培养基中的蛋白胨

2024年3月6日发(作者：永泰云顶)

培养基中的蛋白胨

2019版高中生物学选择性必修三介绍了“牛肉膏蛋白胨培养基”，期中蛋白胨是最基本的原材料之一。能为微生物提供氮源、氨基酸等。具有易溶解于水、色浅透明、营养丰富、可被微生物直接利用、可耐受湿热灭菌不凝固、不析出、无沉淀等特点。同时是一种两性电解质，具有缓冲作用。

那么，什么是蛋白胨？有哪些种类和应用？

蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后，干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气味。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。为浅黄色至棕色粉末或颗粒,有肉味,但无腐臭,易溶于水,不溶于乙醇、氯仿和乙醚。

不同来源的蛋白质和不同的水解条件，其水解物中组成可千差万别。所以蛋白胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水，过热不凝固，在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。

蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨、植物性蛋白胨、微生物蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨，而大豆蛋白胨等是植物性蛋白胨、酵母蛋白胨属于微生物蛋白胨。

动物性来源的蛋白胨还有：蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。

蛋白质分解产物，如将牛肉、酪蛋白、牛奶粉、白明胶、大豆蛋白、丝蛋白、血纤维蛋白等为原料，经不完全的水解工艺所得的产物。市售产品以淡黄至棕黄色粉剂为主。其分子量介于䏡和肽之间，约2000左右。不同来源的蛋白质和不同的水解条件，其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水，过热不凝固，在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。

微生物培养基中常用的蛋白胨

1.细菌蛋白胨

一般是胃蛋白酶或胰蛋白酶消化动物组织所得蛋白胨。目前使用最多的是牛骨蛋白胨。

2.酪蛋白胨

又称：干酪素、酪朊、乳酪素、胰酪蛋白胨。

是胰蛋白酶水解酪蛋白所得的蛋白胨，其氨基酸比较齐全，特别是色氨酸含量比较高，适用于靛基质和糖发酵实验，但它缺乏胱氨酸、蛋氨酸等含硫氨酸，不适宜用于硫化氢试验。酪蛋白是

一种含磷钙的结合蛋白，对酸敏感，pH较低时会沉淀。酪蛋白是哺乳动物包括牛、羊和人奶中的主要蛋白质。

3.多价蛋白胨

为酪蛋白胨和细菌蛋白胨等量混合的蛋白胨。适用于一般细菌培养和繁殖。

4.牛肉蛋白胨

胰蛋白酶消化新鲜牛肉所得蛋白胨。富含氨基酸、生长促进因子等，营养成分高于细菌蛋白胨。

5.眎蛋白胨

胰蛋白酶低程度消化酪蛋白所得产物，可以部分被硫酸铵沉淀出来。富含大量低分子量肽、游离氨基酸和促生长因子，不含对氨基苯甲酸，适用于配制细菌产毒素的培养基。

6.大豆蛋白胨

为木瓜蛋白酶消化大豆粉所得水解物，维生素含量高，特别是硫氨素（维生素B1），并含有大量的碳水化合物，是一种不含动物源性的优良蛋白胨，适用于真菌和许多营养要求高的细菌，不适用于微生物糖醇发酵试验。一般与其他类型的蛋白胨混合使用效果更好。

7.酸水解酪蛋白

以优质的酪蛋白为原料，用强酸深度水解、脱色、脱盐、浓缩、喷雾干燥而成的白色或淡黄色粉状物。维生素大部分被强盐酸水解破坏，缺乏胱氨酸和色氨酸。适用于药敏试验用培养基和微生

物法维生素测定用培养基。

8.明胶蛋白胨

为胰蛋白酶水解明胶产物。胱氨酸和色氨酸含量低，不含碳水化合物。特别适用于微生物糖醇发酵试验。

蛋白胨可以作为微生物培养基的主要原料，在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大，可以用来治疗消化道疾病；不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽，因此存在着各种蛋白胨，一般来说，用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白（酪蛋白、肉类）、植物蛋白（豆类）、微生物蛋白（酵母）等三种。能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。

例、某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养。下列说法正确的是

A. 牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH

B. 蛋白胨可为大肠杆菌生长提供氮源、碳源和维生素

C. 倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置

D. 用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

【答案】BCD

【解析】

培养基的制作流程一般为：计算→称量→溶化→调节PH→分装→灭菌→倒平板；微生物分离常用平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

A. 牛肉膏蛋白胨培养基应先调pH再经高压蒸汽灭菌，A错误；

B. 蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供氮源、碳源和维生素等营养，B正确；

C. 倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止冷凝水滴在培养基表面造成污染，C项正确；

D. 因为两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，D正确。