2023年12月18日发(作者:有哲理的文章)
从全脂牛奶中提取奶酪化学实验报告单
一、目的要求
掌握从牛乳中分离酪蛋白的原理,学会操作方法。
二、实验原理
牛乳中含有多种蛋白质,它们有着不同的性质,在脱脂牛乳的蛋白质中酪蛋白约占80%,酪蛋白是一类含磷蛋白质的复杂混合物。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7(酪蛋白的等电点)时,酪蛋白就沉淀析出。再用乙醇和乙醚洗涤沉淀,除去脂类杂质,便可制得纯酪蛋白。
三、实验器材
恒温水浴、普通离心机、精密pH试纸或酸度计、布氏漏斗、抽滤瓶、表面皿、离心管(80mL)、量筒、烧杯(100mL)、玻棒、电子天平。新鲜牛乳。
四、实验试剂
1.95%乙醇石
2.乙醚
3.0.2mol/L醋酸溶液
4.0.2mol/LpH4.7醋酸-醋酸钠缓冲液,配制方法如下:
先分别配制A液和B液:
-A液(0.2mol/l醋酸钠溶液)称取分析纯醋酸钠(NaAc●3H。0)27.22g溶于蒸馏水中,定容至1000mL。
B液(0.2mol/L醋酸溶液)称取分析纯冰醋酸(含量大于99.8%)12.0g溶于蒸馏水中,定容至1000mL。取A液885mL和B液615mL混合,即得pH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液1500mL。
五、操作步骤
1.取30mL鲜牛乳,置100mL烧杯中,加热至40°C。在搅拌下慢慢加入预热至40C、pH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液40mL,用精密pH试纸或酸度计检查pH,再用0.2mol/L醋酸溶液调至pH4.7,静置冷至室温。
2.悬浮液出现大量沉淀后,转移至离心管中,在3500r/min下离心10min,弃去上清液,所得沉淀为酪蛋白的粗制品。
3.用40mL蒸馏水洗涤沉淀,将沉淀搅起,同上离心分离职,弃去上清液。加入30mL95%乙醇,把沉淀充分搅起至成悬浊液,将其转移到布氏漏斗中抽滤,先用30mL95%乙醇洗涤,再用30mL乙醚洗涤,最后抽干制得酪蛋白。
4.将酪蛋白白色粉末摊在表面皿上风干,于电子天平称重,计算得率(牛乳中酪蛋白理论含量为3.5g/100mL)。
本文发布于:2023-12-18 20:04:05,感谢您对本站的认可!
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