复合芽孢杆菌对桑叶发酵品质的影响

2023年12月3日发(作者：读书月活动)

-

122DOI院10.15906/11-2975/s.20210325中国饲料2021年第3期复合芽孢杆菌对桑叶发酵品质的影响朱佳文1袁邱时秀1袁李峪鹏2袁曹衍波2袁凌乙丹2袁谢钟炜2袁杨渊1.成都市农林科学院畜牧研究所袁四川成都611130曰2.四川农业大学动物医学院袁四川雅安611130冤雪1袁许祯莹1*收藏的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌按不同比例制成复合菌液协同发酵桑叶饲料袁并检测发酵第7天尧第28天和56天的桑叶品质遥桑叶青贮发酵后袁发现枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌都具有降解纤维尧分解脂肪袁提高粗蛋白含量的能力袁其中袁H2组的粗纤维含量在发酵第56天较对照组下降了12.69%袁只占(12.217依0.039)%袁说明地衣芽孢杆菌分解纤维的能力可能相对较强袁H3组的粗脂肪含量在发酵第56天较对照组下降了20.99%袁只占(5.884依0.003)%袁说明枯草芽孢杆菌分解脂肪的能力可能相对较强袁不同比例的复合芽孢杆菌H1尧H2和H3组的粗蛋白含量在发酵第56天分别增加8.96%尧7.24%和3.72%袁说明两种芽孢杆菌均具有提高青贮桑叶蛋白质含量的能力袁能够提高饲料营养品质的效果遥[中图分类号]S816.6[关键词]桑叶曰青贮曰复合芽孢杆菌曰发酵品质[文献标识码]A[文章编号]1004-3314渊2021冤03-0122-04[摘要]现有的饲料添加剂目录中袁枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌均被允许用于养殖动物遥因此袁本研究选择实验室桑叶在我国资源丰富袁具有非常高的营养价值袁且药食均可袁粗蛋白质含量为20%~30%袁粗脂肪含量为4%~10%袁粗纤维含量为8%~15%袁无氮浸出物含量为30%~35%渊Zhou袁2011冤袁维生素含量高袁氨基酸种类齐全袁还具有许多天然的活性物质袁能够抗应激袁增加免疫力渊李瑞雪袁2009冤袁目前已被广泛应用到动物饲料中渊黄自然袁2006冤遥对桑叶进行青贮发酵可以提高桑叶的保存时间袁通过添加微生物还可以加快消除桑叶中的有毒物质袁提升饲料品质和口感遥研究表明袁混合菌液作用于桑叶发酵能够改善桑叶的饲料功能渊张鸿袁2015冤遥而枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌均被允许用于动物养殖遥因此袁本试验选择实验室已鉴定出的两种芽孢杆菌协同发酵桑叶饲料袁研究其对桑叶营养品质的影响袁为筛选良好的复合菌剂配方提供理论基础遥基金项目院成都市2019年科研创新和集成应用示范渊020207112************冤*通讯作者11.1材料与方法试验材料Subtilis冤和地衣芽孢杆菌渊BacillusLicheniformis冤均来自成都市农林科学院分离鉴定菌株遥桑叶取自成都市农林科学院羊马科研实验基地袁于2019年8月采收遥胰酪胨大豆肉汤培养基渊TSB冤和胰蛋白胨大豆琼脂培养基渊TSA冤均购自青岛高科技工业园海博生物技术有限公司遥青贮饲料发酵袋规格为30cm伊40cm袁22丝遥1.2培养尧活化及扩大培养法遥分别将新鲜的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌于37益用TSB或TSA复苏扩大培养8h袁摇床转速为180r/min袁使芽孢杆菌生长速度达到稳定期袁进行计数遥按两种芽孢杆菌的菌落形成单位渊cfu冤比例渊1:1尧1:4和4:1冤配制成H1尧H2和H3混合制剂遥1.3青贮桑叶试验设计青贮窖采用青贮饲料复合菌液配方的设计采用常规的微生物试验所用枯草芽孢杆菌渊Bacillus发酵袋袁将新鲜桑叶和柄切成3~5cm袁混匀袁随机分为30袋袁每袋1000g遥对照组和处理组渊H12021年第3期中国饲料123组尧H2组和H3组冤每个发酵时间点各3袋袁保证处理组细菌添加量水平为1伊107充分混匀袁人工压实后系上袋口袁cfu/g并用桑胶叶带鲜密重封袁袁置于室温发酵遥在青贮后第7尧28尧56天打开发酵袋袁分析青贮饲料各项指标遥酵1.4时间发点酵袁饲料随机样取出品对处照理组分3袋别和在处青理贮组后各不3同袋发袁每袋称取20g放入250mL锥形瓶袁加入100mL去离子水袁4益浸提24h袁先用双层纱布过滤袁再用滤纸过滤袁测定各个时期的pH遥将剩余的青贮饲料烘干袁称重袁测定各个时期的粗蛋白质尧粗脂肪尧粗纤维尧中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量遥煮法1.5袁测参定照指GB/T标及6434-2006方法粗纤叶饲料中维含量粗测纤定维采的用测消定方法曳袁中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维利用Ankom量测定220采用型索纤氏维提分取析法系统袁参进照行测GB/T定曰6433-2006粗脂肪含叶采饲料中用凯氏粗定氮脂肪的法袁测参定照方GB/T法曳曰6432-1994粗蛋白质含量叶饲料中测定粗蛋白质测定方法曳遥22.1结衣芽孢杆菌果种与分菌的析进活行化复苏对袁试其在验用TSA枯草芽孢杆培养基上菌的生和地长状况良好遥2.2间的延青长贮袁桑样品叶的发酵pH后总的体pH呈下变降化趋势随遥着由青表贮1可时知袁桑叶青贮发酵过程中袁H1尧H2和H3组的pH变化和对照组没有明显的差异性遥表1复合芽孢杆菌对桑叶青贮过程中pH的影响组别对照组2856H1组6.8370依0.053d5.39375.447依依0.017daH20.184a5.0785.070依5.050依0.092daH3组组5.517依依0.025da0.024a4.992依依0.118a5.5470.050a5.133依依0.025a5.1400.086a依0.065a5.060青贮桑芽孢杆叶营养菌成分对桑的叶鉴粗定依0.049a5.0900.073a2.32.3.1维和酸性复合洗涤纤维的影响随纤着维青尧贮中性时间洗涤的纤延长袁添加复合芽孢杆菌的样品粗纤维尧中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量均呈下降趋势遥由表2看出袁桑叶青贮发酵过程中袁添加复合芽孢杆菌H1和H2组在第7天尧28天和56天较对照组的粗纤维含量差异显著渊P臆0.5冤袁在第56天和对天分照别组下的降粗了纤7.53%维未见明和12.69%显差异曰遥H3其组中在袁H2第56组的粗纤维含量在第56天下降幅度最大袁只占渊表12.2172复合依0.039芽孢冤%杆遥菌对桑叶青贮过程中粗纤维尧中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的影响项目时间对照组0dH1组10.726依0.456H2组H3组%粗纤维287d13.674依0.543b12.96714.53412.800依依0.040a56d14.07712.287依12.939依0.174a依0.773c13.326依0.248c0.041b12.64012.217依0.287b0d13.992依依0.156a0.466a22.548依1.587依0.257c0.039b12.603依0.091a中性洗涤纤维287dd27.012依0.226c28.479依0.065a56d18.39020.716依依0.1920.170ba18.97728.050依0.039b18.329依依0.235c18.328依0.154c28.460依0.073a0d0.154b16.976依0.234b22.33918.751依依0.078a0.079a酸性洗涤纤维287dd8.3958.567依依0.391ac0.391a8.769依0.14914.360a依0.0228.28856dd8.288依0.571a7.8777.712依依0.8890.394bca8.306依依0.145bc8.367依0.105ac依0.464ac7.5130.340a8.5187.715依依0.282a0.071a添加复合芽孢杆菌H1和H2组从第7天开始均和对照组的中性洗涤纤维含量差异显著渊P臆组0.5和对冤袁在照第无56明天显分差别异下遥降了0.33%和7.69%曰H3添加复合芽孢杆菌H1组在第28天和对照组的酸性洗涤纤维含量差异显著渊P臆0.5冤袁下降了8.05%袁H2尧H3组在桑叶发酵期间酸性洗涤纤维含量变化和对照组无明显差异遥在第56天时袁添加复合芽孢杆菌H1尧H2和H3的试验组的酸性洗涤纤维含量和对照组并无显著差异遥2.3.2青贮时间复的合延芽孢杆长袁添加菌对复桑合叶芽孢杆粗脂肪的菌的影响样品粗随脂着肪含量均呈下降趋势遥由表3可知袁桑叶青贮发酵过程中袁添加复合芽孢杆菌H1组在第28尧56天和对照组的粗脂肪含量差异显著渊P臆0.5冤袁分别下降了5.77%和5.81%曰H2组在第28天和对照组的粗脂肪含量124中国饲料2021年第3期差异显著渊P臆0.5冤袁下降了6.70%曰H3组在第280.5尧56天和对照组的粗脂肪含量差异显著的粗冤袁脂肪分别下含量降了在15.99第56%天下和20.99%降幅度遥最大其中渊P臆袁袁H3只组占渊5.884依0.003冤表%遥3复合芽孢杆菌对桑叶青贮过程中粗脂肪的影响组别对照组0d7d28d7.44856依0.209d%aH1组6.086依0.210a7.041H25.744依0.4286.0776.113依0.060a6.635依依0.194a依0.080b2.3.3H3组组复合芽孢杆菌5.992依对依0.449a0.613a6.5690.140b7.0155桑叶粗5.915蛋白质依0.335c依依0.3720.004b7.236ab的影响5.884依0.003b着青贮时间的延长袁添加复合芽孢杆菌的样品粗随蛋白质含量均有增加遥由表4可知袁桑叶青贮发酵过程中袁添加复合芽孢杆菌H1组和H2组从第7天开始均和对照组的粗蛋白质含量差异显著渊P臆0.5冤袁在第56天分别增加8.97%和7.24%曰H3组在第7天尧28天和对照组无明显差异袁在第56天和对照组的粗蛋白质含量差异显著渊P臆0.5冤袁增加了3.73%遥因此袁H1尧H2和H3组的粗蛋白质含量在第56天都有所增加袁分别为渊21.861依0.120冤%尧渊21.515依0.059冤%表和4渊20.810复合依芽孢0.140杆冤%菌对遥桑叶青贮过程中粗蛋白质的影响组别对照组0d7d28d56d%dH119.347依19.726H2组组19.33依0.57依0.393c20.6350.100a20.289依a20.06221.861依0.120H3组19.918依0.198b0.131bc20.217依0.100b19.688依0.046依0.028a0.329b21.515依依0.120a20.810依0.1400.059bc3一3.1讨论19.651依类好芽孢杆氧细菌菌袁对兼性桑厌叶氧发袁酵代谢的影响为严格芽孢杆的呼吸或发菌是酵代谢遥芽孢杆菌能够产生淀粉酶尧脂肪酶等多种消化酶袁提高饲料利用率袁而且进入动物体内后能够消耗宿主肠道内的氧气袁抑制病原菌生长袁调节肠道菌群的平衡渊张剑伟袁2019曰徐海燕袁2006冤遥玉米青贮饲料发酵过程中添加枯草芽孢杆菌能够提高粗蛋白质含量渊Shi袁2017冤遥采用枯草芽孢杆菌尧米曲霉尧酿酒酵母尧植物乳杆菌混合发酵桑叶袁能够提高桑叶蛋白质利用率渊任元元袁菌2016能够冤遥使朱佳青贮文桑渊叶2020中的冤研究粗纤发维现和袁粗添加脂肪的枯草芽孢杆含量有所下降袁使发酵品质得到一定程度的改善遥3.2影响添加桑叶复青合贮芽孢杆发酵过程中菌对桑袁叶试发验酵组营养和对成分照组的的pHH1纤维尧变H2化尧粗和没有明显的差异袁说明添加复合芽孢杆菌脂肪和H3组对粗桑蛋白质等叶发酵指pH标的的影响检测不可用大遥于粗评价青贮饲料的营养性质渊冯怀蓉袁2006曰黄荣生袁1984长袁添加冤遥桑复叶合青芽孢杆贮发酵菌过程中H1尧H2袁随和着H3青贮组时的间样的品延粗纤维尧中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量均呈下降趋势袁说明枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌都具有降解纤维的作用遥在青贮发酵的第56天袁H2组的粗纤维含量和中性洗涤纤维含量下降幅度最大袁分别占渊12.217依0.039冤%和渊16.976依0.234冤%遥而H2加比组例为中的1枯草芽孢杆院4袁说明地菌衣和地芽孢杆衣芽孢杆菌分解菌纤量维的的能添力可能更强遥随着青贮时间的延长袁添加复合芽孢杆菌的样品粗脂肪含量均有下降趋势遥说明枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌都具有分解脂肪的作用遥复合芽孢杆菌H3组的粗脂肪含量在第56天下降幅度最大袁只占渊5.884依0.003冤%遥而H3组中的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌量的添加比例为4强院1遥袁随说着明青枯草芽孢杆贮时间的延菌长分袁解脂肪的能添加复合芽孢杆力可能菌更的样品粗蛋白质含量均有增加遥在第56天时袁H1尧H2渊21.861和H3依0.120组粗冤蛋白质%尧渊21.515含量都依0.059有所冤%增和加袁渊20.810分别为0.140冤%袁说明枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌都依具有提高青贮桑叶蛋白质含量的能力遥4结桑论叶青贮发酵过程中袁枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌都具有降解纤维尧分解脂肪尧提高粗蛋白质含量的能力袁其中袁地衣芽孢杆菌分解纤维的能力2021年第3期中国饲料125可能相对较强袁枯草芽孢杆菌分解脂肪的能力可能相对较强袁不同比例的复合芽孢杆菌提高青贮桑叶蛋白质含量的能力相当袁具有提高饲料营养品质的效果遥参考文献[1]任元元袁康建平袁黄静,等.复合菌种混合发酵提高桑蛋白利用率的研究[J].食品与发酵科技袁2016袁1院20~23.[2]朱佳文袁李峪鹏袁许祯莹袁等.添加枯草芽孢杆菌对桑青贮发酵品质的研究[J].中国饲料袁2020袁3院82~86.[3]黄荣生.粗饲料测定技术的最近动向[J].当代畜牧袁1984袁4院39+41.[4]11.冯怀蓉袁龙涛袁崔卫东,等.利用青贮复合菌剂制作青贮饲料的效果测定[J].新疆农业科学袁2006袁1院79~81.[5]李瑞雪袁汪泰初袁贾鸿英.桑活性成分尧生物活性的研究及其开发应用进展[J].北方蚕业袁2009袁30渊2冤院1~3袁8.[6]黄自然.桑树作为动物饲料的应用价值与研究进展[J].蚕业科学袁2006袁32渊3冤院80~88.[7]张鸿袁孙波袁王晴芳,等.一种混合菌液用于桑发酵的初报[J].广东蚕业袁2015袁4院37~37.[8]徐海燕袁曹斌袁张志焱,等.芽孢杆菌发酵代谢产物的研究[J].饲料广角袁2006袁9院22~23.[9]张剑伟袁王恒志袁张新党,等.饲料中添加不同梯度珍珠露水草提取物对罗氏沼虾生长尧蛋白质代谢和肌肉营养成分的影响[J].中国农学通报袁2019袁35渊7冤院158~164.[10]ShiC袁ZhangY袁YinY袁cidandphosphorusdi鄄gestibilityoffermentedcorn-soybeanmealmixedfeedwithandfedtopigs[J].JournalofAnimalScience袁2017袁95渊9冤院3996.[11]ZhouHeDU袁JunFengL袁YanChunZ袁rientcomponentsandutilizationofmulberryasanimalforage[J].ActaPrat鄄aculturaesinica袁2011袁5院192~ofmixtureonthefermentationqualityofmulberryLINYidan2袁XIEZhongwei2袁YANGXue1袁XUZhenying1*Ya爷an袁SichuanProvince611130袁China冤ZHUJiawen1袁QIUShixiu1袁LIYupeng2袁CAOYanbo2袁渊uteofAnimalScience袁ChengduAcademyofAgriculturalandForestrySciences袁Chengdu袁SichuanProvince611130袁China曰eofAnimalMedicine,SichuanAgriculturalUniversity袁[Abstract]Inthecurrentlistoffeedadditives袁Bacillussubtilisaore,inthisstudy袁BacillussubtilisandBacilluslicheniformiswerepreparedindifferentproportionstomakeacompositebacterialsolutiontosynergisticallyfermentmulberryfeed袁andthequalityofmulberryleavesonthe7th袁ermentationofmulberrysilage袁itwasfoundthatBacillussubtilis/Bacilluslicheniformishavetheabilitytodegradefiber袁hem袁H2groupofcrudefibercontentinfermentation56thdaydownby12.69%comparedwithcontrolgroup袁onlyaccountfor渊12.217依0.039冤%%袁thatindicatedtheabilityofBacilluslicheniformisdecomposingfibermayberelativelybetter.H3groupofcrudefatcontentinfermentation56thdaydownby20.99%comparedwithcontrolgroup袁onlyaccountfor渊5.884依0.003冤%袁thatindicatedtdeproteincontentofcompoundbacillusH1袁H2andH3groupsindifferentproportionsincreadby8.96%袁7.24%and3.72%respectivelyonthe56thdayoffermentation袁indicatingthatbothbacillusstrainshadtheabilitytoimprovetheproteincontentofsilagemulberryleavesandcouldimprovetheeffectoffeednutrition.[Keywords]mulberry曰silage曰compositeagentBacillus曰fermentationquality

-