生理实验－-小肠平滑肌生理特性的观察与分析
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消化道平滑肌生理特性及药物影响
一、实验目的：
1、学习哺乳动物离体器官的灌流实验法。
2、观察消化道平滑肌自律性运动及药物温度的影响。
二、实验原理ﻫ消 化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样,也具有兴奋性、传导性和收缩性,有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩， 对
化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。小肠离体后,置于适宜的溶液中，观察其收缩活动及环境变化的影响,观察分析上述生理特性。
三、实验材料——ﻫ1、实验动物：家兔ﻫ2、 器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为２５g以下)、ＢＬ－４１0生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺 丝夹、三维调节器、台氏液、0.0１%去甲肾上腺素、０．01％乙酰胆碱、1ｍoｌ/L NａOH溶液、lmol/L ＨCl溶液、2％CaCl2溶液。ﻫ四、实验方法和步骤
1、标本制备流程:ﻫ①击昏家兔：
用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。ﻫ②剖开腹腔快速取出肠管:
立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,快速取长20~30ｃm的肠管,先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗,把肠内容物基本洗净。ﻫ③制作离体肠标本:ﻫ将肠管分成数段,每段长2-3cm,两端各系一条线,保存于供氧的38℃左右的台氏液中ﻫ2、仪器安装与调试实验安装(如图)：
恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在３8℃。将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接,将肠段一端系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控制通气量,使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。
仪 器调试：BＬ-410系统的使用,选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。相关参数设置的参考值：时间常数ｔ→ＤC，高频滤波 F→30Hz，显速→4.00ｓ／div,增益→1０0ｇ。用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮,调节参数至波形幅度、密度适当,待收缩曲线稳定后,单 击记录按钮。ﻫ五、实验结果:
实验项目 收缩幅度 收缩节律 |
室温台氏液→3７度 1/１0万Ach2滴 ↑ ↓ 1/万 Aｄr2滴 ↑ ↓ 1／万 Atr２滴 ↑ ↓ 2min后加Aｃh2滴 ↑ ↓ 换25度台氏液 继之→42度 42度→ |
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六、观察项目现象及解释
1．待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。ﻫ2．乙酰胆碱的作用 用滴管吸入0.０1％乙酰胆碱向灌流浴槽内滴１~２滴。观察到明显效应后,立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次,以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使之达到无效浓度,待小肠运动恢复后进行下一项。ﻫ3.肾上腺素的作用 按上述方法将0．０１%肾上腺素加入浴槽内１~2滴,观察小肠运动的反应。当效果明显后，立即更换台氏液。ﻫ4.氯化钙的作用 加２%CaC１2溶液2~3滴入灌流浴槽内,观察其反应，效果明显后迅速冲洗。ﻫ5．盐酸的作用 加1~２滴1mｏｌ/L ＨCl溶液入浴槽内，观察其反应。
6.氢氧化钠的作用 在(5)基础上加等容量的1mol/Ｌ NaOH溶液入浴槽内,观察其反应。按上述方法更换台氏液，反复冲洗。ﻫ７.温度的影响 将浴槽内台氏液放出,注入25℃台氏液，观察平滑肌收缩有何改变,当效应明显后再换入38℃台氏液，持续一段时间后,再换入42℃台氏液,观察收缩活动的变化(亦可根据室温的具体情况选做其中的一项）。ﻫ七、注意事项——ﻫ1. 实验过程中必须保证标本的供氧(通气)及浴槽内台氏液的恒温（3８℃),以维持标本活性。ﻫ2. 灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。ﻫ3. 放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。
