病原微生物学研究进展

病原微生物学研究进展

课程编号:010075开课单位:基础医学院病原生

物学系

病原微生物学研究进展

(原分子病毒学)

Rearch Advances in Medical microbiology

学 分:1.5学 时:32

考核方式:随堂开卷考试 教学方式:以讲授为主

主讲教师:庄辉、刘树林等课程类型:E

授课对象:医学各学科硕士研究生及 8年制学生

开设目的:虽然人类在控制传染病方面已取得了重大进展,但近年来一些传

统的传染病如病毒性

肝炎仍是威胁我国人民身体健康的重大公共卫生问题。另外新出现的传染病

如艾滋

病、SARS、禽流感以及一些死灰复燃的传染病如肺结核等,对传染病的控制

提出了

严峻的挑战。

本课程拟从分子水平介绍这些重大及新出现的传染病的病原学研究进展,为

这

些传染病的病原学诊断、疫苗研制及抗微生物治疗等提供理论指导。

教学要求:要求学生对近年来发生的重大传染病的病原学的研究进展有初步

了解,在分子水平上掌

握重要病原体的生物学性状、致病机理、病原学检测及诊断方法以及预防和

治疗措施。

预修知识:系统地修过医学基础或临床课,特别是医学微生物学、免疫学、生

物化学、病理学、

生理学及传染病学等。

主要内容

课次 内 容 学时 授课教师 备注

分子病毒学研究进展,戊型肝炎病毒

1 2 庄 辉

分子生物学

2 细菌基因组学研究进展 2 刘树林3 艾滋病病毒分子病毒学 2 朱永红4

细菌生物被膜研究进展 2 李 彤5 脊髓灰质炎病毒分子生物学 2 李 杰6 朊病

毒分子生物学 2 李俊茜7 禽流感病毒分子生物学 2 彭宜红8 生物恐怖与实验

室生物安全 2 王 玲9 DNA肿瘤病毒与细胞周期异常 2 鲁凤民10 非甲~戊型肝

炎病原学研究进展 2 李 彤11 SARS病原学及致病机理的研究 2 彭宜红12 出

血热相关病毒的分子生物学 2 李 杰13 甲~丙型肝炎病毒研究进展 2 鲁凤民

14 微生物疫苗研究进展 2 王 玲结核分支杆菌耐药株的分子生物学特

15 2 朱永红

征

16 考试 2

1北京大学研究生院医学部分院

思考题:由每位授课老师负责针对某个专题给学生出思考题。

参考文献及书目:

由每位授课老师负责针对某个专题给学生推荐参考文献及书目。

相关网站:由每位授课老师负责向学生介绍。

Rearch Advances in Medical microbiology

Credits: 1.5

In the last decade, emerging and reemerging infectious dias are

staging a comeback. There

are about 40 new pathogens discovered since 1973. China has witnesd

the emergence and reemergence

of veral infectious dias that have great impacts on economy and

health in many countries around

the world, such as AIDS and Hantavirus pulmonary syndrome in UA and

avian influenza in Asia. The

SARS virus was first evident in China and then spread to 27 other

countries, resulting in many people

infected and died worldwide. Now the whole world including China is

facing the threat of influenza

pandemic. SARS threat ems not to be over yet, becau it still

remains unclear if the SARS virus is

from animal origin. Apart from the newly emerging dias, China

still plagued with old and

reemerging dias with vere health impact. The major ones include,

tuberculosis, syphilis and viral

hepatitis, each has millions of victims in China

The purpo of this cour is to introduce the new advances of rearch

on the dias to

students, including new knowledge of microbiology, diagnos,

vaccine development and anti-microbial

treatment for the dias. The molecular mechanisms of the

different aspects will be specially

emphasized

2北京大学研究生院医学部分院课程编号:010124 开课单位:基础医学院

药理学系

动物模型在药理学研究中的应用

The application of Animal model in pharmacological rearch

学 分:1.0学 时: 20

考核方式:考试教学方式:讲课与讨论

主讲教师:谭焕然 崔景荣 张静溥 课程类型:B

授课对象:研究生及高年级基础医学专业本科生

开设目的:通过课程的学习了解目前国际国内药理学及相关学科所涉及的模

式动物如斑马鱼,线

虫的研究,药物筛选常用的细胞学研究模型,以及转基因和基因敲除实验动

物模型。

教学要求: 要求学生了解和掌握动物模型的常规制备方法及在药理学研究

中如何选择合适的动物

模型。

主要内容

介绍重大疾病与药理学研究中使用的基因敲除和敲入研究动物模型及药物

筛选和新药研究中

使用的细胞学模型和模式动物的研究进展。

第 1 章 概论及背景 (2学时)

第 2 章 分子生物学技术在药理学研究中的应用(2 学时)

第 3 章 基因敲除和转基因动物模型:(4 学时)

第 4 章 基因敲除和转基因动物模型与其它动物模型的区别点 (2 学时)

第 5 章 介绍细胞学研究模型方面的新方法新进展(4 学时)

第 6 章 介绍模式动物斑马鱼研究新方法和新进展(6 学时)

The Application of Animal Model in Pharmacological Rearch

Credit: 1.0

An ideal animal model may provide valuable clues to understanding

pathological mechanism of

human dias and assist in designing optimum therapeutic approaches.

It is play an important role in

the pharmacological rearch. The lectures will focus on the

technical of cell model, transgenic and gene

knockout mice, and also involved the study of Brachydanio rerio zebra

fish

Animal model study cour is a need for skills in the pharmacological

study. We propo to educate

young people about animal welfare, and then establishing competitions

to asss the skills will be a

successful way to integrate animal welfare science into the

mainstream of animal science curricula. So

the cour is mission to training the students understand the

relationship between the pharmacological

rearch and the animal model and also understand how to find the

appropriate animal model for their

further rearch project

3北京大学研究生院医学部分院课程编号:010009开课单位:基础医学院生

物物理

学系放射医学教研室

放射生物学

Radiobiology

学 分:2.5 学 时:40/16

考核方式:考试教学方式:讲授/实验

主讲教师:杨业鹏 李五岭 课程类型:B

授课对象:放射医学专业硕士研究生专业必修;临床医学放射治疗学、介入放

射学、核医学及基

础医学、预防医学相关专业硕士研究生选修。

开设目的:射线及核技术在医疗卫生事业中得到广泛应用,如放射诊断和治

疗,放射性同位素示

踪,辐射灭菌等。放射生物学是肿瘤放射治疗及上述应用技术的理论基础。

因此,通

过该课程的学习可使学生加深对生命科学基本理论的理解,提高科研能力和

实验技

能。

教学要求:要求学生掌握放射生物学的基本理论和基本知识。

预修知识:学生在大学本科阶段学习过医学细胞生物学课程。

主要内容

理论课部分

一、放射物理学基础

(一)核衰变

(二)放射性衰变定律

(三)电离辐射能在物质中的转移与吸收

1.荷电粒子与物质相互作用时的能量损失过程。

2.x 或γ射线能量的转移与吸收。

(四)辐射剂量的概念及有关辐射量

1.基本概念。

2.有关辐射量及其单位:照射量,吸收剂量, 当量剂量,有效剂量。

3.x、γ辐射场的照射量估算。

4.肿瘤放疗剂量学基础。

二、生物分子的辐射效应

(一)分子间的能量迁移和转换

(二)自由基和自由基反应

(三)直接作用与间接作用

(四)影响生物分子放射敏感性的因素

(五)生物大分子的辐射损伤??DNA辐射损伤

(六)DNA辐射损伤的修复

三、电离辐射生物学作用的影响因素

(一)与辐射有关的因素 辐射种类、照射剂量、照射条件、照射方式等。

(二) 与机体有关的因素 放射敏感性的概念。不同种系、个体发育不同阶段、

不同组织的放射敏感性。

4北京大学研究生院医学部分院(三)与环境有关的因素

四、电离辐射生物学作用原理

(一)电离辐射生物学作用的若干特点

(二)电离辐射的原发作用

1. 直接作用

2. 间接作用

3. 直接作用和间接作用二者的相对效应

(三)辐射原发作用的几种学说

(四)电离辐射的继发作用

五、电离辐射对细胞的作用细胞是机体形态结构和生命活动的基本单位。大

量细胞死亡是辐射确定性效应的根源。

所以,电离辐射对细胞的作用是其对机体效应的基础,细胞的辐射效应是放

射生物学的核心

内容。

(一)电离辐射作用后,细胞存活或死亡的一般规律

1.放射生物学对细胞存活与死亡的界定。

2.电离辐射致细胞死亡的形式。

3.细胞存活曲线。

(二)靶概念及靶模式

(三)电离辐射致细胞的损伤与修复

(四)电离辐射与细胞的信号传导通路

(五)电离辐射与细胞周期

(六)电离辐射与细胞调亡

六、辐射致染色体损伤

(一)辐射细胞遗传学发展概况

(二)辐射与染色体

1. 辐射与染色体及基因的关系

2. 辐射所致染色体畸变类型与细胞周期的关系

3. 辐射诱发染色体畸变类型

4. 染色体畸变的命运

5. 染色体畸变形成的假说

(三)活体受照诱发的染色体畸变

(四)染色体畸变分析作为生物剂量估算的应用

七、外照射放射病的诊断与治疗

(一)放射损伤分类

(二)外照射急性放射病

1. 外照射急性放射病的定义和受照原因2. 外照射急性放射病的分类及临

床表现:

(1)骨髓型急性放射病;(2)肠型急性放射病;(3)脑型急性放射病。

3. 外照射急性放射病的发病特点

4. 外照射急性放射病的诊断

5. 外照射急性放射病治疗原则

(三)外照射慢性放射病

八、放射性核素的内照射

5北京大学研究生院医学部分院(一)放射性核素内照射作用特点

(二)放射性核素的生物转运

1.放射性核素的摄入和吸收

2.放射性核素的生物转化和分布:放射性核素在血液内存在的形式;放射性

核素的分布类

型;放射性核素的分布规律;源器官和靶器官的概念。

3.放射性核素自体内排除:排出途径;排除速率;排除规律。

(三)放射性核素内照射损伤

(四)放射性核素内污染的医学处理

1.内污染的医学处理原则

2.阻断初始污染部位的吸收

3.加速排除:络合剂促排;影响代谢疗法。九、电离辐射的远后效应

(一)辐射致随机效应

1.辐射致癌?躯体远后效应:

(1)辐射致癌的人类及实验动物资料

(2)辐射致癌剂量-效应关系??三种模式

(3)辐射致癌危险预测模型

(4)辐射致癌因果几率的推算

(5)辐射致癌的机理

(6)辐射诱发的常见肿瘤

2.辐射遗传效应

(二)辐射致确定性远后效应(非随机远后效应)

1.放射性白内障

2.辐射的胚胎效应

十、肿瘤放射生物学

(一)肿瘤放射生物学及肿瘤放疗的历史

(二)肿瘤组织的放射敏感性

(三)肿瘤放射治疗的理论基础??5R

1. 放射敏感性 Radionsitivity

2. 再氧合 Reoxygenation

3. 修复 Repair

4.再分布 Redistribution

5. 再增殖 Repopulation。

(四)高 LET 辐射进行肿瘤放疗

十一、放射增敏剂(Radionsitizer)

(一)研究放射增敏剂的背景

(二)放射增敏剂研究概况:

1. 放射增敏剂应具备的性质

2. 评价放射增敏剂效价的指标

3.放射增敏剂的研究现状

(三)放射增敏剂研究新动向:

1.肿瘤放疗与基因治疗(辐射诱导瘤内转基因表达)

2.肿瘤放疗与肿瘤血管生成抑制剂

6北京大学研究生院医学部分院十二、放射防护

(一)各类电离辐射的来源

(二)放射防护的生物学依据

(三)放射防护目的和放射防护体系

(四)我国现行的“电离辐射防护与辐射源安全基本标准”(GB 18871-2002)

与 ICRP-60出版

物

1. 基本限值

2. 导出限值

(五)放射防护措施:

1. 严格执行我国放射安全防护法规

2. 外照射防护措施:时间防护;距离防护;屏蔽防护。

3. 内照射防护措施

4. 放射性废物的管理与处置

5. 放射工作人员的健康管理

(六)医疗照射的防护 实验课部分

实验一.电离辐射对小鼠骨髓造血干细胞的损伤效应(剂量??效应曲线)

目的:用脾结节方法,观察小白鼠受不同剂量γ射线照射后造血干细胞的存

活率。学会绘制细

胞?存活曲线及求出各参数的方法。内容及步骤:

60 1.受体及供体小鼠接受不同剂量 Co-γ射线照射。2.制备供体小鼠骨髓

细胞悬液。3.供体骨髓细胞悬液由尾静脉注入受体体内。4.9天后活杀小鼠取脾,

计数脾脏表面的结节。5.计算骨髓造血干细胞存活率。

6.绘制细胞存活曲线图(半对数坐标纸),求出各参数。

实验二.电离辐射诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变实验目的:了解电离辐射的

致染色体畸变作用。内容及步骤:

60

1.不同剂量 Co-γ射线照射各组小鼠。

2.制备小鼠骨髓染色体标本。3.油镜下观察并记录各种染色体畸变。4.计算

各组染色体畸变率及畸变细胞率。

课程安排

理论课 实验课章节内容学时 实验序号内容 学时

1 放射物理基础 4

1 电离辐射对小鼠骨 8

2 生物分子的辐射效应 4

髓造血干细胞的损

3 电离辐射生物学作用的影响因素 2

伤效应

4 电离辐射生物学作用原理 2

7北京大学研究生院医学部分院5 电离辐射对细胞的作用 6

6 辐射细胞遗传学基础 4

7 外照射放射病的诊断与治疗 2

2 电离辐射诱发小鼠 8

8 放射性核素的内照射 4

骨髓细胞染色体畸

9 电离辐射的远后效应 2

变实验

10 肿瘤放射生物学 2

11 放射增敏剂 2

12 放射防护 4考试 2

学时总数 40 16

思考题:

一、 1.常见的核衰变类型有哪些?β粒子与γ射线的能谱有何不同?为什么?

2.X 或γ射线与物质相互作用时,其能量损失过程分哪两个步骤?各包括哪些作

用过程? 3.放射性活度、照射量、吸收剂量和当量剂量在概念上有何区别?

二、 1.激发分子和正离子的能量迁移和转换过程。2.自由基及其反应特性。

生物分子自由基的反应类型及生物学意义。的辐射损伤类型及生物后果。

三、 ,RBE,放射敏感性的概念。 2.影响电离辐射生物学作用的主要

因素。

四、 直接作用和间接作用的含义是什么?它们在辐射损伤中起什么作用?

五、 1.增殖死亡与间期死亡含义,二者在机体损伤中的重要性? 2.细胞存

活曲线中各参数的含义是什么?它们的生物学意义如何? 3.靶学说基本观点。

六、 1.辐射诱发染色体畸变的类型及其与细胞周期的关系? 2.在辐射事故

时,可作为估算受照者剂量的染色体畸变有几种? 3.染色体畸变作为生物剂量

计应具备什么条件?

七、 骨髓型急性放射病的典型临床表现?

八、 1.放射性核素体内生物转运有关名词的定义。2.放射性核素在体内有

几种分布类型?在体内的分布有什么规律?3.常用的放射性核素特异性阻吸收剂

有哪些?常用的促排络合剂有哪些?

九、 1.辐射致癌的剂量-效应关系模型有几种?2.预防胚胎时期受照射的重

要性?

十、 1.氧效应的概念?肿瘤内乏氧细胞对肿瘤治疗效果的影响? 2.肿瘤放

射治疗的放射生物学基础?

十一、1.从放射生物学的角度,讨论放射增敏剂研究在肿瘤放疗中的意义?

2.评价放射增敏剂的效价指标有哪些?如何求算它们?

十二、1.放射防护的目的是什么?放射防护体系包括哪些基本原则? 2.外照

射防护的基本措施有哪些? 3.我国现行“电离辐射防护与辐射源安全基本标准”

规定了哪些个人剂量限值?

8北京大学研究生院医学部分院教材:教研室自编《放射生物学》

参考文献及书目:1.吴德昌等主编。放射医学。北京,军事医学科学出版

社,2001。 2.夏寿萱等主编。放射生物学。北京,军事医学科学出版社,1998。 3.

刘树铮主编。医学放射生物学。北京,原子能出版社,1986。4.夏寿萱主编。分子

放射生物学。北京,原子能出版社,1992。

5.龚曼丽等。辐射生物学效应的影响因素,辐射生物学效应及射线作用原

理,见:潘中允主编,简明核医学。北京,北京医科大学、中国协和

医科大学联合出版,1990。 6.林兴成,江家贵译。细胞放射生物学。北京,

原子能出版社,1997。 7.周焕庚等主编。人类染色体畸变与辐射诱发。北京,原

子能出版社。 8.金为翘,王洪复主编。电离辐射损伤基础与临床。上海,上海医

科大学

出版社,1992。

9.刘泰福。肿瘤放射生物学,见:朱壬葆等主编,辐射生物学。北京,北

京医科大学出版社,1987。 10.中华人民共和国国家标准 GB 18871-2002,

电离辐射防护与辐射源安全基本标准。2002

年颁布。 11.国际放射防护委员会(ICRP)26号出版物,1977。 12.国际放

射防护委员会(ICRP)60号出版物, 1990。

Radiobiology

Credits: 2.5

The purpo of this cour is to introduce the basic knowledge and

basic theory on radiobiology and

to provide the most recent information on the effects of ionizing

radiation on human body and

mammalian cells. The cour contains chapters on the fundamentals of

radiological physics, the effects

of radiation on biological molecule, chromosome and cells, the

carcinogenesis, hereditary effects and

other late effects of radiation and the principles by which ionizing

radiation exerts its biological effectsThis cour also contains

knowledge on the diagnosis and therapy of acute radiation sickness, cancer

radiobiology and radiation protection. Therefore, this can rve as

a required cour for graduate

students in radiation medicine or radiation biology and also as an

elective cour for graduate students in

the specialty area of radiation therapy, nuclear medicine, radiology

and so on9北京大学研究生院医学部分院课程编号:010066 开课单位:基础医

学院生物物理学系

放射性同位素技术与安全

(原实验核医学)

Radioisotope Technique and Safety

学 分:2.0 学 时:26/24

考核方式:考试教学方式:讲授与实习

主讲教师:王凡课程类型:C

授课对象:研究生

开设目的:放射性同位素技术在医学生物学领域发挥着重要作用,与很多学

科相互渗透相互促

进,对医学现代化有重要意义。本课程主要介绍放射性同位素技术在医学生

物学研究

中应用的理论和技术方法,对扩大学生的知识面和应用放射性同位素技术从

事课题研

究具有实际意义。

教学要求:了解放射性同位素技术在现代医学中的作用和应用的主要方面、

主要技术及应用的新

进展。掌握应用放射性同位素技术所必需的基本理论和技术方法,为应用放

射性同

位素技术从事课题研究打下初步基础。

主要内容

理论部分

一、绪论

介绍放射性同位素技术在现代医学中的作用以及本课程的主要内容。

二、原子核物理基础知识

1.原子和原子核的结构

2.放射性核素

3.核衰变方式

4.核衰变规律和放射性活度

5.核射线与物质的相互作用

三、核辐射的测量

1.常用仪器介绍

2. γ 射线样品的测量

-

3. β 射线样品的测量

4.放射性测量的统计学

四、放射卫生防护

1.电离辐射的生物效应

2.常用辐射量

3.放射卫生防护

4. 放射性废物的处理

五、放射性核素标记化合物

1.基本概念

2.放射性核素标记化合物的制备

3.放射性核素标记化合物的纯化与鉴定

4.放射性核素标记化合物的辐射自分解

10北京大学研究生院医学部分院六、放射免疫分析

1.放射免疫分析

2.免疫放射分析

3.其它非放射性标记免疫分析法

七、放射性药物

1.放射性药物概述

2.放射性锝标记药物

3.放射性碘标记药物

4.正电子发射短寿命核素药物

5.治疗用放射性药物

八、放射性药物在核医学中的应用

1.诊断药物的应用

2.治疗药物的应用

3.正电子药物的应用

九、同位素技术在生物学中的应用

1.受体的放射分析

2.同位素技术在分子生物学中的应用

3.同位素技术在细胞生物学中的应用

4.同位素技术在药物研究中的应用

实验部分

1放射性样品制备及测量

2碘标记蛋白质及分析测量

3甲状腺T4 的放射免疫分析

99 m

4Tc 放射性药物的制备

5标记物在小鼠体内的分布

Radioisotope Technique and Safety

Credits: 2.0

Radioisotope technique play an important role in modern medicine and

biology. This cour

introduces basic concept and relative knowledge, fundamentals and

methods of radiation measuring,

radiation protection, radiolabeling compound, radioimmunoassay,

radiopharmaceutical and its

application in nuclear medicine, and application of radioisotope

technique in biology11北京大学研究生院医学部分院课程编号:010033 开课

单位:基础医学院免疫学系

分子免疫学

Molecular Immunology

学 分:3.0学 时:54

考核方式:考试 教学方式:讲授和文献阅读

主讲教师:马大龙王露 韩文玲 邱晓彦 王应课程类型:B

陈英玉赵红珊 刘雅楠

授课对象:系统学习过本科医学免疫学的硕士、博士研究生,以及对免疫学有

兴趣的本科生。

开设目的:分子免疫学研究是当前免疫学研究的前沿分支学科,随着分子生

物学技术的引入,分

子免疫学获得了飞速发展,不仅免疫学的基本问题需在分子水平上进行研究

以获解

决,而且许多生命科学的问题都牵涉到分子免疫学的研究范畴。昀近,人类基

因组学

研究和免疫组学的新成果更为分子免疫学研究带来新的动力。为适应这一新

的学科发

展,我系自 1990 年起开设分子免疫课程,受到研究生、本科生的好评。本课

程力求

全面、系统地介绍分子免疫的基本理论和昀新进展,使学员在医学免疫学知

识的基础

上,更上一层楼,开扩眼界,开扩思路,为学习研究相关学科打下良好基础。

教学要求:在理论课教学中,要求系统性介绍分子免疫学的基础和昀新进展,

并尽量结合各位老

师的科研工作,介绍本实验室在免疫相关分子研究的一些新进展,不仅能够

使研究

生学习分子免疫的前沿知识,而且可以启发研究生的科研思路,了解本实验

室的科

研成果,为今后可能的基础与临床合作研究打下基础。

预修知识:本科生免疫学,生化与分子生物学,细胞生物学

主要内容

一.免疫组学

二.Ig分子

三.补体系统

四.细胞因子及其受体

五.趋化因子及其受体

六.MHC分子

七.CD分子

八.黏附分子

九.免疫分子的基因工程和蛋白质工程

十.程序性细胞死亡及检测技术

十一.免疫细胞信号转导

教材:硕士研究生分子免疫学讲课提纲本系编写

12北京大学研究生院医学部分院Molecular Immunology

Credits: 3.0

Purpo of the cour: The molecular immunology is one of the

contemporary branch disciplines in the

modern immunology. Along with the introduction of molecular biology

technology, there has been rapid

progress in the molecular immunology. In order to keep abreast of the

progress of this new area, we have

offered the molecular immunology cour since 1990 and introduced the

basic concepts, techniques and

the latest progress to the students. Bad on study of medical

immunology, the participants will deepen

and extend their knowledge and understanding of further lected

specialized aspect by means of lecture

cours and lay a foundation for their future rearch work

Aim: To introduce the basic knowledge, the latest progress, the

technique principles, applications of

molecular immunology and the rearch developments of in

immonicsPreparatory cour: Immunology for undergraduate students,

biochemistry, molecular biology, and

cell biology

Main contents

1. ImmunomicsFocus: Immunogenomics, immunoproteomics and

immunoinformatics

2. Immunoglobulin molecules

Focus: Structure, function, principles of gene rearrangement and

engineering antibodies3. Complement

Focus: Structure, function, genetic engineering of complement and

complement receptors4. Cytokines and their receptors

Focus: Structure, function, clinical application of cytokines

5. Chemokines and their receptors

Focus: Structure, function, clinical application of chemokines

6. MHC

Focus: Structure, function, polymorphism, prentation, clinical

application

7CD moleculesFocus: structure, function and classification8Adhesion

molecules

Focus: structure, function and classification9Genetic and protein

engineering of immune molecules

10. Programmed cell death and its assays

Focus: classification, molecular mechanisms and assays11. Signal

transduction of immune cells

Focus: molecular mechanisms of signal transduction in immune cells,

important molecule families

and rearch method of signal transductionTextbook: Outline of

Molecular Immunology for the Master Degree Students 2005

13北京大学研究生院医学部分院课程编号:010036 开课单位:基础医学院

免疫学系

分子免疫学实验

Experiments of Molecular Immunology

学 分:1.0学 时:48

考核方式:考试教学方式:实验

主讲教师:王露,韩文玲,王应,张颖妹,陈英玉,马大龙等 课程类型:C

授课对象:学习过分子免疫学的基础医学专业硕士研究生,每次限 25人。

开设目的:在掌握分子免疫学基本理论知识的基础上,通过实验进一步培养

分子免疫学的实验技

术,培养科研能力,为研究生今后的科研工作打下基础。

教学要求:为训练学员提高分子免疫学实验技能和培养科研能力,该课程以

本实验室克隆的新细

胞因子趋化素样因子(Chemokine like factor 1,CKLF1)的克隆、表达和功

能研

究为主线,安排研究生完成一个较为完整的和创新性较强的科研课题,从中

理解科

研思路,掌握实验技能,体会实验成功与失败的感受,为将来进行科研创新工

作奠

定基础。参加实验的学员必须完成一篇小论文。

预修知识:分子免疫学

主要内容

一.CKLF1的生物信息学分析

二.PCR技术扩增 CKLF1 cDNA三.质粒提取

四.DNA琼脂糖凝胶电泳

五.限制性内切酶消化及鉴定

六.DNA连接

七.质粒的转化

八.重组表达载体 pMT-CKLF1-Myc-His的序列测定

九.稳定表达 CKLF1-Myc-His融合蛋白的 S2细胞的筛选

十.CKLF1-Myc-His融合蛋白在 S2细胞中的表达和鉴定

(一)SDS-PAGE电泳

(二)Western Blot

十一.CKLF1-Myc-His融合蛋白的纯化和氨基酸序列分析

十二.CKLF1-C27的活性检测和受体鉴定

一)趋化实验

二)受体内化实验

十三.CKLF1在 PHA刺激的外周血淋巴细胞中的表达检测

(一) Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离外周血单个核细胞

(二) 淋巴细胞转化实验

(三) 细胞内 CKLF1的直接免疫荧光检测

教材:分子免疫实习指导(本系编写)

Experiments of Molecular Immunology

Credit: 1.0

Purpo of the cour: This cour will train experimental techniques

of molecular immunology as well

as the rearch capability of the postgraduate students and lay good

foundation for future rearch work14北京大学研究生院医学部分院This

experimental cour focus on gene cloning and identification of CKLF1

Chemokine like factor

1, a novel cytokine cloned in our laboratory, and allows the students

to design, prepare and complete a

rearch project. During this whole process, they can find and solve

the technological questions, which

will be helpful for their future scientific work. All the participants

should write an articlePreparatory cour: Molecular immunology for

Master Degree students

Main contents

1 Bioinformatics analysis of CKLF1

2. Amplifying of CKLF1 cDNA by PCR technique3. Plasmid extraction

4. Electrophoresis of DNA in agaro

5. Digestion with Restriction enzyme6. DNA ligation7. Transformation

8. Sequencing of pMT-CKLF1-Myc-His

9. Overxpression of CKLF1-Myc-His in S2 cells

10. Identification of CKLF1-Myc-His recombinant protein

SDS-PAGE & Western Blot

11. Purification of CKLF1-Myc-His recombinant protein

12. Bioassay and receptor identification of CKLF1

Chemotaxis and receptor internalization assays

13. Expression analysis of CKLF1 in PBL

Isolation of PBL, lymphocyte transformation and intracellular

fluorescence assay of CKLF1

Textbook: Practice Guide of Molecular Immunology

Related website: ////0>.

15北京大学研究生院医学部分院课程编号:010039开课单位:基础医学院生

物化学与

分子生物学系

分子生物学工作基础

Principles in Molecular Biology

学 分:2.0学 时:40

考核方式:考试教学方式:讲授(个别章节结

主讲教师:尚永丰 朱卫国毛泽斌 合文 献自学)

授课对象:基础医学、临床医学及其它生物学科的研究生课程类型:B

开设目的:介绍分子生物学基本概念和基本技术原理,为硕士、博士研究生开

展分子生物学研究

奠定一定的理论基础,结合分子生物学实验课程使学生初步掌握有关实验技

术原理及

应用、范围。

教学要求:掌握分子生物学基本概念、某些重要实验的基本原理、基本操作

及应用。

预修知识:核酸化学, 蛋白质化学

主要内容

一、分子生物学与分子生物技术学概论

二、分子生物学常用酶

1. 限制性核酸内切酶2. DNA甲基化酶

3. 连接酶

4. 脱氧核糖核酸酶聚合酶

6. 反转录酶

7. 碱性磷酸酶

三、聚合酶链式反应1. 简介

2. 原理3.改良的 PCR

4. 应用

四、DNA克隆

1.克隆载体

2. cDNA克隆和分析

3. 基因组克隆和分析

五、基因组图谱

1. 高通量、大规模的特点

2. 基因图谱

3. 物理图谱

4. PFGE脉冲场凝胶电泳和大的限制性图谱

5. BAC和 YAC重叠群

6. 定点克隆人类疾病相关基因

16北京大学研究生院医学部分院六. 基因的功能分析1. 染色体图谱

2. 基因表达的分析

3. DNA-蛋白质相互作用

4. 蛋白质蛋白质相互作用

5.功能的获得

6. 功能的缺失

七. 基因表达调控

1. 简介

2. 启动子和增强子

3. 转录因子和基本转录机件

4. 协同激活因子和协同抑制因子

5. 染色质重塑

参考书目:

1. Current Protocols in Molecular Biology

2. Alberts B. et al. Molecular Biology of the CellFourth Edition, 2002

3. Watson JD et alMolecular Biology of the GenePearson International

Edition, 2004

Principles in Molecular Biology

Credits:2.0

This cour is designed for the graduate students pursuing their

Master or Ph.D. degree and for

other specialists using molecular biology technologies as their main

rearch tools. The cour is

basically comprid of three ctions, and each ction is lectured

by one speaker. After an overview of

molecular biology and molecular biotechnology, the first ction is

mainly focud on the property,

function, and the usage of a variety of enzymes that are commonly ud

in molecular biology techniques

PCR, rever transcription-PCR, long PCR, real-time PCR, and their

applications will also be discusd

in detailed in this ction. The cond ction is primarily

concentrated on DNA cloning, including the

knowledge about cloning vectors, cloning strategies, and cloning

process.