细菌学检验中痰培养的检测方法及临床意义

2024年2月21日发(作者：病树前头)

细菌学检验中痰培养的检测方法及临床意义

摘要】目的：探讨细菌学检测中痰培养的方法及临床意义。方法：选取2015年3月—2016年10月收治的呼吸感染患者36例痰直接涂片和常规培养方法及临床意义进行分析。结果：呼吸感染患者36例痰标本检出菌株数31株，病原菌分离阳性率86.11%。结论：按照正确、标准的操作方式采集标本可提高痰标本中病原菌的阳性检出率，临床检验痰标本主要是采用病原菌进行检查，而使用其方法进行检查结果有较高的效果，但检查结果也受很多因素的影响以实现诊断治疗的效果。

【关键词】细菌学检验；痰培养；检测方法；临床意义

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）05-0088-01

培养的目的在于从临床标本中分离出致病真菌，获得纯培养。当咳嗽、咯痰、痰量增多、痰带脓或脓血，或痰有恶臭，常提示支气管和肺部感染，需要进行病原学检验和药敏试验以指导病因学治疗。通常做需氧培养，根据需要可做厌氧培养、真菌培养或结核分枝杆菌培养[1]。厌氧培养通常需要吸引支气管深部的分泌物，隔绝空气并避免口腔和咽喉的正常菌群污染。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年3月—2016年10月收治的呼吸感染患者36例，其中男21例，女15例，年龄30～80岁，平均年龄55.2±3.5岁。

1.2 标本采取

取早晨第一口气管深部痰。嘱患者除去义齿，用清水(温开白水)漱口数次，以减少口腔正常菌群污染，然后咯出气管深部的痰置入无菌有盖痰盒内，避免混入口腔和鼻咽腔分泌物，在2小时内送检。流感嗜血杆菌易死亡，应保温并在半小时内送检。标本容器外不得被痰液污染，因可造成对标本转送和实验室人员的危害。不合格的标本在说明原因后可以拒收。对少痰或痰液不易咯出者，可用5%～10% NaCl溶液雾化吸入20～30分钟诱导排痰；经口腔咯出或支气管镜吸引的分泌物，通常有上呼吸道正常菌群污染，不适用于嗜肺军团菌的培养，因污染菌大量快速繁殖可抑制军团菌生长[2]。用带刷子的支气管导管(TPC)或带鞘的痰刷子采取支气管分泌物，可有效避免上呼吸道细菌污染。将刷头剪下置入约1ml液体培养基中震荡洗脱分泌物，可用于需氧和厌氧培养，或适用于军团菌或真菌培养；但厌氧培养不能接触空气。

1.3 检验方法

1.3.1痰培养标本的前处理 于痰标本中加入适量无菌生理盐水，剧烈振荡5～10s后，将沉淀于管底的浓痰小片取出，置于另一试管中，同法再处理2次，可洗去痰中的正常菌群。然后向洗涤过的痰液中加入等量pH 7.6的1%胰酶溶液，放置37℃培养90min，使痰液匀质化后备用。

1.3.2直接涂片 取脓和脓血部分薄涂片3～4张，做单染色、革兰染色、抗酸或荧光染色镜检。如发现革兰阳性刀尖形双球菌或同时荚膜染色阳性，对肺炎球菌肺炎的诊断是有力的支持；检验结果作初步报告。

1.3.3普通分离培养 痰标本应在无菌盐水中洗涤后取中间部分接种血琼脂平板和巧克力色平板；流感杆菌分离培养接种兔血平板。根据临床需要选择厌氧培养、嗜肺军团菌培养、真菌培养或分枝杆菌培养[3]。肺脓肿、肺坏疽应同时作需

氧培养和厌氧培养。怀疑真菌感染应作10% KOH直接涂片镜检和真菌培养。怀疑结核菌感染应作直接涂片抗酸或荧光染色镜检和结核菌培养。

1.4 回报时间

直接涂片结果可当时(电话)或当日(书面)报告；普通培养初步报告通常在24小时，分离鉴定报告可于48～72小时作出。

2.结果

正常痰可有上呼吸道菌群，气管吸引物或支气管镜吸引物通常易被口腔菌群污染。双套管经气管的支气管吸引物，正常无细菌生长。呼吸感染患者36例痰标本检出菌株数31株，病原菌分离阳性率86.11%。其中真菌分布最高，占42.96%，其次为革兰氏阳性球菌，占30.28%。

3.讨论

用于肺和支气管感染的病原体分离和鉴定。适宜使用的痰标本应含有较多的中性粒细胞，无或有少量扁平上皮细胞；后者是唾液污染的标志。有较多鳞状上皮的痰不能用作细菌培养，因为被污染的痰培养结果有时不仅不能作出正确评价，甚至还可起误导作用造成严重危害[4]。痰中分离的细菌无论是否为上呼吸道常在菌，实验室都要给予报告。在免疫损害时，上呼吸道常在菌群可造成吸入性感染。

痰普通培养可发现的病原菌主要有：金黄葡萄球菌、流感杆菌、链球菌、肺炎球菌、脑膜炎球菌、副流感杆菌、绿脓杆菌、克雷伯杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、卡他球菌等。而百日咳杆菌、白喉杆菌、嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、脆弱类杆菌以及其他嗜血菌属和奈瑟菌属细菌等，常规培养不能分离出；当临床怀疑时，需要特别申请和专门留取标本，用特殊方法证明。从痰液中检出嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、放线菌及奴卡菌，具有重要临床意义，是确定诊断和治疗的依据。军团菌病的病原体是嗜肺军团菌，该病主要累及肺脏，也可发生全身多器官的严重损害。嗜肺军团菌可引起暴发流行、散在流行和医院内持久流行，从痰液中分离到该菌对军团菌病具有确诊意义。肺结核在结核病中最为多见，由结核分枝杆菌引起。痰液结核菌检查是确诊肺结核最特异的方法，涂片抗酸染色镜检快速简便，培养则敏感性和特异性高。大约1/3痰培养阳性的病人，在初次痰涂片中可找到抗酸杆菌，若连续检查几天，涂片阳性率可至2/3。因此有条件时涂片和培养均应进行。

【参考文献】

[1]侍效春，刘正印，徐英春，等.痰培养丝状真菌阳性的临床意义[J].中华医学杂志，2010，90(4):245-248.

[2]黄萍.简析痰标本在细菌学检验中的运用效果[J].现代养生，2015(4):279-279.

[3]刘奇.痰标本在细菌学检验中的应用分析[J].中国社区医师:医学专业，2012，14(31):234-234.

[4]王成林.痰标本在细菌学检验中的应用[J].现代医药卫生，2013，29(23):3612-3613.