甾体强心苷类药物的鉴别反应机理研究与探讨
【摘要】本文对甾体强心苷类药物的两个主要鉴别反应即冰醋酸-三氯化铁试剂（Keller-Kiliani）反应和3，5-二硝基苯甲酸试剂（Kedde）反应的反应机理进行研究与探讨，以供教师教学及学生学习时参考。
【Abstract】This article rearched the reaction mechanisms of Keller-Kiliani and Kedde, which are the main identification reactions of steroid cardiac glycosides. That would provide provide reference for teachers and students.
【Key words】steroid cardiac glycosides; Keller-Kiliani reaction; Kedde reaction
强心苷是一类选择性地作用于心脏并能加强心肌收缩力的药物，代表药物有地高辛、毒毛花苷K、洋地黄毒苷等。强心苷元是甾体的衍生物，绝大部分天然存在的强心苷在甾体母核C17的侧链上有一个不饱和的五元内酯环，C3位羟基与糖缩合形成苷。作为该类药物的鉴别反应主要是利用α-去氧甲基五碳糖所形成的苷容易发生水解的特性，让水解产生的α-去氧甲基五碳糖与适当的试剂发生显色反应以及利用不饱和五元内酯环上具有的α-活泼氢，与适当试剂
发生显色反应进行真伪鉴别。
本文对冰醋酸-三氯化铁试剂（Keller-Kiliani）反应和3，5-二硝基苯甲酸试剂（Kedde）反应的反应机理进行研究与探讨，以供教师教学及学生学习时参考。
1、冰醋酸-三氯化铁试剂（Keller-Kiliani）反应
鉴别方法：取分子中具有洋地黄毒糖的苷类药物，如洋地黄毒苷约1mg，置试管中，加入含有三氯化铁的冰醋酸（取冰醋酸10ml，加三氯化铁试剂1滴）2ml，溶解后，再沿管壁缓缓加入硫酸2ml，使成两液层，接界处即显棕色，渐变浅绿色、蓝色，最后冰醋酸层呈蓝色。
在上述鉴别试验中，冰醋酸是溶剂，三氧化铁是显色剂，硫酸是脱水剂。根据实验所用试剂及对实验结果的分析，我们认为该鉴别反应的反应机理可能是：洋地黄毒苷在冰醋酸中发生水解，产生洋地黄毒糖，洋地黄毒糖在H2SO4作用下发生两次脱水作用，生成2，4-二烯-5-羟基己醛，分子中具有烯醇式结构，故可与三氯化铁发生显色反应。随着脱水反应的进行，生成的产物逐渐增多，颜色略有改变，最终发生扩散，进入冰醋酸层，使整个冰醋酸层呈蓝色。
2、3，5-二硝基苯甲酸试剂（Kedde）反应
此为甾体强心苷中不饱和五元内酯环的反应，其鉴别方法为：取乙酰毛花苷约2mg，置试管中，加入乙醇2ml溶解后，再加入3，5-二硝基苯甲酸试液与乙醇制氢氧化钾试液各10滴，摇匀后，溶液即显红紫色。
该反应需要在碱性条件下进行，由于乙酰毛花苷不溶于水，故用乙醇制氢氧化钾代替氢氧化钾水溶液。在强碱性条件下，不饱和五元内酯环上的α-活泼氢容易发生解离，形成碳负离子。该碳负离子与3，5-二硝基苯甲酸可能会发生两种反应。一种反应是与苯环中4号碳原子上的氢发生亲核取代反应，但生成的产物中只含有苯环，共轭体系并没有增长，因而不可能显色。另一种反应是与硝基发生缩合反应，可使共轭体系增长。根据此鉴别反应最终出现的颜色，我们认为该反应的反应机理是：不饱和五元内酯环在碱性条件下形成的碳负离子与硝基中的氮氧双键发生缩合反应，生成含有5个共轭双键的缩合物，因此可显红紫色。在石东方主编的药物分析教材中说是形成了有色配合物，我们认为该提法是很不准确的。以上说的是一个硝基参与缩合反应，当然也有可能是两个硝基同时参与缩合反应。究竟是一个硝基还是两个硝基参与缩合反应，还有待于对红紫色化合物进行光谱分析。
*作者简介：王丽丽，女，1982年2月出生，吉林省松原市人，硕士研究生，助教，研究方向：天然药物有效成分。
