

Ｐｓｅｕｄｏｆａｃｔｉｎ　ＩＩ是由荧光假单孢菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｌｆｕｏ．　

１＇ｅｓｃｅｎｓ）ＢＤ５产生的环状脂肽，由八元肽与棕榈酸构成，　

见图【４）。由于其脂肪酸侧链不带有羟基基团，相比于ｓｕｒ—　

ｆａｃｔｉｎ、ｉｔｕｒｉｎ或ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ，ｐｓｅｕｄｏｆａｃｍ　ＩＩ的抑菌活力微弱，　

但能够有效预防致病微生物在导尿管、植入体和人工血　

管内粘着并抑制病原菌形成生物膜。ＰｓｅｕｄｏｆａｃｍＩＩ具有降　

低表面张力的功能且没有溶血活性，所以其可作为表面　

涂布剂用于医疗器械［６］。此外，其能通过质膜的透化作用　

对人类黑素瘤Ａ３７５具有细胞毒性作用［７１。　

１．５　Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　

Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ是由芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）产生的具有抗生素　

作用的脂肽。由７元肽和ｃ　，～ｃ。　脂肪酸酰基链组成，见　

图１（５）。Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ具有出色降低表面张力的能力，对Ｇ＋￣ＩＩＧ’　

细菌具有拮抗作用，也具有抗病毒、抗支原体和抗肿瘤等　

作用。由于其具有溶血作用，存在水解哺乳动物细胞的风　

险，在医疗上的应用受到限制。携带Ｃ　链疏水性脂肪酸侧　

链的ｓｕｒｆａｃｔｉｎ具有显著的溶血活性嘲。ＧＡＯ　Ｚ等［９】研究发现　

由解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）ＷＨ１产生　

的菌纤维素（ｆｕｎｇｉｎ），属于ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的类型之一，通过免疫　

调节作用对小鼠模型中对１型糖尿病具有改善作用。　

１．６　Ｉｔｕｒｉｎ　

Ｉｔｕｒｉｎ是由枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）产生的环状　

脂肽，具有７元肽部分和长度为Ｃ。，～ｃ。　的　．羟基脂肪酸　

链，见图１（６）。肽链中脂肪酸长度的改变导致ｉｔｕｒｉｎ具有多　

样性，可分为ｉｔｕｒｉｎ　Ａ，ｉｔｕｒｉｎ　Ｃ，ｉｔｕｒｉｎ　Ｄ，ｉｔｕｒｉｎ　Ｅ，ｂａｃｉｌ．　

１ｏｍｙｃｉｎ　ＬｃＳｔｌｍｙｃｏｓｕｂｔｉｌｉｎ。Ｉｔｕｒｉｎ￣够生物防治多种植物病　

原菌，如：Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ　ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ　ｃｕｃｕｒｂｉｔａｅ，Ｐｅｃｔｏｂａｃｔｅｒｉ－　

ｕｍ　ｃａｒｏｔｏｖｏ１７１ｍ　ｓｕｂｓｐ．Ｃａｒｏｔｏｖｏｒｕｍ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ　ｓｏｌａｎｉ，　

Ｆｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ等。　

１．７　Ｆｅｎｇｙｃｉｎ　

Ｆｅｎｇｙｃｉｎ是由Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ或Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ产生的具有抗　

专论与综述　中　国　酿造　

５

２们６　

总第　

３

期　

２

９　８　

期

・

７・　

真菌作用的脂肽，由１０元肽和Ｃ　～ｃ　脂肪酸酰基链构成，　

见图１（７）。其能扰动细胞质膜的脂质双分子层和在局部静　

电驱动重建　，对丝状真菌具有广谱抗菌作用。相对于其　

他脂肽，丰原素（ｆｅｎｇｙｃｉｎ）的溶菌活性较弱，所以在制药领　

域的使用有限。可成为治疗皮肤真菌病（念珠菌病和皮　

模块在肽链延伸过程中负责特异性识别、激活并结合特　

定底物。在ＮＲＰＳｓ合成过程中，ＰＣＰ结构域必须由无活性　

的脱辅酶形式转化为有活性的全酶形式。通过磷酸泛酰　

巯基乙胺基转移酶（ｐｈｏｓｐｈｏｐａｎｔｅｔｈｅｉｎｙｌ　ｔｒａｓｆｅｒａｓｅ，ＰＰＴａｓｅ）　

的催化作用，ＣｏＡ的泛酰巯基乙胺基以磷酸二硫键连接到　

癣）潜在的药品。　

２生物合成机制　

对脂肽合成相关基因分析鉴定表明，脂肽是由一系　

列相关基因簇共同表达调控合成。其中大多数环状脂肽　

是由非核糖体合成酶（ｎｏｎｆｉｂｏｓｏｍａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅｓ，　

ＮＲＰＳｓ）催化合成。所不同的是，ｉｔｕｒｉｎ家族脂肽由ＮＲＰＳｓ与　

聚酮合酶（ｐｏｌｙｋｅｔｉｄｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅｓ，ＰＫＳｓ）形成ＰＫＳ／ＮＲＰＳ杂交　

的生物合成的模板指导合成。　

ＮＲＰＳｓ是由多个功能化模块组成的复合酶体系，且每　

个模块又由多个具有催化功能的结构域组成。根据组成　

模块和结构域的不同，Ｎ】　Ｓｓ能够合成大量结构和功能具　

有显著差异的肽类物质。最基本的ＮＲＰＳｓ由启动模块、核　

心模块和终止模块３部分组成。其中主要的结构域包括腺　

苷酰化（ａｄｅｎｙｌａｔｉｏｎ，Ａ）结构域、缩合（ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ，Ｃ）结　

构域、肽酰基载体蛋白（ｐｅｐｔｉｄｙｌ　ｃａｒｒｉｅｒ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ＰＣＰ）结构　

域和硫酯酶（ｔｈｉｏｅｓｔｅｒａｓｅ，ＴＥ）结构域。除此之外，许多　

ＮＲＰＳ模块中还包含一些其他的结构域，如羟基化（ｈｙ－　

ｄｒｏｘｙｌａｔｉｏｎ，Ｈ）结构域、糖基化（ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ，Ｇ）结构域、　

氨基转移酶（ａｍｉｎｏＷａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＡＭＴ）结构域、甲基化（ｍｅｔｈｙ－　

ｌａｔｉｏｎ，ＭＴ）结构域、氧化酶（ｏｘｉｄａｓｅ，Ｏｘ）结构域、还原酶　

（ｒｅｄｕｃｔａｓｅ，Ｒｅ　构域、甲基转移酶（ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＭＴ）　

结构域、环化（ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ，Ｃｙ）结构域、浓缩／差向异构化　

（ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ／Ｅｐｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ，Ｃ／Ｅ）结构域。　

ＮＲＰＳｓ典型核心模块的排列方式为Ｃ—Ａ—ＰＣＰ。其中Ａ　

结构域（约５５０个氨基酸，５０　ｋｕ）负责肽链延伸过程中识别　

特定氨酰单体；ＰＣＰ结构域（约８０个氨基酸，８～１０　ｋｕ），具　

有一个硫醇位点用于共价结合酰基肽链延伸过程中的底　

物或中间产物。Ｃ结构域（约４５０个氨基酸，５０ｋｕ），负责其　

上下游ＰＣＰ上氨酰基底物间的缩合反应。ＮＲＰＳｓ的起始模　

块通常为Ａ—ＰＣＰ，Ａ结构域识别肽链合成的第一个氨基　

酸，将其共价结合￣ＩＪＰＣＰ结构域上。但个别ＮＲＰｓｓ的起始　

模块由Ｃ—Ａ．ＰＣＰ组成，￣ｔＨｐｌｉｐａｓｔａｔｉｎ。Ｃ结构域起到将氨基　

酸Ｎ末端进行酰基化作用［１ｌ】。ＮＲＰＳｓ的终端模块通常由　

Ｃ．Ａ．ＰＣＰ—ＴＥ组成，其中ＴＥ结构域具有水解和环化作用，　

通过还原酶催化硫醇还原生产多肽前体物质。　

非核糖体肽的化学合成是将一些小的构建单体通过　

化学迭代缩合构成线性寡聚物。参与ＮＩ　ｓｓ合成的前体不　

限于２０种蛋白氨基酸，其构建单元的种类超过３ｏ０种，如非　

蛋白质氨基酸、羧基酸和羟基酸等。其中一些构建单体是　

由微生物产生的专一性酶催化初级代谢产物而成。每个　

ＰＣＰ结构域中一特定丝氨酸残基侧链上，形成以硫醇为末　

端的泛酰巯基乙胺基结合臂。肽链延伸过程中，氨酰基链　

和肽链共价结合在泛酰巯基乙胺基结合臂的硫醇位点。　

在Ｍ　存在的条件下，Ａ结构域识别特定氨基酸，并消耗１　

个三磷酸腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ　ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＡＴＰ）活化氨基酸残　

基的羧基形成氨酰基．ＡＭＰ的酸酐混合物，随后将氨酰基　

基团安装￣ＩＪＰＣＰ结构域的硫醇位点。Ｃ结构域催化上游　

ＰＣＰ硫醇位点的肽基与下游ＰＣＰ硫醇位点的亲核氨酰基　

间形成Ｃ－Ｎ键，并将肽基基团转移到氨酰基团，使肽链增　

加一个氨酰残基。　

Ｄ氨基酸残基普遍存在于脂肽的肽链结构中，对脂　

肽生物学功能的实现起到重要作用。由于微生物细胞中　

大多缺失Ｉ）－氨基酸，尤其是非蛋白质类Ｉ）．氨基酸。研究表　

明用于ＮＲＰＳｓ合成的Ｄ－氨基酸主要来自两条途径。其一，　

外部的消旋酶产生Ｉ）－氨基酸，随后被Ａ结构域选择识别并　

活化。其二，ＮＲＰＳｓ模块中包含的差向异构酶能催化氨基　

酸旋光性的改变，使工广氨基酸转变为Ｉ）－氨基酸。在革兰氏　

阳性细菌中通常包含一个约５０　ｌ（ｕ的差向异构酶结构域，　

可对参入的厶氨基酸残基单体进行差向异构化作用，形成　

Ｄ氨基酸【　。该模块的结构为Ｃ。Ａ．ＰＣＰ—Ｅ，其中Ｅ结构域将　

工厂氨酰基底物或肽基底物转变成Ｄ构象，并使二者浓度保　

持相对平衡。在随后的肽键形成过程中，比邻Ｅ结构域下　

游的ｃ结构域特异性排斥Ｌ氨基酸，仅Ｄ氨基酸被接纳参　

与下游肽基合成【埘。　

３环脂肽合成调控　

表１　各种环脂肽合成ＮＲＰＳｓ的基因组成　

Ｔａｂｌｅ　１　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＮＲＰＳｓ　ｏｆ　ｄｉｖｅｒｓｅ　ｃｙｃｌｉｃ　

ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　

脂肽　ＮＲＰＳｓ基因组成　

Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　ｐｍｘＡ、ｐｍｘＢ、ｐｍｘＥ　

Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ　

ｄｐ　、ｄｐｔＢＣ、ｄｐｔＤ　

Ｃｏｒｐｅｐｔｉｎ　

ｃｒｐＣ、ｃｒｐＤ、ｃｒｐＥ　

Ｐｅｌｇｉｐｅｐｔｉｎ　

ｐｌｐＤ、ｐｌｐＥ、ｐｌｐＦ　

Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｓｒｆＡ、ｓｒｔＢ、ｓｒｆＣ、ｓｒｌＤ　

Ｉｔｕｒｉｎ　

ｉｔｕＡ、ｉｔｕＢ、ｉｔｕＣ、ｉｔｕＤ　

Ｂａｃｉｌｌｏｍｖｃｉｎ　

ｂｒｎｙＡ、ｂｍｙＢ、ｂｍｙＣ、ｂｍｙＤ　

Ｆｅｎｇｙｃｉｎ　ｆｃｎＡ、ｆｃｎＢ、ｆｅｎＣ、ｆｅｎＤ、ｆｅｎＥ　

８．２们６　Ｎ。・　

。　。　Ｓｅｒｉ　ａ　０Ｉ　Ｎ　２９８　

．

．　

Ｃｈｉ　Ｂｒｅｗｉ

Ｃｈｉｎａ　Ｂｒｅｗｉｎｇ　

Ｆｏｒｕｍ　ａｎｄ　Ｓｕｍｍａｒｙ　

脂肽的合成通常受到组成ＮＲＰＳｓ基因表达的影响　

（见表１）。调控其中各个基因的转录能够有效的改变脂肽　

表达量。　

脂解酶，Ｈｐｃ基因编码磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶［１９】。　

３．５　Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ合成基因　

Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ合成基因簇为　基因簇，其中ｓｒｆＡ、ｓｒｆＢ、ｓｒｆＣ　

由ｐ刀１ｘ基因簇编码合成，其中ｐｍｘＡ、ｐｍｘＢ和ｐｍｘＥ￣　

到ＮＲＰｓｓ作用，识别特异氨基酸合成肽链。ｐｍｘＣ、　似Ｄ位　

于ｐｍｘ基因簇中间负责编码腺苷三磷酸结合盒转运蛋白　

ＴＰ．ｂｉｎｄｉｎｇ　ｃａｓｓｅｔｔｅ，ＡＢＣ），编码２个跨膜转运蛋白。敲　

和ｓ舡Ｉ起到ＮＩ　ｓｓ作用编码肽链。在芽孢杆菌中，群体效　

应对脂肽的合成起到重要作用。￣Ｉｓｕｒｆａｃｔｉｎ基因的表达伴　

随着菌体密度的增加，尤其在从指数生长期转向稳定生　

长期时表达量最高，而ｆｅｎｇｙｃｉｎ￣ｌｉｔｕｆｉｎ基因的表达出现在　

除这两基因将导致ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ产生量降低。ｅｔｃＢ基因编码　

二氨基丁酸氨基转移酶，负责ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ＠￣蛋白质氨基　

稳定生长期的后期。在各种脂肽中，ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的调控机理比　

较明确。Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ生物合成的调控网络包括感受态调节蛋　

酸残基２，４。二氨基丁酸（２，４一ｄｉａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ，Ｄａｂ）合　

成。菌株ｅ纠　基因缺失导致不产ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ。ａｂｒＢ基因编码　

一

种ＤＮＡ结合蛋白，可结合于ｐｍｘＡ的启动区域从而抑制　

转录的发生，阻断ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ的合成。ｓｐｏＯＡ基因编码的　

ＳｐｏＯＡ蛋白能够竞争性结合ａｂｒＢ基因，导致ＡｂｒＢ蛋白合　

成受阻，从而解除其对ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ合成的阻遏【ｌ４】。Ｙｕ　ｚ等【　

研究发现在发酵３５　ｈ后添加脂肽结构前体氨基酸会抑制　

脂肽合成相关基因的表达，从而显著抑￥１ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｅ的　

合成。Ｌ—Ｄａｂ会抑￥１ｐｍ，，Ａ、ｐｍｘＥ￣因及２，４．氨基丙酮酸氨　

基转移酶合成基因ｅｃｔＢ基因的表达。Ｌ．Ｌｅｕ和Ｄ．Ｌｅｕ能抑　

制ｐｍｘＡ基因表达。Ｌ　Ａｓｐ能抑制ｅｃｔＢ、ｐｍｘＡ、ｐｍｘＥ基因　

的表达。　

３．２　Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ￣－ｆ成基因　

Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ￣ｄｐ堪因簇编码合成，其中ｄ口ｔＡ、ｄｐｔＢＣ　

和ｄｐｔＤ基因起到ＮＲＰＳｓ作用。Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ的１３个氨基酸中　

Ｏｍ６、ＭｅＧｌｕｌ２和Ｋｙｎｌ３为非蛋白质氨基酸残基。其中Ｏｍ　

来源于菌体的初级代谢，而不在ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ合成基因簇　

中。ｄｐ嬉因编码蛋白将Ｓ．腺苷甲硫氨酸（Ｓ　ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅ　

ｔｈｉｏｎｉｎｅ，ＳＡＭ）的甲基转移到　．酮戊二酸生成３．甲基仅．酮　

戊二酸，进而通过转氨反应生成甲基谷氨酸。ｄｐ蝴码的　

色氨酸．２，３．双加氧酶催化Ｌ　Ｔｒｐ犬鸟氨酸形成Ｎ．甲酰犬尿　

氨酸，在犬尿氨酸甲酰胺酶作用下脱甲酰基形　。合　

成基因簇附近的＠ｔＲ２基因负责编码ＤｐｔＲ２调节因子。该　

调节因子是非特异性调节因子，能调控ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ的合　

成，但不调节ｄｐｃ基因的表达　。　

３＿３　Ｃｏｒ１）ｅｐｔｉｎ合成基因　

Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｃｏｒｒｕｇａｔａ　ＣＦＢＰ　５４５４合成的ｃｏｒｐｅｐｔｉｎ为　

环状脂肽，编码ＮＲＰＳｓ的基因为ｃｒｐＣ、ｃｒｐＤ、ｃｒｐＥ。当菌体　

处于高密度时，诱发ｃｒｐＣ基因的表达。与群体效应相关的　

ＬｕｘＲ基因转录调控因子（ＰｃｏＲ和ＲｆｉＡ）对ｃｒｐＣ基因的表达　

具有积极作用【１８】。　

３．４　Ｐｅｌｇｉｐｅｐｔｉｎ合成基因　

Ｐａｅｎｉｂａｃｆｆｌｕｓ　ｅ培　Ｂ６９合成的ｐｅｌｇｉｐｅｐｔｉｎ，ｐｉｐ基因簇负　

责脂肽的合成，其中编码ＮＲＰＳｓ的基因为ｐｌｐＤ、ｐｉｐｅ、ｐｌｐＦ。　

Ｐｅｌｇｉｐｅｐｔｉｎｌ￣肽的１，３，６位置含有３个非蛋白质氨基酸（Ｌ－２，　

４一二氨基丁酸），Ｉ￣ｐｌｐＡ基因负责编码。ｐｌｐＢ￣因编码胞外　

白ＣｏｍＡ／ＣｏｍＰ、细胞密度相关信息素ＣｏｍＸ和磷酸酶相　

关蛋￣ｔＲａｐＣ。菌体生长过程中合成的信息肽ＣｏｍＸ分泌到　

胞外，当ＣｏｍＸ达到某一浓度菌体便会诱导细胞膜上组氨　

酸激酶ＣｏｍＰ磷酸化调节子ＣｏｍＡ，ＣｏｍＡ．Ｐ绑定在ｓｒｆＡ的　

启动子区域，启动ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的合成。ＲａｐＣｔ￣够对ＣｏｍＡ．Ｐ去　

磷酸化，从而抑￥１ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的合成。ＲａｐＣ活力取决于细胞　

内五肽磷酸酶调节蛋白ＰｈｒＣ的浓度。低浓度Ｐｌ　导致　

ＲａｐＣ￣活力，进而促进ｓｆ躔因的表达，而高浓度ＰｈｒＣ抑制　

ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的生物合成。细胞ＰｈｒＣ浓度受￣ｌＳｐｏＯＫ透性酶　

的影响，其功能为协助ＰｈｒＣ透过细胞膜进行转运。　因　

的表达还受到其他转入因子的调节，如：正调节因子￣ＤｅｇＵ　

蛋白和Ｈ　Ｏ　胁迫响应因子ＰｅｒＲ）和负调节因子（ＡｂｒＢ以及　

ＧＴＰ感应因子ＣｏｄＹ）［２０－２”。　

３．６［ｔｕｒｉｎ￣成基因　

Ｉｔｕｒｉｎ家族脂肽合成受到多种调控网络的调控。如　

Ｍｙｃｏｓｕｂｔｉｌｉｎ的合成受到ＡｂｒＢ蛋白的调节。ｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ　

的合成受到多重调控。ＤｅｇＵ直接激活ｂ脚ｙ操纵子的表达。　

在ｂｍｙｒ￣动子区域上游有两个位点可以结合ＤｅｇＵ。第一　

个位点位于接近转绿起始区域上游．１２３～．９９　ｂｐ；第二位　

点在位于上游．２０１～　１７２　ｂｐ。第一结合位点绑定ＤｅｇＵ能　

触发ＤＮＡ链发生弯曲，从而使第二位点能与ＤｅｇＵ发生有　

效的结合，第二位点的结合对于ｂｍｙ操纵子的启动是必须　

的。降解酶调节蛋白（ＤｅｇＱ）是一种多效调控蛋白，含有４６　

个氨基酸，调控降解酶、胞内蛋白酶及几种胞外酶的表达。　

研究表明ＤｅｇＱ能够促进非核糖体途径合成的抗生素的产　

生，并有利于提高ｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ的产量。与ＤｅｇＵ作用机　

制相比，ＤｅｇＱ采用间接调控方式促进ｂｍｙ基因的表达，而　

媒介蛋白为ＤｅｇＵ。原因是：（１）ＤｅｇＱ与典型转录调节蛋白　

无同源性；（２）ＤｅｇＱ过量表达不能弥补由于ＤｅｇＵ缺失对　

ｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ合成的影响；（３）当ＤｅｇＱ与ｂｍｙＤ启动子区　

域两个结合区域完全绑定后，ＤｅｇＱ对６ｍｙ基因表达的调　

控作用才开始显现。ＤｅｇＱ与环腺苷酸蛋白激酶的小部分　

区域具有同源性，可能具有促进ＤｅｇＵ的转磷酸化作用［２２１。　

研究发现ＣｏｍＡｔｌ够促进ｄｅｇＱ基因的表达，通过ＤｅｇＱ间　

接影响ｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ的生物合成吲。此外，ｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ　

的合成也受到细胞内膜蛋￣ＹｃｚＥ的影响。当敲除解淀粉　

专论与综述　中　国　酿造　２０１６年第３５卷第１２期．９．　

总第２９８期　一　

芽孢杆菌ＦｚＢ４２中ｌｙｃｚＥ基因，会完全抑￥１Ｊｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ的　

合成，而不会影响其他抗菌肽的合成　。　

４环脂肽发酵方式　

的合成呈正偶联关系。　

４．３无泡沫法生产脂肽　

此外，一些学者尝试建立无泡沫产生的发酵方法生　

脂肽为两性分子，发酵罐中好氧微生物分泌的脂肽　

在通气和搅拌的条件下会产生大量泡沫。泡沫顺大气压　

力降低方向运动排出罐体，造成代谢产物和料液的流失　

并造成污染。为防止泡沫产生，通常在发酵过程中流加消　

泡剂将泡沫抑制在合理水平。随着脂肽不断合成，所消耗　

产脂肽类物质。￣ｏｒｉＮｏ　Ａ等刚利用Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ以豆腐渣和　

豆渣为底物进行固体发酵，ｓｕｒｆａｃｔｉｎ最大产量为２．０　ｇ／ｋｇ　

（湿质量）。ＳＬＷＩＮＳＫＩ　Ｃ　Ｔ等　利用Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｔｕｎｉｌｕｓ未　

水解的豆渣和甘蔗渣质量比（１：１）为底物进行固体发酵，　

甘蔗渣主要起到膨松剂的作用，其ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的产量达到　

消泡剂的量也不断增加。由于消泡剂的价格高，且在下游　

纯化工艺中难以去除，所以，消泡剂的大量使用会增加脂　

肽生产成本，在规模化生产中难以实现。至今脂肽的发酵　

生产规模仅限于实验室水平。为此，许多学者采用不同发　

酵方式尝试解决泡沫带来的问题。　

４．１泡沫收集法生产脂肽　

早期解决此问题的办法是提高罐内搅拌剪切力或气　

体压力，但二者均不能有效消除脂肽产生的泡沫。２００１年，　

ＤＡＶＩＳ　Ｄ　Ａ等［２５１提出采用泡沫溢出法回收发酵液中的所　

含的表面活性产物。相对于不含菌体细胞的发酵液，含有　

菌体细胞的ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的发酵液能更高效的产生泡沫，且泡　

沫中液体的含量更多。而不含菌体细胞的ｓｕｒｆａｃｔｉｎ发酵液　

的富集比例最高可达５ｌ，高于含有菌体细胞的发酵液，二　

者的ｓｕｒｆａｃｔｉｎ回收率均达到９７％左右。在转速为１６６　ｒ／ａｒｉｎ　

的条件下，通过泡沫收集的ｓｕｒｆａｃｔｉｎ量达到１．２　ｇ／Ｌ。ＹＡＯ　

Ｓ等闭同样采用泡沫溢出法发酵生产ｓｕｒｆａｃｔｉｎ。研究发现，　

在转速和通气量质量分别维持在１５０　ｒ／ｍｉｎ和１　ｗｍ的条件　

下，泡沫中ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的质量浓度可以维持在４　ｇ／Ｌ的水平，　

最高质量浓度可以达到４．７　ｇ／Ｌ。　

４．２添加固形物生产脂肽　

一

些学者研究则采用在发酵培养基中添加固形物质　

提高生物表面活性剂的产量。ＦＯＸ　Ｓ　Ｌ等　在使用Ｂ．ｓｕｂ．　

ｔｉｌｉｓＡＴＣＣ　２１３３２发酵生产ｓｕｒｆａｃｔｉｎ时发现，以固体土豆替　

代可溶性土豆汁能更有效的合成ｓｕｒｆａｃｔｉｎ，推测固体底物　

可能更适合ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的合成。ＹＥＨ　Ｍ　Ｓ等例也尝试在发酵　

液中添加固体载体物质，包括：活性炭、琼脂和膨胀黏土，　

以测试这些物质对枯草芽孢杆菌产ｓｕｒｆａｃｆｉｎ的影响。试验　

结果证明，固型添加物能有效促进ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的合成，其中添　

加活性炭的效果最为显著。活性炭在发酵过程中能够有　

效提高菌体的浓度，进而提高ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的产量。当在发酵液　

中添加２５　ｇ／Ｌ活性炭时，ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的产量达到３．６　ｇ／Ｌ，而对　

照的产量只有０．１　ｇ／Ｌ。随后，ＹＥＨ　Ｍ　Ｓ等　结合泡沫溢出　

法和添加固型载体法的特点，在发酵罐内添加活性碳，并　

在发酵罐外连接泡沫收集罐，细胞回收装置和ｓｕｒｆａｃｔｉｎ沉　

淀装置，尝试提高ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的产量。结果表明，在未添加消　

泡剂的情况下，ｓｕｒｆａｃｔｉｎ￣够稳定和高效的产生，产量最高　

达到６．４５　ｇ　。试验同时表明氧气体积传质系数与ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　

６．５　ｅＣｋｇ干物质。类似固体发酵法也用于ｉｔｕｒｉｎ的发酵生产，　

ｉｔｕｒｉｎ的产量达到１４　ｇ／ｋｇ干物质，为液体发酵产量的１０倍　

左右［３２］。ＰＩＥＤＲＡＨＩＴＡ．ＡＧＵＩＲＲＥ　Ａ等［３３】研究在发酵ｉｔｕｒｉｎ　

时通气量对固体发酵过程中压力变化、氧气消耗、培养基　

的渗透性、温度变化造成的影响。结果表明，在通气量为　

０．４　Ｌ／ｍｉｎ时，ｉｔｕｒｉｎ的质量分数达到５．５８　ｇａ　ｇ干物质。　

ＣｏｕＴＴＥ　Ｆ等　利用无泡沫生成生物反应器生产ｓｕｒ－　

ｆａｃｔｉｎ和ｆｅｎｇｙｃｉｎ。由于在气液界面上安装了中空纤维膜，　

发酵液在发酵过程中不会产生泡沫。Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ产量达到　

０．２４２　ｇ／Ｌ，且其中的大部分吸附在中空纤维膜上。而　

ＣＯＩ　ｒＥ　Ｆ等　则采用旋转碟片生物反应器生成ｓｕｒｆａｃｔｉｎ，　

发酵过程中，菌体悬浮生长并在碟片上形成生物膜。　

当碟片旋转暴露在空气中时，菌体能利用罐内的氧气进　

行有氧呼吸，ｓｕｒｆａｃｔｉｎ最大产量达到０．２１２　。而当罐内氧　

含量受限制时，菌体产生ｆｅｎｇｙｃｉｎ的量则会超过ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的　

产生量。有趣的是，ＷＩＬＬＥＮＢＡＣＨＥＲ　Ｊ等【　尝试采用厌氧　

发酵法生成ｓｕｒｆａｃｔｉｎ。ＢａｃｉｌｌＵ８　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ＤＳＭ　１０Ｔ在厌氧发　

酵罐中发酵，虽然ｓｕｒｆａｃｔｉｎ最大产量只有０．０８７　ｇ／Ｌ，但通过　

计算以消耗葡萄糖产生ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的产品转化率发现，ｓｕｒ－　

蠡ｌｃ觚厌氧发酵的转化率达到０．２７８　ｇ／ｇ，该数值高于大多数　

通气液体深层发酵的产品转化率。　

５产量优化策略　

许多学者应用多种策略优化提高脂肽产量。如为提　

高玫瑰孢链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｏｓｐｏｒｕｓ）产ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ的　

水平，常用策略是采用Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ设计、最陡爬坡试　

验、响应面设计和均匀设计等方法优化培养基组分或培　

养条件［３６－３７１。其次优化ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ合成前体物质癸酸的补　

料起始时间、补料流加方式策略也有助于ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ发酵　

水平的提高［３８－３９］。　

６利用废弃物合成环脂肽　

脂肽除用于化妆品行业和医药行业，也可用于农业，　

如：种植业和养殖业。而目前脂肽的价格偏高限制其在农　

业应用范围。在脂肽生产过程中，底物成本占据总成本的　

１０％￣３０％左右。而利用农业或食品行业中产生的废弃物　

生产脂肽，即可有效降低脂肽的生产成本，又可缓解废弃　

物对环境造成的危害。近年来，许多研究关注于利用农业　

废弃物稻秆和食品生产后的废液，如玉米浆、面条生产后　

・

１　０・　

ｏ

１ｓ６　Ｖ

ａ

．

。恙　Ｃｈｉｎａ　Ｂｒｅｗｉｎｇ　

得较高的脂肽产量（见表２）。　

Ｆｏｒｕｍ　ａｎｄ　Ｓｕｍｍａｒｙ　

的废水、压榨橄榄油后的废弃物和长时间煎炸食物后的　

食用油等生产脂肽类物质，在降低生产成本的同时，也获　

表２微生物利用不同废弃物合成脂肽　

Ｔａｂｌｅ　２　Ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｗａｓｔｅ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ　

７展望　

ｆｅｎｇｙｃｉｎ　ａｎｄ　ｍｏｄｅｌ　ｂｉｌａｙｅｒｓ　ｑｕａｎｔｉｉｅｄ　ｂｙ　ｃｏａｒｓｆｅ—ｇｒａｉｎｅｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　

环脂肽类物质在多个领域中都表现出潜在的应用价　

值，但目前产率低，生产成本高及代谢调控理论的不完善　

均阻碍了脂肽的广泛应用。未来可通过高产菌株的选育和　

基因工程技术的改选使脂肽的产量达到工业化生产水平。　

参考文献：　

［１］ＬＩＭ　Ｌ　Ｍ，ＬＹ　Ｎ，ＡＮＤＥＲＳＯＮ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｓｕｒｇｅｎｃｅ　ｏｆｃｏｌｉｓｔｉｎ：ａ　ｒｅｖｉｅｗ　

ｏｆ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｐｈａｎｎａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ，ａｎｄ　ｄｏｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈ—　

ｄｙｎａｍｉｃｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｊ，２０１３，１０５（７）：１６１２—１６２３．　

［１１】ＳＴＥＬＬＥＲ　Ｓ，ＶＯＬＬＥＮＢＲＯＩＣＨ　Ｄ，ＬＥＥＮＤＥＲＳ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｎｄ　ａ

ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｎｇｙｃｉｎ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ　ｍｕｌｔｉｅｎｚｙｍｅ　ｓｙｓｔｅｍ　

ｆｒｏｍ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｆｉｓ　ｂ２１３　ａｎｄ　Ａ１／３［Ｊ］．Ｃｈｅｍ　Ｂｉｏｌ，１９９９，６（１）：３１－４１．　

［１２】ＬＩＮＮＥ　Ｕ，ＤＯＥＫＥＬ　Ｓ，ＭＡＲＡＨＩＥＬ　Ｍ　Ａ．Ｐｏｒｔａｂｉｌｉｙ　ｔｏｆ　ｅｐｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ　

ｄｏｍａｉｎ　ａｎｄ　ｒｏｌｅ　ｏｆｐｅｐｔｉｄｙｌ　ｃａｒｒｉｅｒ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｎ　ｅｐｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　

ｉｎ　ｎｏｎｒｉｂｏｓｏｍａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，４０：１５８２４—　

１５８３４．　

［１３］ＢＥＬＳＨＡＷ　Ｐ　Ｊ，ＷＡＬＳＨ　Ｃ　Ｔ，ＳＴＡＣＨＥＬＨＡＵＳ　Ｔ．Ａｍｉｎｏａｃｙｌ－ＣｏＡｓ　ａｓ　

ｐｒｏｂｅｓ　ｏｆ　ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ　ｄｏｍａｉｎ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｙ　ｉｔｎ　ｎｏｎｒｉｂｏｓｏｍａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　

ｅｒａｐｙ，２０１０，３０（１２）：１２７９—１２９１．　

［２］ＭＥＨＴＡ　Ｍ，ＢＡＲＯＮ　Ｊ　Ｍ，ＮＥＬＳＯＮ　Ｂ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｂ　ｕｓｅ　

ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｅｖｅｒｅ　ｈｙｐｏｔｅｎｓｉｖｅ　ｅｐｉｓｏｄｅｓ［Ｊ］．Ｊ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏ，２０１５（１）：２．　

【３］ＳＴＥＥＮＢＥＲＧＥＮ　Ｊ　Ｎ，ＡＬＤＥＲ　Ｊ，ＴＨＯＲＮＥ　Ｇ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｄａｐｔｏｍｙｅｉｎ：ａ　

ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａａｎｅｎｔ　ｏｆ　ｓｅｒｉｏｕｓ　ｇｒａｍ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．　

Ｊ　Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂ　Ｃｈｅｍｏｔｈ，２００５，５５（３）：２８３・２８８．　

【４】ＧＵＯ　Ｙ　Ｑ，ＨＵＡＮＧ　Ｅ，ＹＵＡＮ　Ｃ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．　

ｓｔｒａｉｎ　ａｎｄ　ｓｔｒｕｃｔｒａｌｕ　ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｂｒｏａｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　

ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，２８４：４８６—４８９．　

【１４］郭成林，孙东昌，裘娟萍．抗耐药菌药物多粘菌素生物合成及其应用　

研究进展［Ｊ］．科技通报，２０１６（３２）：５８—６２．　

【１５］ＹＵ　Ｚ，ＧＵＯ　Ｃ，Ｑ｜Ｕ　Ｊ．Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｅ　

ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｏｌｙｍｙｘａ，ｐｒｏｂａｂｌｙ　ｂｙ　ａｆｆｅｃｔｉｎｇ　ｔｈｅ　

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｅｎｅｓ【Ｊ］．Ｂｉｏ　１／＿ｅｓ　Ｉｎｔ，　

２０１５．２０１５：１－１１．　

ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ［Ｊ］　Ａｐｐｉ　Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，７８（９）：３１５６—３１６５．　

［５］ＨＵＡＮＧ　Ｅ，ＧＵＯ　Ｙ　Ｑ，ＹＯＵＳＥＦ　Ａ　Ｅ．Ｄｒａｆｔ　ｇｅｎｏｍｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　

Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．ｓｔｒａｉｎ　ＯＳＹ—ＳＥ，ａ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｔｈｅ　ｎｏｖｅｌ　

【１６］ＢＡＬＴＺ　Ｒ　Ｈ．Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｏｆ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　

ｎｔａｉｂｉｏｔｉｃｓ　ｒｅｌａｔｅｄｔｏ　ｄａｐｔｏｍｙｅｉｎ［Ｍ］．ＨＯＰＷＯＯＤＤＡ．Ｃｏｍｐｌｅｘ　ｅｎｚｙｍｅｓ　

ｉｎ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔ　ｂｉｏｓｎｔｙｈｅｓｉｓ．Ｐａｒｔ　Ａ：Ｏｖｅｒｖｉｅｗ　Ａｒｔｉｃｌｅｓ　

ｎｄＰｅｐｔｉａｄｅｓ，２００９：５１１－５３１．　

ｂｒｏａｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｐａｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｎ［Ｊ】＿Ｊ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，２０１２，　

１９４（２２）：６３０６—６３０６．　

［６］ＪＡＮＥＫ　Ｔ，ＬＵＫＡＳＺＥＷＩＣＺ　Ｍ，ＫＲＡＳＯＷＳＫＡ　Ａ．Ａｎｔｉａｄｈｅｓｉｖｅ　ａｃｔｉｖｉｙ　ｔ

ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｕｒｆａｃｔａｎｔ　ｐｓｅｕｄｏｆａｃｔｉｎ　ＩＩ　ｓｅｃｒｅｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ａｒｃｔｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　

【１７］ＷＡＮＧ　Ｆ，ＲＥＮ　Ｎ　Ｎ，ＬＵ０　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｄｐｍ２，ａ　ＤｅｏＲ－ｔｙｐｅ　ａｕｔｏ—ｒｅｇｕｌａｔｏｒ，　

ｉｓ　ｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒ　ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｏｓｐｏｍｓ［Ｊ］．　

Ｇｅｎｅ，２０１４，５４４：２０８—２１５．　

Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ［１ｕｏｒｃｓｃｃｎｓ　ＢＤ５［Ｊ］．Ｂｍｃ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，１２（１）：２４．　

［７］ＪＡＮＥＫ　Ｔ，ＫＲＡＳＯＷＳＫＡ　Ａ，ＲＡＤＷＡ　ＳＫＡ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　

ｂｉｏｓｕｒｆａｃｔａｎｔ　ｐｓｅｕｄｏｆａｃｔｉｎ　ＩＩ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆｍｅｌａｎｏｍａ　Ａ　３７５　ｃｅｌｌｓ　

【１８］ＳＴＲＡＮＯ　Ｃ　Ｐ，ＢＥＬＬＡ　Ｐ，ＬＩＣＣＩＡＲＤＥＬＬＯ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　

ｃｏｒｒｕｇａｔａ　ｃｒｐＣＤＥ　ｉｓ　ｐａｒｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｙｃｌｉｃ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ｅｏｒｐｅｐｔｉｎ　

ｂｉｏｓｎｔｙｈｅｔｉｃ　ｇｅｎｅ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ａｎｄ　ｉｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ　ｉｎ　

ｂｙ　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｔｌ１　ｔｈｅ　ｐｌａｓｍａ　ｍｅｍｂｒａｎｅ［Ｊ］．ＰｌｏＳ　ｏｎｅ，２０１３，８（３）：　

１３４．　

ｔｏｍａｔｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｉｎ　Ｎｉｃｏｔｉｎａ　ｂｅｎｔａｈａｍｉｎａ［Ｊ］ｌａ　

Ｍｏｌｅｃｕｌ　Ｐｌａｎｔ　Ｐａｔｈｏｌ，２０１５，１６：４９５—５０６．　

［８］ＤＥＬＥＵ　Ｍ，ＢＯＵＦＦＩＯＵＸ　Ｏ，ＲＡＺＡＦＩＮＤＲＡＬＡＭＢＯ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．　

Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｅｔｉｎ　ｗｉｔｈ　ｍｅｍｂｒａｎｅｓ：ａ　ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ　ａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］ｌ　

Ｌａｎｇｍｕｉｒ，２００３，１９（８）：３３７７—３３８５．　

【９］ＧＡＯ　Ｚ，ＺＨＡＯ　Ｘ，ＹＡＮＧ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆ　

ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｂｙ　ｏｒａｌ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ｉｎ　ＮＯＤ　ｍｉｃｅ　

［１９】ＱＩＡＮ　Ｃ　Ｄ，ＬＩＵ　Ｔ　Ｚ，ＺＨＯＵ　Ｓ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　

ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｇｅｎｅ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ　ｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｙｃｌｉｃ　

ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｐｅｌｇｉｐｅｐｔｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｅｌｇｉｉ【Ｊ】．　

ＢＭＣ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，１２（１）：１９７．　

【２０］ＣＯＳＢＹ　Ｗ　Ｍ，ＺＵＢＥＲ　Ｐ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ｓｉｇｍａ（Ｈ）　

（ＳＰＯＯＨ）ａｎｄ　ＡｂｒＢｉｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ｃｈａｎｇｅｓｉｎ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｐＨ［Ｊ］．Ｊ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，　

１９９７，１７９（２１）：６７７８—６７８７．　

［Ｊ］．Ｖａｃｃｉｎｅ，２０１４，３２（５０）：６８１２—６８１９．　

【１０］ＨＯＲＮ　Ｊ　Ｎ，ＣＲＡＶＥＮＳ　Ａ，ＧＲＯＳＳＦＩＥＬＤ　Ａ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　

专论与综述　中　国　酿　造　２刚６　

５

３

期　

・　

２９　８　

总第　期　

［２１］ＣＯＳＢＹ　Ｗ　Ｍ，ＶＯＬＬＥＮＢＲＯＩＣＨ　Ｄ，ＬＥＥ　Ｏ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ａｌｔｅｒｅｄ　ｓｒｆ　

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｐＨ　ｉｓ　

７２：８６９－８７５．　

【３３］ＰⅢＤＲ　ＡＨＩＴＡ．ＡＧＵＩＲＲＥ　Ｃ　Ａ，ＢＡＳＴＯＳ　Ｒ　Ｇ，ＣＡＲＶＡＬＨＯ　Ａ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．　

Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｔ＇ｏｐｅｐｔｉｄｅ　ｉｔｕｒｉｎ　

ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ＳｐｏＯＫ　ｏｌｉｇｏｐｅｐｔｉｄｅ　ｐｅｒｍｅａｓｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ＣｏｍＱＸ　ｓｙｓｔｅｍ　

ｏｆｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．Ｊ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，１９９８，１８０（６）：１４３８—１４４５．　

【２２］ＤＲＡＮＳＦＩＥＬＤ　Ｄ　Ｔ，ＹＥＨ　Ｊ　Ｌ，ＢＲＡＤＦＯＲＤ　Ａ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　

ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　Ａ—ｋｉｎａｓｅ－ａｎｃｈｏｒｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＫＡＰ１２０）　

ｆｒｏｍ　ｒａｂｂｉｔ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｐａｒｉｅｔａｌ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｊ，１９９７，３２２（３）：８０１－８０８．　

［２３］ＭＳＡＤＥＫ　Ｔ，ＫＵＮＳＴ　Ｆ，ＫＬＩＥＲ　Ａ，ｅｔ　ａ１．ＤｅｇＳ—ＤｅｇＵ　ｎｄ　ａＣｏｍＰ－ＣｏｍＡ　

ｍｏｄｕｌａｔｏｒ－ｅｆｆｅｃｔｏｒ　ｐａｉｒｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　

Ａ　ｕｓｉｎｇ　ａｅｒａｔｅｄ　ｐａｃｋｅｄ　ｂｅｄ　ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓ　ｉｎ　ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．　

Ｂｉｏｐｒｏｃ　Ｂｉｏｓｙｓｔ　Ｅｎｇ，２０１４，３７（８）：１５６９－１５７６．　

【３４］ＣＯＵＴＴＥ　Ｆ，ＬＥＣ０ｕＴ吣Ｒ　Ｄ，ＹＡＨＩＡ　Ｓ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　

ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ａｎｄ　ｆｅｎｇｙｃｉｎ　ｂｙ　ＢａｃｉＨｕｓ　ｓｕｂｆｉｉｆｓ　ｉｎ　ａ　ｂｕｂｂｌｅｌｅｓｓ　ｍｅｍｂｒｎｅ　ａ

ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒ［Ｊ］．Ａｐｐｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０１０，８７（２）：４９９－５０７．　

［３５］ＷＩＬＬＥＮＢＡＣＨＥＲ　Ｊ，ＲＡＵ　Ｊ　Ｔ，ＲＯＧＡＬＬＡ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｆｏａｍ—ｆｒｅｅ　

ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｖｉａ　ａｎａｅｒｏｂｉｃ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｆｉｓ　

ｐｌｅｉｏｌｒｏｐｉｃ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｇｅｎｅ　ｄｅｇＱ［Ｊ］．Ｊ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，１９９１，１７３（７）：２３６６—２３７７．　

［２４］ＫＯＵＭＯＵＴＳＩ　Ａ，ＣＨＥＮ　Ｘ　Ｈ，ＶＡＴＥＲ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．ＤｅｇＵ　ａｎｄ　ＹｃｚＥ　

ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｒｅｇｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｂａｃｉｌｌｏｍｙｃｉｎ　Ｄ　ｂｙ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　

ＤＳＭ　１０（Ｔ）【Ｊ］．ＡＭＢ　Ｅｘｐｒｅｓｓ，２０１５，５（１）：１－９．　

［３６］祝宇松，陈国胜，吴曼，等．达托霉素发酵培养基的响应面法优化　

［Ｊ］．中国医药工业杂志，２０１０，４１（３）：１８３．１８６．　

［３７】王秀琴，钱思宇，贾啸静，等．达托霉素发酵培养基配方及３０Ｌ罐工　

艺优化［Ｊ］．化学与生物工程，２０１４，３１（８）：５４．５６．　

［３８】吴曼，王文轶，王泽根，等．达托霉素发酵过程中前体癸酸的添加　

ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ　ｓｗａｉｎ　ＦＺＢ４２［Ｊ］．ＡｐｐＩ　Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００７，７３：　

６９５３—６９６４．　

［２５］ＤＡＶＩＳ　Ｄ　Ａ，ＬＹＮＣＨ　Ｈ　Ｃ，ＶＡＲＬＥＹ　Ｊ．Ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏａｍｉｆｎｇ　ｆｏｒ　

ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ＡＴＣＣ　２１３３２　ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．　

Ｅｎｚｙｍｅ　Ｍｉｃｒｏｂ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００１，２８（４—５）：３４６—３５４．　

［２６］ＹＡＯ　Ｓ，ＺＨＡＯ　Ｓ，ＬＵ　ｚ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ａｇｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｅｒａｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｉｎ　

ｈｅ　ｔｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｉｎ　ｆｏａｍ　ｏｖｅｒｆｌｏｗｉｎｇ　ｆｅｄ－ｂａｔｃｈ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｗｉｔｈ　

策略研究［Ｊ］ｌ药物生物技术，２０１２，１９（２）：１４２．１４５．　

【３９］郭朝江，王相金，王化民．玫瑰孢链霉菌补料分批发酵生产达托霉素　

的动力学模型【Ｊ］．中国抗生素杂志，２０１４，３９（４）：２４１—２４４，２５２．　

【４０］ＤＨＡＮＡＲ　ＡＪＡＮ　Ｇ，ＭＡＮＤＡＬ　Ｍ，ＳＥＮ　Ｒ．Ａ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ａｒｔｉｉｆｃｉａｌ　ｎｅｕｒａｌ　

ｎｅｔｗｏｒｋ　ｍｏｄｅｌｉｎｇ—ｐａｒｔｉｃｌｅ　ｓｗａｒｍ　ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｓｔｒａｔｅｇｙ　ｆｏｒ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　

ｉｎｄｕｓｌｒｉａｌ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｒｅｖ　Ａｒｇ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１５，４７（４）：３４４—３４９．　

［２７】ＦＯＸ　Ｓ　Ｌ，Ｂ　Ａ　Ｇ　Ａ．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ　ｆｒｏｍ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　

ＡＴＣＣ　２１３３２　ｕｓｉｎｇ　ｐｏｔａｔｏ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０００，７５（３）：　

２３５—２４０．　

ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆｍａｒｉｎｅ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ｒｆｏｍ　ｆｏｏｄ　ｗａｓｔｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ　

Ｅｎｇ　Ｊ，２０１４，８４（６）：５９－６５．　

［２８］ＹＥＨ　Ｍ　Ｓ，ＷＥＩ　Ｙ　Ｈ，ＣＨＡＮＧ　Ｊ　Ｓ．Ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　

ｆｒｏｍ　Ｂａｃｉｌｌｓ　ｓｕｂｔｕｉｌｉｓ　ｂｙ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｏｌｉｄ　ｃａｒｒｉｅｒｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｔｅｅｈｎｏｉ　Ｐｒｏｇｒ，　

２００５，２１（４）：１３２９・１３３４．　

［４１］ＧＵＤＩ　Ａ　Ｅ　Ｊ，ＦＥＲＮＡＮＤＥＳ　Ｅ　Ｃ，ＲＯＤＲＩＧＵＥＳ　Ａ　Ｉ，ｅｔ　ａ１．Ｂｉｏｓｕｒｆａｃｔａｎｔ　

ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ｕｓｉｎｇ　ｔｏｍ　ｓｔｅｅｐ　ｌｉｑｕｏｒ　ａｓ　ｃｕｌｔｕｒｅ　

ｍｅｄｉｕｍ［Ｊ］．Ｆｒｏｎｔ　Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌ，２０１５（６）：５９．　

［４２】ＭＯＹＡ　Ｒ　Ｉ，ＡＬＴＭＡＪＥＲ　Ｖ　Ｄ，ＢＡＮＡＴ　Ｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｏｌｉｖｅ　

ｍｉｌｌ　ｗａｓｔｅ　ｔｏ　ｅｎｈａｎｃｅ　ｒｈａｍｎｏｌｉｐｉｄｓ　ａｎｄ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．　

Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１６，２０５：１－６．　

［２９］ＹＥＨ　Ｍ　Ｓ，ＷＥＩ　Ｙ　Ｈ，ＣＨＡＮＧ　Ｊ　Ｓ．Ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒ　ｄｅｓｉｇｎ　ｆｏｒ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　

ｃｍｒｉｅｒ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｓｕｒｆａｃｌｉｎ　ｐｌＤｄｕｃｌｉｏｎｗｉｔｈＢａ￣ｎｓ　

２００６，４１（８）：１７９９－１８０５．　

［　Ｐｒｏ０　Ｂｉｏｃｈｅｍ，　

【３０】ＯＨＮＯ　Ａ，ＡＮＯ　Ｔ，ＳＨＯＤＡ　Ｍ．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ，　

ｓｕｒｆａｃｔｉｎ，ｂｙ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ｉｎ　ｓｏｌｉｄ　ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．　

Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ　Ｂｉｏｅｎｇ，１９９５，４７（２）：２０９—２１４．　

［３　１］ＳＬＩＶ１ＮＳＫＩ　Ｃ　Ｔ，ＭＡＬＬＭＡＮＮ　Ｅ，ＡＲＡＵＪＯ　Ｊ　Ｍ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　

ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｂｙ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｕｍｉｌｕｓ　ＵＦＰＥＤＡ　４４８　ｉｎ　ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　

【４３］ＺＨＵＺ，ＺＨＡＮＧ　ＦＧ，ＷＥＩＺ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｕｓａｇｅ　ｏｆｒｉｃｅ　ｓｔｒａｗ　ａｓ　ａｍａｊｏｒ　

ｓｕｂｓｒａｔｔｅ　ｆｏｒ　ｈｅ　ｐｒｔｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔｉｎ　ｂｙ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ　

ＸＺ－１７３　ｉｎ　ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ【Ｊ］．Ｊ　Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｍａｍｇ，２０１３，１２７（２）：　

９６．１０２．　

［４４］ＬＩ　Ｘ，ＺＨＡＮＧ　Ｙ，ＷＥＩ　Ｚ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　

ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ　ＳＹＢＣ　Ｈ４７　ｏｒｆ　ｔｈｅ　ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆｐｅａｃｈ　ｇｕｍｍｏｓｉｓ［Ｊ］．　

ＰｌｏＳ　ｏｎｅ，２０１６（１　１）：ｅ０１６２１２５．　

［４５］ＭＡＤＤＩＫＥＲＩ　Ｇ　Ｌ，ＧＯＧＡＴＥ　Ｐ　ＰＡＮＤＩＴ　Ａ　Ｂ．Ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｓｎｔｙｈｅｓｉｓ　ｏｆ　

ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｗａｓｔｅ　ｃｏｏｋｉｎｇ　ｏｉｌ　ｕｓｉｎｇ　ｆｅｄ　ｂａｔｃｈ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｉｎ　ｔｈｅ　

ｕｓｉｎｇ　ａ　ｍｅｄｉｕｍ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｏｋａｒａ　ｗｉｔｈ　ｓｕｇａｒｃａｎｅ　ｂａｇａｓｓｅ　ａｓ　ａ　ｂｕｌｋｉｎｇ　

ａｇｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，２０１２，４７（２）：１８４８—１８５５．　

［３２］ＭＩＺＵＭＯＴＯ　Ｓ，ＨＩＲＡＩ　Ｍ，ＳＨＯＤＡ　Ｍ．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｐｏｐｅｐｔｉｄｅ　

ｎｔｉａｂｉｏｔｉｃ　ｉｔｕｒｉｎ　Ａ　ｕｓｉｎｇ　ｓｏｙｂｅａｎ　ｃｕｒｄ　ｒｅｓｉｄｕｅ　ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ　ｗｉｈ　Ｂａｃｉｌｔｌｕｓ　

ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ｉｎ　ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ】．Ａｐｐｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｉ，２００６，　

ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆｕｌｔｒｓｏｕｎｄ［ａＪ］．Ｃｈｅｍ　Ｅｎｇ　Ｊ，２０１５，２６３：４７９—４８７．