2023年12月14日发(作者:自己生日发朋友圈)
细胞获取外源基因的方式
细胞获取外源基因是现代生物技术中常用的一种手段,它是通过将外源基因导入到细胞内,使细胞具备新的功能或性状。细胞获取外源基因的方式主要有转化、转染、电穿孔和基因枪等。
一、转化
转化是指将外源DNA直接导入到细胞内,使其成为细胞的一部分。转化可以分为自然转化和人工转化两种方式。
自然转化是指在自然界中发生的细菌或真核细胞摄取外源DNA的现象。例如,细菌在自然界中通过吸收环境中的裂解细胞产生的DNA片段,实现了基因的水平转移。此外,某些真核细胞如酵母菌也具有自然转化能力。
人工转化是指通过人工手段将外源DNA导入到细胞内。常用的方法有热激转化、电转化和化学转化等。其中,热激转化是将外源DNA与目标细胞暴露于高温条件下,利用细胞壁的热背景反应使DNA进入细胞。电转化是利用电场作用,使外源DNA通过细胞膜进入细胞质。化学转化则是通过化学手段,使外源DNA与细胞发生相互作用,进而实现基因的导入。
二、转染
转染是将外源DNA导入到真核细胞内,使其表达外源基因。转染可以通过多种方式实现,如病毒介导转染、化学转染和脂质体转染等。
病毒介导转染是将外源DNA构建成适当的病毒载体,通过病毒感染真核细胞,将外源DNA导入到细胞内。常用的病毒载体有腺病毒、腺相关病毒和逆转录病毒等。
化学转染是利用某些化学物质,如聚乙烯亚胺(PEI)或磷脂体,与外源DNA形成复合物,然后与细胞膜结合,将外源DNA导入到真核细胞内。
脂质体转染是利用人工合成的脂质体与外源DNA结合形成复合物,然后与细胞膜融合,将外源DNA导入到真核细胞内。
三、电穿孔
电穿孔是利用高强度电场作用,使细胞膜产生短暂的孔隙,从而使外源DNA通过细胞膜进入细胞质。电穿孔可以通过电击、电泳和电转染等方式实现。
电击是将细胞与外源DNA置于导电液体中,同时施加高电压脉冲,使细胞膜产生孔隙,使外源DNA进入细胞。
电泳是将细胞与外源DNA置于导电液体中,然后通过电场作用,使外源DNA沿电场方向移动,进而进入细胞。
电转染是将外源DNA与目标细胞共同置于导电液体中,然后通过电场作用,使外源DNA通过细胞膜进入细胞质。
四、基因枪
基因枪是利用高压气体或炮弹的威力,将外源DNA包裹在微粒金属或微粒化学物质中,并射入细胞内,从而实现基因的导入。
基因枪是一种直接将外源DNA导入到细胞内的方法,可以应用于多种细胞,如植物细胞、动物细胞和真核细胞等。
细胞获取外源基因的方式有转化、转染、电穿孔和基因枪等。这些方法各有特点,适用于不同的细胞和研究目的。随着生物技术的不断发展,相信会有更多新的方法被开发出来,为基因工程和生物医学研究提供更多的可能性。
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