痛风药食两用方治疗寒热错杂型大鼠急性痛风性关节炎的药效学研究
作者：薛崇祥 何世勇 肖楠 张琳 田源 郁万刚
来源：《世界中医药》2021年第04期
摘要 目的：探討痛风药食两用方对于寒热错杂型大鼠痛风性关节炎的治疗作用。方法：以随机抽签法将32只SD大鼠分为模型组、阳性药组、寒热错杂组和空白组。模型组、阳性药组、寒热错杂组均置于低温与高温交替环境适应性培养。7 d后，向大鼠右内踝胫跗关节腔内注射尿酸钠溶液，再次置于低温与高温交替环境7 d，建立寒热错杂型痛风性关节炎模型。造模成功后，阳性药组给予秋水仙碱治疗，寒热错杂组给予痛风药食两用方治疗。观察比较4组大鼠腿围增长百分率，以及血清中UA、α-NAG、β-gal、TNF-α和SOD的指标变化。结果：与模型组比较，大鼠服用痛风药食两用方后可显著降低踝关节周长增加百分率，降低UA、αNAG、β-gal、TNF-α的含量，增加SOD的含量（均P<0.05）。结论：痛风药食两用方能够改善关节肿胀症状，具有抗炎、抗氧化等的疗效，对寒热错杂型大鼠急性痛风性关节炎有明显的预防和治疗作用。
关键词 痛风药食两用方;大鼠模型;寒热错杂证;急性痛风性关节炎;炎症介质;抗炎;抗氧化;实验研究;药效学研究
Pharmacodynamic Rearch on Curative Effect of Gout Edible Chine Herbal Prescription on Gouty Arthritis with Cold-Heat Complicated Syndrome in Rats
XUE Chongxiang1，2，HE Shiyong1，XIAO Nan1，ZHANG Lin1，TIAN Yuan3，YU Wangang3
（1 Academy of Integrative Medicine，Dalian Medical University，Dalian 116044，China; 2 China-Japan Friendship Clinical Medical College，Beijing University of Chine Medicine，Beijing 100029，China; 3 Dalian Zhong-Ke Academy of Traditional Chine Medicine，Dalian 116021，China）
Abstract Objective：To explore the curative effect of gout edible Chine herbal Prescription on the treatment of gouty arthritis with cold-heat complicated syndrome in rats.Methods：By the method of random sampling method，a total of 32 SD rats were di
vided into 4 groups，including a model group，a positive drug group，a cold-heat complicated syndrome group and a blank group.The model group，the positive drug group，and the cold-heat complicated syndrome group were all placed in a low temperature and high temperature alternate environment for adaptive culture.7 days later，sodium urate solution was injected into the right ankle and tarsal joint of rats.After kept in the alternate environment of low temperature and high temperature for another 7 days，a model of gouty arthritis with cold-heat complicated syndrome was established.After successful modeling，the positive drug group was treated with colchicine，and the cold-heat complicated syndrome group was treated with gout and food.The percentage increa of the leg circumference of the 4 groups of rats，as well as the changes in rum UA，α-NAG，β-gal，TNF-α and SOD indicators were obrved and compared.Results：Compared with the model group，rats after taking gout medicinal and food dual-purpo prescription can significantly reduce the percentage increa of ankle joint circumference，reduce the content of UA，αNAG，β-gal，and TNF-α，and increa the content of SOD（all P<0.05）.Conclusion：Gout edible Chines
e herbal Prescription can improve the symptoms of joint swelling，has anti-inflammatory and antioxidant effects，and has obvious preventive and therapeutic effects on acute gouty arthritis in rats with mixed cold and heat.
Keywords Gout edible Chine herbal Prescription; Rat models; Cold-heat complicated syndrome; Inflammatory Factors; Anti-inflammation; Anti-oxidation; Gouty arthritis; Experimental study; Pharmacodynamics
中图分类号：R285.5文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.04.014
痛风是一种以血尿酸浓度升高，尿酸盐结晶沉积在关节滑膜、滑囊、软骨及其他组织中引起的长期反复发作性关节炎性疾病，以特征性、急性、痛风石形成、以及肾功能不全为主要临床特征，表现为关节红肿热痛，难以忍受，严重影响日常生活[1]。由于饮食和生活方式改变，痛风发病率逐年升高，逐步趋于年轻化，如今已成为我国第二大代谢类疾病[2-3]。血尿酸代谢长期控制不良、水平增高则会导致多脏器、多系统的器质性损害。对于长期肾功能损伤患者，尿酸排泄障碍，加上进食高嘌呤食物、嗜酒可导致其急性发作。然而目前治疗的药物不良反应较多，药物依从性较差，甚至危及患者生命，治疗难度较大[4]。
痛风的西医治疗主要选用非甾体抗炎药（NSAID）、秋水仙碱、苯溴马隆等药物，长期使用会对皮肤黏膜、血液系统和消化系统造成损害性不良反应[5-6]。根据临床研究、临床经验和中医理论，中医药在治疗痛风性关节炎上比西药有更好的疗效，且不良反应少，越来越受到各医家的青睐[7-10]。在中医临床上，痛风性关节炎属“痹证”“历节”“白虎历节”等范畴，痛风性关节炎的中医证候表现复杂多样，在痛风性关节炎的中、晚期表现出的证候主要为寒热错杂证[11]。从古至今，临床各医家多青睐桂枝芍药知母汤治疗痛风，并取得了一定的疗效，但治疗方剂相对单一，缺乏进一步的实验和临床研究，且作为中药，也不宜长期服用。
痛风药食两用方结合国家名老中医李延教授多年的临床经验，在本课题组前期相关研究基础上，针对寒热错杂型痛风性关节炎的病因病机而拟定。中医药食疗养生对于治疗慢性疾病，显著发挥了其简便、适口、价廉、安全有效等优势和特色，痛风药食两用方可以选择代茶饮剂型，为痛风性关节炎的预防保健和慢性期治疗也提供了新的解决方法。本研究主要为了验证痛风药食两用方对寒热错杂型急性痛风性关节炎大鼠模型关节肿胀的改善情况，以及对血清中的尿酸（UA）、人α-N已酰胺基葡糖苷酶（α-NAG）、β-半乳糖苷酶（β-gal）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量的影响，为其今
后急性痛风性关节炎的临床防治提供客观的理论依据和实验数据支撑，指导临床用药。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 本实验纳入32只健康SPF级雄性SD大鼠，均购买于大连医科大学模式动物研究所，大鼠体质量为180～220 g，质量合格证号为SCXK（辽）2013-0003，喂养于大连医科大学模式动物研究所动物房，每天光照与黑夜各12 h交替，温度控制在20～22 ℃，湿度为35%～45%，让其自由饮食饮水，给予实验鼠常规适应性喂养1周后进行实验。本研究所有动物实验获得大连医科大学动物饲养和使用伦理委员会批准（伦理审批号：00122326）。
1.1.2 药物 痛风药食两用方由以下中药组成：玫瑰花（Rosa rugosa Thumb）、当归（Angelica sinensis（Oliv.）Diels）、茯苓（Poria cocos（Schw.）Wolf）、薏苡仁（Coix lacryma-jobi L.var.mayuen（Roman）Stapf）、葛根（Pueraria lobata（Willd.）Ohwi）、甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch）、赤小豆（Vigna umbellata Ohwi et Ohashi）
、山药（Dioscorea opposita Thunb.）。所有饮片均购买于大连市益春堂中药房（批号：170609、170508、170506、170405、170903、170809、170904、170605），并经大连医科大学中药方剂学主任张琳教授鉴定为正品（符合《中华人民共和国药典》一部2015版相关规定）;秋水仙碱（北京盛世康普化工技术研究所，批号：Q-006-150731）。
1.1.3 试剂与仪器 生理盐水（山东齐都药业有限公司，批号：Q/12HB 4218-2009）;尿酸钠晶体（上海晶都生物技术有限公司，批号：BCBS7438）;水合氯醛（天津科密欧化学试剂有限公司，批号：S17090716-1）;UA试剂盒（批号：180327R0944）、α-NAG试剂盒（批号：180327R0945）、β-gal试剂盒（批号：180327R0941）、TNF-α试剂盒（批号：180327R0040）、SOD試剂盒（批号：180327R0008）均购买于南京森贝伽生物技术有限公司。冷凝回流装置、电热套（上海科恒实业发展有限公司，型号：DZTW 1000），电子天平[奥豪斯仪器（上海）有限公司，型号：PX423ZH]，旋转蒸发仪（Heidolph，德国，型号：Hei-VAP Advantage），低温超速离心机[赛默飞世尔科技（中国）有限公司，型号：Optima L-100XP]。
1.2 方法
1.2.1 分组与模型制备
1.2.1.1 中药方的制备 痛风药食两用方按玫瑰花20 g、当归20 g、茯苓10 g、薏苡仁10 g、葛根10 g、甘草10 g、赤小豆10 g、山药10 g的比例混合置于圆底烧瓶中，第1次加7倍药品质量的双蒸水，待武火煮沸后文火加热回流煎煮2 h，收集药汁。再次加入5倍量的双蒸水冷凝回流，共煎煮2次，合并2次提取液，置于旋转蒸发仪将提取液浓缩至45 mL，痛风药食两用方生药浓度为2.2 g/mL。
Keywords Gout edible Chine herbal Prescription; Rat models; Cold-heat complicated syndrome; Inflammatory Factors; Anti-inflammation; Anti-oxidation; Gouty arthritis; Experimental study; Pharmacodynamics
