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*通讯作者
葛根、桑叶、山药3种天然产物对α -淀粉酶抑制作用研究
刘文虎，王斯慧，曾凡骏*
四川大学轻纺与食品学院（成都 610065）
摘要研究了葛根、桑叶、山药3种天然产物的提取溶液对α-淀粉酶活性的抑制作用。结果显示除了山药对
α-淀粉酶无明显抑制作用，葛根、桑叶对α-淀粉酶均有显著抑制作用，对α-淀粉酶半抑制浓度(IC 50)分别为56.72，46.57 mg/mL，抑制效果可分别达到现有α-淀粉酶抑制剂拜糖平的1.12，1.36倍。关键词
天然产物；α-淀粉酶；抑制剂
α -amyla Inhibitory Activities of Radix Puerariae, Folium Mori and Yam
Liu Wen-hu, Wang Si-hui, Zeng Fan-jun *
Department of Food Engineering, Sichuan University (Chengdu 610065)
Abstract The α-amyla inhibitory activities of the extracts from Radix Puerariae, Folium Mori and yam was studied. The results showed that, except the extracts of yam the rest of two natural products have obvious effect on inhibiting α-amyla, and the 50% inhibiting concentration (IC 50, mg/mL) is 56.72, 46.57 mg/mL, respectively, which is 1.12, 1.36 times stronger than that of acarbo.
Keywords natural products; α-amyla; inhibitor
糖尿病高脂血症的发病率呈逐年上升趋势并严重危害人类健康，现代中医药试验研究表明，众多天然产物具有降血糖的功效。葛根主要功效成分是黄酮类物质，葛根黄酮具有清热解毒、降血糖、消除氧自由基、抗氧化等功效[1]。桑叶可以抑制血糖上升，防治和治疗糖尿病，桑叶中含有黄酮及其苷、生物碱、多糖、挥发油、各种氨基酸、微量元素等，成分比较复杂，黄酮类成分是主要有效成分之一[2]。山药多糖是目前公认的山药主要活性成分，具有免疫调节、抗氧化、延缓衰老、降血糖、降血脂等多种药理作用[3]。α-淀粉酶抑制剂是一种新型的有效药物，属于一种糖苷水解酶抑制剂，能够有效抑制肠道内唾液及胰淀粉酶的活性，从而降低血糖和血脂含量水平。对α-淀粉酶抑制剂的机理进行研
究，研究了葛根、桑叶、山药等3种天然产物对α-淀粉酶体外抑制作用。
1 仪器与材料
1.1 仪器与设备
AR2130型电子天平：Ohaus Corp. Pine Brook，NJ，USA.；UV-1100型紫外-可见光分光光度计：上海美谱达仪器有限公司；DSY-1-4孔型电热恒温水浴锅：北京爱琦霞商贸中心。1.2 材料与试剂
α-淀粉酶酶液(将α-淀粉酶溶于0.1 mol/L的磷酸钾缓冲液pH 6.8，配成0.1 U/mL溶液备用，注意避光冷藏存放)；拜糖平(每片含阿卡波糖50 mg，德国拜耳公司)；1%淀粉溶液(将1 g可溶性淀粉溶于磷酸钾缓冲液pH 6.8，煮沸，冷却后定容至100 mL，冷却备用，注
意避光冷藏存放)；DNS溶液。 1.3 生药提取溶液制备
葛根、桑叶提取溶液溶液：称取5 g的葛根粉末、桑叶粉末在温度70 ℃，75%乙醇溶剂、料液比1︰10的条件下浸提20 min，提取两次，每次间隔20 min，冷却至室温，定容到一定体积备用。
山药提取溶液溶液：称取5 g的山药粉末，加1︰20料液比的重蒸水，在温度80 ℃下提取30 min，提取3次，每次间隔20 min，冷却至室温，定容到一定体积备用。
2 试验方法
2.1 α-淀粉酶活力测定
试验原理：α-淀粉酶能水解淀粉为还原糖，3,5-二硝基水杨酸与还原糖反应显示出红棕色，540 nm处比色，定量测定α-淀粉酶的活性。参照DNS(3,5-二硝基水杨酸)比色法[4]，反应体系：将0.3 mL α-淀粉酶在37 ℃水浴中保温5 min后，加入淀粉溶液(1%，0.4 mL)以启动反应。体系于37 ℃反应5 min后，加入0.2 mL DNS，于沸水浴中反应5 min，取出冷却定容至25 mL，最后于540 nm处测定吸光度。酶抑制试验重复3次，每次3个复管。
2.2 提取溶液对α-淀粉酶的抑制作用测定
参照2.1方法，在样品管中加入不同浓度的抑制剂溶液1 mL，设置空白组、空白对照组和背景对照组，反应体系如表1所示。以阿卡波糖为阳性对照。反应终止后用蒸馏水稀释定容到25 mL，于波长540 nm处测其吸光度[5]。
研究探讨
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表1 α-淀粉酶活性抑制体系表/mL
酶液抑制剂蒸馏水淀粉溶液DNS 空白管0.3—10.40.5空白对照管—— 1.30.40.5抑制管0.31—0.40.5背景对照管
—
1
0.3
0.4
0.5
抑制剂对α-淀粉酶的抑制率：
抑制率＝（1 —A 00 / A 01）× 100% （1）A 00=A 3—A 4，A 01=A 1—A 2 （2）式中A 1，A 2，A 3，A 4分别为540 nm处空白管、空白对照管、抑制剂管和背景对
照管的吸光值。
3 结果与分析
3.1 生药提取溶液对α-淀粉酶活性抑制曲线
通过测定不同浓度(10～100 mg/mL)的抑制剂(生药提取溶液)对α-淀粉酶活性的抑制率，以抑制剂浓度(mg/mL)为横坐标，抑制率(%)为纵坐标，同时以α-淀粉酶抑制剂拜糖平做对比，作抑制率曲线，如图1～图3所示。
3.1.1 葛根提取溶液对α-淀粉酶活性抑制曲线
由图1可以看出，在浓度为0～80 mg/mL区间内，葛根提取溶液浓度对α-淀粉酶活性的抑制呈较明显的剂量依赖关系，随剂量的加大，抑制率增大。当葛根提取溶液浓度大于80 mg/mL以后，呈下降趋势，当质量浓度超过90 mg/mL后抑制效果低于拜糖平。由此可以得出葛根对α-淀粉酶活性有很明显的抑制作用。当葛根提取溶液质量浓度达到80 mg/mL时，对α-淀粉酶
的抑制率可以达到94.6%。
图1 葛根提取溶液对α-淀粉酶的抑制曲线3.1.2 桑叶提取溶液对α
-淀粉酶活性抑制曲线
图2 桑叶提取溶液对α-淀粉酶的抑制曲线
由图2可以看出，在质量浓度为0～60mg/mL区间内，桑叶提取溶液对α-淀粉酶活性的抑制呈剂量依赖关系，随剂量的加大，抑制率增大，抑制效果高于拜糖平。在浓度为60～100 mg/mL区间内，桑叶提取
溶液对α-淀粉酶活性的抑制作用随剂量的加大，抑制率减小，最后降至低于拜糖平。当桑叶提取溶液浓度达到60 mg/mL时，对α-淀粉酶的抑制率可以达到76.11%。
3.1.3 山药提取溶液溶液对α-淀粉酶活性抑制曲线
由图3可以看出，在质量浓度为0～90 mg/mL区间内，山药提取溶液对α-淀粉酶活性的抑制基本呈剂量依赖关系，随剂量的加大，抑制率增大。在浓度为90～100 mg/mL区间内，山药提取溶液对α-淀粉酶活性的抑制作用随剂量的加大，抑制率减小。当提取溶液浓度达到90 mg/mL时，对α-淀粉酶的抑制率仅达到30.37%，可见山药对α-淀粉酶活性的抑制作用
不强。
图3 山药提取溶液对α-淀粉酶的抑制曲线3.2 提取溶液对α-淀粉酶半抑制浓度的比较分析
通过测定葛根、桑叶、山药提取溶液对α-淀粉酶半抑制浓度IC 50，与临床上已经应用的药物拜糖平对α-淀粉酶半抑制浓度作比较，IC 50越小，表明抑制效果越好；IC 50越大，表明抑制效果越差。
由α-淀粉酶活性抑制曲线得出拜糖平和具有明显抑制作用天然产物对α-淀粉酶半抑制浓度IC 50如表2所示。
表2 原料对α-淀粉酶的半抑制浓度(IC 50)
拜糖平葛根提取溶液
桑叶提取溶液
IC 50/(mg・mL -1)
63.26
56.72
46.57
从表2中可以看出，葛根、桑叶提取溶液的半抑制浓度均低于拜糖平，故这2种天然产物提取溶液的抑制作用优于拜糖平。对α-淀粉酶抑制作用从大到小顺序为：桑叶提取溶液＞葛根提取溶液＞拜糖平溶液。可见葛根、桑叶提取溶液对α-淀粉酶有较强的抑制作用，分别是拜糖平的1.12，1.36倍。
山药提取溶液最高抑制率均低于50%，对α-淀粉酶没有明显的抑制作用。
4 结论
葛根、桑叶两种天然产物提取溶液对α-淀粉酶均表现出明显的抑制作用，其中桑叶提取溶液抑制作用最强，而山药提取溶液对α-淀粉酶无明显抑制作用。葛根、桑叶提取溶液对α-淀粉酶的半抑制浓度(IC 50)分别是56.72，46.57 mg/mL，抑制效果可达到拜糖平的1.12，1.36倍。降糖药物中的西药虽然效果显著，但
研究探讨
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硝普钠处理对芹菜生理活性的影响
周春丽*，苏虎，李玉萍，吕玲琴，钟贤武，范鸿冰
江西科技师范学院生命科学学院（南昌 330013）
摘要以硝普钠（SNP）为一氧化氮（NO）供体，研究了不同浓度NO对芹菜保鲜效果的影响，结果表明：
SNP处理的最佳浓度为0.05 mmol/L，最佳条件为密闭浸泡2 h。0.05 mmol/L SNP溶液处理显著提高了芹菜保存的品质并延缓了VC和可溶性蛋白含量的下降，芹菜的叶绿素降解速率明显降低。说明适宜浓度外源NO处理能够降低延缓芹菜氧化衰老进程，对采后芹菜有显著的保鲜效果。关键词
一氧化碳；芹菜；叶绿素；总蛋白含量；维生素C
Effects of Sodium Nitroprusside on Postharvest Physiology and Quality of
Celery
Zhou Chun-Li *, Su Hu, Li Yu-ping, Lü Ling-qin, Zhong Xian-wu, Fan Hong-bing School of Life Science, Jiangxi Science & Technology Normal University (Nanchang 330013)
Abstract Effects of exogenous sodium nitroprusside(SNP), a nitric oxide (NO) donor with 3 solutions (0.01 mmol/L, 0.05 mmol/L, 0.10 mmol/L) on the physiology and quality of postharvest celery were investigated. The results showed that NO resulted from 0.05 mmol/LSNP aqueous solution and 2 h treating on celery without air delayed physiology factors (chlorophyll, total protein ,vitamin C) decomposition rate and prolonged storage life.Keywords nitric oxide(NO); celery; chlorophyll; total protein ；vitamin C
芹菜（Apium graveolens ）属伞形科植物，是高纤维食物，它经肠内消化作用产生一种木质素或肠内脂的物质，这类物质是一种抗氧化剂，常吃芹菜，尤其是吃芹菜叶，对预防高血压、动脉硬化等都非常有效。人们在消费的时候，都喜欢食用新鲜翠绿的芹菜，可现代生活节奏快，时间紧，通常购买多量芹菜放置冰箱备用，时间稍一长，会发现芹菜会变黄，水分减少。基于此现象，尝试用一氧化氮（Nitric Oxide, NO）处理芹菜，探索其保鲜效果。一氧化氮（Nitric Oxide,NO）用于气调保鲜是近年来农产品贮藏保鲜的一个研究热点，NO作为一种小分子信号物质，在植物体内，参与植物许多生长发育过程的调控[1]，科研人员发现低浓度NO短时熏蒸能够增强果蔬，如花椰菜、白菜、草莓等的保鲜效果，延长其保存期[2-3]。Leshem等使用NO处理豌豆叶片时，发现适宜浓度的NO有具有延缓植物衰老进程的作用[4]。也有报道认为，外源NO气体处理能够提高草莓[5]、番茄[6]的采后品质。由此可见，NO对不同的园艺产品保鲜效果不同，其感应浓度也不同，Bowyer使用NO气体熏蒸和SNP溶液浸泡延
长了康乃馨的采后货架期[7]，并认为SNP溶液处理更加有效且避免NO气体熏蒸的无氧条件的限制，更适用于生产。本试验采用不同浓度的SNP 溶液处理芹菜，分析在不同的SNP处理后，其总蛋白含量、叶绿素含量以及维生素C含量等的变化，从而对芹菜的保鲜效果进行评价。
1 材料与方法
1.1 试材
供试材料为芹菜，购于江西省南昌市昌北区下罗菜市场。挑选成熟度相同、无病虫害的芹菜用自来水清洗干净，并用剪刀剪除根部，以保持完整植株为准。处理试剂为蒸馏水、0.01 mmol/L，0.05 mmol/L和
均有很大副作用，相反，中医治疗糖尿病采用天然产物入药，副作用低于西药，能很好预防并发症。本研究评价了葛根、桑叶对α-淀粉酶活性的抑制作用，为其进一步开发降糖药物提供了参考。
参考文献：
[1] 崔苏镇，彭学莲. 葛根的药理作用研究概况[J]. 时珍国药研究, 1998, 9(3): 279-280.
[2] 张强，孙长波.桑叶中多糖和总黄酮的含量测定[J]. 吉林农
业, 2011(3): 73-74.
[3] 袁书林. 山药的化学成分和生物活性作用研究进展[J]. 食品研究与开发, 2008, 29(3): 176-179.
[4] 张亚军，李江英. 天然药物及其有效成分降血糖作用机理的研究进展[J]. 西北药学杂志, 2003, 18(2): 90-92.[5] 张月红，郑子新. 苦荞提取物对餐后血糖及α-淀粉酶活性的影响[J]. 中国临床康复, 2006, 10(15): 111-113.
研究探讨
