2023年12月9日发(作者:十三岁的际遇)
第
48卷
第
1
期福建林业科技Jour
oh
Fujian
Forestry
Sol
and
TechVcb
48
No.
16
0
6
1
年
3
月dol
:
10.13428/j.
adi.
fjlk. 2061.20
2/Mne5,2021福建省两栖类新记录——粤琴蛙黄雅琼1,李文周1,陈
斌1,蔡孝星1,郑志学1,吕植桐4
(5福建戴云山国家级自然保护区管理局,福建
德化302525;4.中山大学生命科学学院,广东广州510476)摘要:2010年2月,在福建戴云山国家级保护区内采集到4号琴蛙标本,结合形态比较和线粒体CO
/基因的分子系统发
育分析,确定为粤琴蛙(Nidirana gung 广东北部、湖南东南部和江西南部向东扩展至福建中部,为琴蛙属的系统学和谱系地理学研究提供了重要信息。并根据福 建省弹琴蛙和粤琴蛙物种的分布范围,探讨了 5个物种的地理隔离因素。关键词:粤琴蛙;新记录;戴云山自然保护区;福建省中图分类号:S785.5;Q959.5 文献标识码:A 文章编号:1002 -7351(2021)01 -0084 -06Nmiraan gaangOongensis, A New Amphibian Recerb in Fujian ProvinceHUANG YaqUng1 ,LI Wenzhou1, CHEN Bin1 , CAI Xiaoxing1 , ZHENG Zhuue1 ,LU Zhitong5 (1 . Dafya Mountain Nationai Nature Rerve Administration Buonn ,Dhin 302500,Fuian,China; 5. Schooi oO Lfe Sciencee, Sun Yat-n Universif, Guangzaoo 510578, Guangdong, Chinn)Abstroct:Four Nidirana specimens were collected from Daiynnshan National Nature Rerve, Fujian on June 2010. Bad on morphological comparisons and molechlar phylogeny oh mitochondrial CO I gexe,the specimens are idenUfied as Nidirana guanndon- geed,which is the new amphibian record in Fujian Province. This discoverg expands the disWiduPon oh N. guanndonnensi) from the previously known northern Guangdong, southeastern Hunan and southwestern Jiangxi to central Fujian, providing important information oh the phylogexy and biogeography oh Nidirana. In aPdiCon,we discusd the geographio isoUtion factor oh N. guanndonnensi) and N. adenopleura in Fujian,bad on their known bs: Nidirana guangdopgensi) ; /cw record ; Daiynnshan Nature Rerve ; Fujian Province蛙科(Ranibae)琴蛙属(Nidirana)物种广泛分布于东亚和东南亚的亚热带地区,目前该属共有已知物 种10种,且所有已知种在我国均有分布⑴弹琴蛙(N. Sespeua)是琴蛙属中命名较早的物种之一,曾 经是该属中分布范围最广的物种,被广泛记录于我国华东、华南、西南等地[4]近年来,随着分子生物学 oo技术的发展及综合分类法的应用,原先曾被鉴定为弹琴蛙的多个不同种群,先后被发表为新物种[(8-0] 其中,分布于广西大瑶山的种群被认定为瑶琴蛙(N. yaoico),分布于贵州雷公山和梵净山的种群被认定为 o雷山琴蛙(N. 1ehhanensW),分布于湖南湘江流域的种群被认定为湘琴蛙(N. 2iangicU ),分布于浙江北部的 种群被认定为孟闻琴蛙(ni-),分布于广东北部、湖南东南部和江西西南部的种群为粤琴蛙 (N. gungdopged))。分布于福建省的琴蛙种群,此前也均被鉴定为弹琴蛙[48-4]此后,经过形态比较和分子系统发育分 o析研究,福建北部的种群被确认为是真正的弹琴蛙[(,],而福建南部的琴蛙种群目前仍缺乏相关厘定。 26/年4月,在福建戴云山国家级自然保护区采集到4号琴蛙属标本,经过详细的形态比较和分子系统 发育分析鉴定为粤琴蛙,为福建省两栖类新记录。本发现为琴蛙属的系统学和谱系地理学研究提供重要 信息。收稿日期:2020 -05 -08;修回日期:2020 - 00 -15基金项目:生态环境部生物多样性保护专项第一作者简介:黄雅琼(I86—),女,福建戴云山国家级自然保护区管理局工程师,从事野生动植物保护研究。E-mail: 249421074@ qq. com。通信作者:吕植桐(1095—),男,中山大学生命科学学院博士研究生,从事两栖动物系统与进化研究。E-maiUlvzht@fox- mail. com。第1 期黄雅琼,等:福建省两栖类新记录一一粤琴蛙• 85 •1材料与方法/. 7材料4号琴蛙标本是22)7年6月26日夜晚徒手采集自福建戴云山国家级自然保护区九仙山(115°02, 44. 22〃E、25O/39. 96〃N)。标本安乐死后,剪取大腿腹侧肌肉样品保存于97%乙醇中;标本用5%福尔马 林溶液固定定型后转移至79%乙醇溶液中,保存于中山大学生物博物馆(SYS)。22形态鉴定与测量使用游标卡尺对4号标本的形态特征进行测量,精确到4. 7 mm。测量标准及形态特征鉴定均依照 Lye等⑴的定义。2 3 DNA提取、PCR扩增和测序使用Tiangex Gexomlc DNA Kit试剂盒提取样品的基因组DNA(方法参照其说明书、,提取的DNA溶 液保存于-22 C备用。利用PCR扩增线粒体CO I基因片段。扩增引物参照Lye等7〕的dgLCO (5,- GGTCAACAAATCATAAAGAYATYGG-33 和 dgHCO(7, - AAACTTCAGGGTGACCAAARAAYCA - 3'、,反 应条件为97 C预变性4 min,随后以94 C变性44 s、52 C退火44 s49 C复性1 mix进行35个循环,最后 72 C补充延伸12 min。PCR产物进行双向测序,所得序列用于系统发育分析。24序列分析及分子系统树的构建从Ge/Band数据库下载琴蛙属部分物种及其近缘类群拇棘蛙属(Babina Thompson) , 1212物种的相 关CO I基因序列(表2。拇棘蛙属物种作为构建分子系统树的外群7〕。所有序列在MEGA 6. 7软件7〕 中使用Clustal W算法[9]进行序列比对,采用默认参数。比对后的序列在jModeUest v2软件中基于AIT标 准计算最佳核苷酸替代模型;用MEGA 6. 4软件的p-distauce距离模型计算各物种间的遗传距离;使用 RaxmlGU / 3软件70 ,采用最大似然法(maximum liUeliUooP, ML)构建ML系统发育树,并进行1002次 bootstrap重复抽样分析以检验系统发育树各节点置信度。表1所有样品的采集信息、标本凭证和Ge/Band序列号序号物种粤琴蛙(NiCirana guanndonnensis )粤琴蛙(NiCirana guanndonnensi))粤琴蛙(NiCirana ginndongensiq )粤琴蛙(NiCirara guangdongensi))粤琴蛙(NiCirara gua吨"。!^!!)))粤琴蛙(NiCirara 誉111隅40隅671)))粤琴蛙(NiCirara gua吨"。!^!!)))粤琴蛙(NiCirara 誉111隅40隅671)))粤琴蛙(mfana guu)粤琴蛙(mfana guu)弹琴蛙(mfana anenopleura、弹琴蛙(mfana anenopleura、弹琴蛙(mfana anenopleura、弹琴蛙(mfana adenopleura、弹琴蛙(mfana anenopleura、弹琴蛙(mfana adenopleura、弹琴蛙(mfana anenopleura、弹琴蛙(mfana adenopleura、弹琴蛙(mfana anenopleura、采集地福建戴云山国家级自然保护区福建戴云山国家级自然保护区福建戴云山国家级自然保护区福建戴云山国家级自然保护区广东石门台国家级自然保护区标本凭证GenBaud序列号本文本文本文本文1234SYS )064/SYS )0602SYS )060/SYS )0602SYS )05765SYS )05720SYS )06935SYS )025SYS )06196SYS )04071SYS )07359SYS )0592SYS )05940SYS )0412SYS )05901SYS )02725SYS )0709SYS )04451SYS )04025T2433/2000. 43505MN945124678广东南昆山广东天井山MN94523MN945171MN945174MN945176MN945173广东仁化湖南八面山江西九连山91411台湾台中福建延平MN9452061213MF807334MF807390福建武夷山福建邵武14MF807376MF807331/161718福建牙梳山浙江景宁MF807366MN945204MN945913江西宁都江西遂川220江西井冈山MF807366KR037625沙巴琴蛙((Cirara caapaensi))越南老街• 86 •福建林业科技第 48卷续表1序号物种仙琴蛙(idircma daueUina)采集地四川峨眉山标本凭证GenBand序列号212223SYS 年04594SYS 年03741SYS 年07908SYS 年03967SYS 年06310SYS 年057/MF807301海南琴蛙(00 hainasgis)雷山琴蛙5daaga eUOanegW)海南吊罗山贵州雷公山云南江城MF807365MN9452092425林琴蛙((dir ana 10)孟闻琴蛙-(dirana mangven) d南昆山 琴蛙(ldacma nankunegi))MF807356MN945180浙江大盘山广东南昆山2627MF807370NC022870琉球琴蛙(00 okinavana )滇蛙5dnhla pleuaden)湘琴蛙 5dnaoc xiannico )瑶琴蛙 5dnaoc yaoico )日本冲绳云南高黎贡山湖南大围山广西大瑶山-SYS 年03778SYS 年06491SYS 年MF807355MN945139MK895041NC022870NCC228713132琉球拇棘蛙(Babina OoPW d奄美拇棘蛙(Babdia subaspera)日本冲绳--日本鹿儿岛4结果与分析5.5形态学鉴定及比较采集自福建戴云山国家级自然保护区的0号琴蛙标本为3雄I雌(图I、,所有标本的形态量度结果 见表5,其形态符合粤琴蛙的鉴定特征。A1.雄性背面;A2.雄性腹面;B1.雌性背面;B2.雌性腹面图1福建戴云山国家级自然保护区粤琴蛙体型大,雄性头体长53. 5 -53.2 mm,雌性头体长56.6 mm。头长大于头宽;吻端钝圆,突出于下唇, 吻长大于眼径;吻棱明显,颊部向内略微凹陷;鼻孔位于吻、眼之间,略近于吻端;眼间具显著松果体;眼间 第(期黄雅琼,等:福建省两栖类新记录———粤琴蛙• 87 •距小于鼻间距;鼓膜清晰,小于眼径,接近眼;不具颞褶;具犁骨棱和犁骨齿;舌末端具缺刻。雄性具一对咽 下外声囊。前肢较粗壮;指细长,指序为n < 表7福建戴云山国家级自然保护区度量粤琴蛙标本的形态度量标本号I <皿;指末端略膨大成吸盘, 除I指外均具腹侧沟;无蹼, I指外 侧及n、皿、w指内外侧具显著缘膜; SYS 年060I雄性SYS 年060/雄性SYS 年06015雌性SYS 年06010雄性性别头体长/ mm55625 2185653. 1565653. 1关节下瘤显著,各指基部具不明显的 指基下瘤;掌突3个,椭圆形、大而显 著。雄性第I指基部背面具单个婚 头长/mm头宽/mm吻长/mm鼻间距/mm眼间距/ mm20.213.529 220.313.313.27555557585.48. 58垫,无婚刺。4575. 14554. 15.5455454后肢相对粗壮,后肢前伸贴体时 胫跗关节达鼻孔,跟部重叠;趾细长, 趾序为I < v <皿 ;趾末端 略膨大成长而尖的吸盘,各趾均具显 眼径/mm鼓膜径/mm鼓眼距/mm5544545. 14545 59 41.915.35 313.3手长/mm前臂长/mm13.99. 345 910.2著腹侧沟;脚蹼中等大小,蹼式: ii%-7 n i% ~2% 皿I% - 85749 010.445.2959405426.2足长/mm3IV 3%V ~I%V;各趾内外侧均具显 胫长/mm26.626.539 5著缘膜;关节下瘤显著;内突椭圆形,长约为宽的8倍;外?突不显著,小而圆。背部皮肤粗糙;后背部及后肢密被锥状角质刺,头部及体背具稀疏的角质刺;背侧褶发达,自上眼睑后 缘延伸至腹股沟上方,末端断断续续,具稀疏角质刺;雄性体侧粗糙,具小疣及稀疏角质刺,具显著、光滑、略微凸起的肩上腺;雌性体侧较光滑,不具角质刺,不具肩上腺。腹面光滑,腿后部及肛周围具扁平疣。 生活时背面棕红色,角质刺白色;松果体黄色;背部具断续的黄色背中线,自松果体延伸至肛部上方;体侧上部灰褐色,下部浅黄色,肩上腺米黄色。前肢浅褐色,具黑色条纹;后肢深褐色,具黑色横纹。颊部 及颞部棕色,鼓膜浅褐色;虹膜上I/3浅褐色、下2/3红棕色。腹面白色;雄性咽部粉色。2.2分子系统发育关系PCR扩增获得福建戴云山国家级自然保护区琴蛙线粒体CO I基因序列4条,长度各520 bpo用于 系统发育分析的最佳核苷酸替代模型为GTR + G + S最大似然系统发育树(图2)显示,采自福建戴云山 自然保护区的琴蛙标本与广东北部、湖南东南部、江西西南部的粤琴蛙样品聚为支持率较高(99% )的单 系群,而与福建北部、江西中部、浙江南部、台湾的弹琴蛙样品亲缘关系甚远。基于p-dUtauce距离模型估 算的遗传距离(表3)显示,福建戴云山国家级保护区的琴蛙种群内部遗传距离为5. 5% ;与广东北部、湖 南东南部、江西西南部的粤琴蛙种群遗传距离为5 5%,略大于该种群内部的遗传距离(9 8% );与弹琴蛙 的遗传距离为9.2%o分子系统发育分析结果支持福建戴云山国家级自然保护区的琴蛙标本为粤琴蛙, 而非原文献记录的弹琴蛙比5-5 O表3基于线粒体CO I基因的琴蛙属物种间e-nistance遗传距离物种10. 123450 6 8 9 1/ 11 I I I1.粤琴蛙# ( N. guangdongegi) P2 .粤琴蛙(N. guangdongegis)1. 39 46 56 67 06 7539260593.弹琴蛙(N. 2neepleua)4.沙巴琴蛙(N. cUapaegp )5.仙琴蛙(N. 4aueUina)5 28 69. 2-4 84 354-5 35 20.海南琴蛙(N. 4anla^ggp )6.雷山琴蛙(N.仏^^^))609 0-55 -6310. 38 林琴蛙( N ednd9 8951/. 2859 39. 4 11. 0 -• 88 •福建林业科技第 48 卷表3(续)物种114.09 . 49 . 56 76 2287838434.976458 68 462679 . 388 38 3914-111213 149.孟闻琴蛙(N. mangveni)10.南昆山琴蛙(N. nankunensis)83868 414. 7-4 98614.910.512 琉球琴蛙(N. okinavanr、12.滇蛙(N. pleuranen、2 .湘琴蛙(N. xiannica、4.98 414. 710.32 54771---13.211713 211411212.512 810.614.610.014.912614.瑶琴蛙(N. yaoda、&02837435. 48 68 110.09.01172 4 -* :#为福建戴云山国家级自然保护区的粤琴蛙样品。1粤琴蛙(Nidirana guangdongensis)994121IQO|------29 湘琴蛙(Nidirana xiangica)------23 雷山琴蛙(Nidirana leishanensis) 421---30 瑶琴蛙(Nidira/ia yaoica)-P--------20 沙巴琴蛙(Nidirana chapaensis)45俗1--------21 仙琴蛙(Nidirana daunchina)--------22 海南琴蛙(Nidirana hainanensis) --------24 林琴蛙(Nidirana lini) £91630.0579,95100-11弹琴蛙(Nidirana adenopleura)41654.6-----27 琉球琴蛙(Nidirana okinavana) -25 孟闻琴蛙(Nidirana mangveni) -------26 南昆山琴蛙(Nidirana nankunensis) 57100---------------------28 ^^.(Nidirana pleuraden) 32 奄美拇棘蛙(Babina subaspera) —31 琉球拇棘蛙(Babina holsti)分支末端数字为样品序号,节点上的数字为最大似然法自举值图9基于线粒体CO I基因的琴蛙属最大似然系统发育树3讨论粤琴蛙为2222年新发表的两栖动物新物种,在此之前已知的分布范围为广东北部、湖南东南部、江西 南部的南岭山脉中段及罗霄山脉南部⑷。本次在福建中部的戴云山国家级自然保护区报道该物种的新 分布,是福建省两栖类新记录。这一发现,将粤琴蛙的分布区域向东扩展至福建中部(图3)。此前,福建 北部、江西中部的琴蛙种群已被确认为弹琴蛙74]。因此,可以推测从广东北部沿南岭山脉、莲花山脉往 东的闽南、粤东、赣南等地此前记录的弹琴蛙种群也应该是粤琴蛙。在这些地区需要进行全面和详细的调 查,以了解这一新物种确切的分布范围及种群状况。戴云山国家级自然保护区位于福建中部的戴云山脉,其北部为福建最大河流闽江。目前已经报道确 认过的福建北部的弹琴蛙种群74],均分布于闽江以北;而此次报道的粤琴蛙种群分布于闽江以南的戴云 山。这也表明,闽江可能是弹琴蛙和粤琴蛙2个物种在福建省内分布区的分界线。第1 期黄雅琼,等:福建省两栖类新记录一一粤琴蛙• 86 •8120O江O°o24O!叫入WNVi GStaWMiOT®L ;一星形为福建戴云山国家级自然保护区;红色圆形为此前报道的粤琴蛙分布点;黑色圆形为此前报道 的弹琴蛙分布点;右上方小图为福建戴云山国家级自然保护区粤琴蛙生境。图3粤琴蛙和弹琴蛙分布范围及福建戴云山国家级自然保护区粤琴蛙生境* :感谢福建戴云山国家级自然保护区管理局赖钟俊、陈文伟、徐荣地、陈亚婷,中山大学王英永、王健协助完成室内实 验、野外调查工作,并对本论文提供了宝贵建议和帮助。参考文献:[1 ] Lye ZT,Doi KY,Li Y,et al. 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