三种中草药抗氧化性研究
第26卷，第6期
2009年11月
光谱实验室
ChineJournalofSpectroscopyLaboratory
V o1.26,NO.6
November,2009
三种中草药抗氧化性研究①
韩明蔺志铎薛福玲吴冬青②
(河西学院化学系西部资源环境化学重点实验室甘肃省张掖市甘州区北环路87号734000)
摘要微波辅助法提取3种中草药中黄酮类化合物，从还原能力，清除羟基自由基和抗油脂氧化方
面，研究其抗氧化活性.结果表明:3种中草药中，总黄酮含量从高到低依次为：老鹤草(132.516mg/g)，孺
莶草(78.4749mg/g)，白花蛇舌草(35.6519mg/g).其提取物具有较好的还原能力，且对羟基自由基均有明
显的清除作用，其清除效果随提取物浓度的增加而增强.三种中草药提取物也具有一定的抗油脂氧化能
力，它们的抗氧化能力存在差异.实验结果为我们更加合理开发利用这些药用植物提供了很好的科学依
据.
关键词三种中草药；总黄酮；抗氧化能力
中图分类号:R282.71~O657.31文献标识码:A文章编号:1004—8138(2009)06—1480—05
l前言
黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界，具有多种生物活性的多酚类化合物n].它
有着广泛的
生理活性，具有抗癌防癌，抗衰老，降血脂，免疫调节，抗菌等生物学功效瞳].在医药生产，功能食品
开发等领域有着广阔的应用前景.目前有关黄酮类化合物的化学成分，药理药效与应用方面的研究
已成为该领域的热点.
白花蛇舌草，孺莶草，老鹤草均为我国传统中药品种，白花蛇舌草具有清热利湿，抗肿瘤，抗菌
消炎等作用].稀莶草，老鹤草均具有祛风湿，利关节等功效.它们在中医中药领域都具有很高的
药用价值.近年来随着对中草药有效成分的不断深入探讨，有必要对我国传统中草药药效功能和在
制药和食品工业的进一步开发利用做出细致研究.本文采用微波辅助法提取3种中草药中黄酮类
化合物，从还原能力，清除羟基自由基和对油脂抗氧化效果等方面对其抗氧化性进行了研究.此结
果有望为中草药黄酮类化合物在制药和食品工业领域的深入开发利用提供实验数据.
2实验部分
2.1材料
白花蛇舌草，孺莶草，老鹤草(购于张掖中药店)，猪油(自制).
2.2主要试剂
芦丁[生化试剂，中国医药(集团)上海化学试剂公司]；邻二氮菲,HO,AI(NO.).,NaNO.,
①甘肃省教育厅科研资助项目(0509—02)；西部资源环境化学重点实验室科研资助项目(xz0603)
②联系人，电话:(0936)8282566；手机:(o)130****0331;E-mail:*******************.gs
作者简介：韩明(1985一)，女，甘肃省金昌市人，研究方向：天然产物活性物质提取与
分析
吴冬青(1961一)?女，沈阳市人，教授，主要从事无机及分析化学教学工作.
收稿日期:2009一o4—23；接受Ft期:2009—05—11
第6期韩明等：三种中草药抗氧化性研究
FeSO,KI，无水KHzPO,KzHPO,K.Fe(CN)e,95乙醇,NaOH，碘，冰乙酸，三氯甲烷，三氯乙酸,
三氯化铁均为国产分析纯.
2.3主要仪器
WFJ21o0型可见分光光度计(尤尼柯仪器有限公司);I.G烧烤型微波炉[乐金电子(天津)电器
有限公司];RE一52型旋转蒸发仪(上海青浦沪西仪器厂);SHB—III循环水式多用真空泵(郑州长城
科工贸有限公司)；国华HH一6数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司).
3实验方法
3.1黄酮类化合物测定_s]
3.1.1黄酮化舍物提取
称取样品粉末4.0000g两份，加入95乙醇40mI，室温浸提2h后，用微波低火提取3min，重
复3次，抽滤，合并滤液，浓缩定容至100mI容量瓶中，得一定浓度的黄酮备用液.
3.1.2校准曲线的绘制
准确称取芦丁对照品30rag，用80乙醇微热溶解后，置于50mI容量瓶中，用80%乙醇定容.
准确吸取2O.00mI，再以乙醇定容于50mI，摇匀，即得芦丁对照液，浓度为0.24mg/mI.
准确吸取芦丁对照液0,0.2,0.4,0.6,1.0,1.2,1.8,2.4,3.0,3.6mL，分别置于10mI容量瓶中，均用80乙醇补至4mI，准确加入50/0NaNOz0.4mL，摇匀，放置6min后，加入10 AI(NO.).0.4mI，摇匀，再放置6min，然后加5NaOH溶液4.0mI，用蒸馏水定容至刻度，放置
15min后，在510nm处测定吸光度(以试剂空白为参比)，以芦丁浓度为横坐标，吸光
度值为纵坐标
作图，绘制校准曲线.绘图，得回归方程：一0.28z+0.0065一0.9998
黄酮含量(mg/g)一(z×)/叫
式中:——稀释倍数；髓，一一样品重量g.
3.2提取物还原能力的测定
移取不同体积的提取液，加入pH6.6的磷酸盐缓冲液和1%K.Fe(cN)溶液各2.5mI 并混
合均匀，混合液50C保温20min后加入 2.5mI10的三氯乙酸溶液，混合后以3000r/rain离心
10min.取上清液0.5mI，加入10.OmI蒸馏水及0.5mI0.1%的FeC1.溶液.测定反应液在700nm
处的吸光度值.吸光度的大小表示还原力的强弱.
3.3羟自由基清除率的测定口
取0.7mI5mmol/I邻二氮菲，加2.OmIpH7.4的磷酸缓冲液，充分摇匀，加0.3mI
7.5mmol/IFeSO，每加一管立即摇匀，加2.0ml0.5H:O，最后用HO补至10mI.在37C 水
浴下反应1l，然后在536nm波长下测定吸光度A(损伤).同上法，加提取液后加H.0.测定
(加药).同上法，不加入HO和提取物，测定AⅢ(未损伤).羟基自由基清除率d计算如下:
一
≠堕×100%n未损伤一n损伤
3.4提取物对油脂抗氧化能力的测定[8
3.4.1校准曲线的绘制
准确移取碘化钾一碘(CI一0.001mol/I)标准溶液0.5,0.6,0.7,0.8,0.9mI置于具塞试管
中，加入2.OmI的氯仿一冰醋酸溶液(V/V=2:3)后，再加入1.0mL1%的可溶性淀粉溶液，最后
光谱实验室第26卷
定容至15mL，摇匀后，取上清液于波长为585nm处，测定其吸光度值(以蒸馏水为参bL).以碘量为
横坐标，吸光度值为纵坐标绘制校准曲线.得方程为:
一0.652z一0.0604r一0.9966
3.4.2油脂过氧化值(POV)的测定
取30mI猪油，加人一定量的样品提取物于100mL烧杯中，充分混匀后，置于(60+1)℃恒温
箱中避光保存，每24h搅拌一次，并交换它们在恒温烘箱中的位置，每隔48h进行取样测定.
油脂测定POV方法：称取油样约0.6g于具塞试管中(同时做平行试验与空白试验，以蒸馏水
为参比)，加人2.0mI的氯仿一冰醋酸溶液，摇匀溶解后加人1.0mL的1O的KI溶液，具塞摇匀
30s，并置于暗处反应3min.取出后加入1.0mI1的可溶性淀粉溶液，以后操作同校准曲线.根据
其吸光度和校准曲线计算碘的生成量，并计算样品的POV.
POV(meq/kg)一.
4结果与讨论
4.1样品中总黄酮含量
准确吸取一定量的样品备用液，根据3.1.2方法测定样品在510nm处吸光度值，代人回归方
程，计算出样品中黄酮的含量，结果见表1.
表1总黄酮含量(mg/g,Jl=5)
由表1可知，三种中草药中老鹤草黄酮含量最高，达到132.516mg/g；白花蛇舌草最低，其黄
酮含量为35.6519mg/g.各样品中黄酮含量测定的RSD值在0.11一0.52%之l'~-J，说明测定黄酮
类化合物的方法具有一定的可靠性.
4.2提取物的还原能力1
