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微量肉汤稀释法(borthmicrodilutionmethod)
实验方法:
1.用无菌蒸馏水在聚丙烯离心管中将抗菌肽和抗生素溶解制成1280g/L的储备
液,然后用等量无菌的0.02%乙酸(含0.4%BSA)稀释,在用0.01%乙酸(含
0.2%BSA)溶液对等量稀释后的溶液在进行一系列的双倍稀释,得到质量浓
度为640,320,160……1.25mg/L的共10个梯度的系列稀释液,4C下保
存备用。
2.将待测细菌在灭菌MH楚雄旅游 肉汤琼脂平板上过夜培养,挑取菌落接种于灭菌试管中
的MH肉汤,37C,18吃药能喝绿豆汤吗 0r/min过夜培养。将培养后的菌液稀释至2*10^5-7*10^5
CFU/mL,向无菌的96孔平板中的1-11孔各加入100L的菌液,12孔不加
入菌液而加入100LMH肉汤,然后从1~10孔逐一加入相应的待测抗菌肽,
11孔作为扫描对照组不加肽。37C,90r/min培养18-24h,这样待测抗菌
肽的终质量浓度分别为64,32,16,……0.125mg/L。(不知道待测抗菌肽
添加量是多少,最终抗菌肽的终浓度怎么缩小了10倍)
3.最小抑菌浓度MIC(mininmalinhibitoryconcen搞笑诗朗诵 tration)就是能阻止50%
以上细菌生长的最小肽浓度。用酶标仪在4中国瑰宝 90nm下对平板进行扫描,肽的
MIC的确定按照比对照孔(11孔)的浑浊程度低50%以上的最小质量浓度计
算。
4.最小杀菌浓度MBC(minima红军长征的路线 lbactericidalconcentration)就是能抑制任
何残余菌落生长的肽的最低浓度。从没有螳螂的简笔画 细菌生长的平板孔中的内容物中取
10L涂布到MH琼脂平板上,37C培养18h,以此来确定肽的MBC。
参考文献:
【1】汪以真,抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较[J].中国兽医学报,2004,
24(3):270-273.
抗菌肽的体外抑菌实验(平板法)
1.稀释:将一定效价的抗菌肽做6个浓度的稀释,将抗生素按正常使用剂量同
样做6个浓度的稀释
2.指示菌:指示菌用液体LB培养基培养24h后稀释至10^6CFU/mL
3.制板:取1mL指示菌雪花英文 注入培养皿中,倒入灭菌冰心的原名是什么 的固体LB培养基摇匀,放冷
后制成平板。
4.用打孔器打涉足的意思 孔法来确定抑菌效果。
参考文献:
李晓营,等.一种抗菌肽的体外抑菌实验、安全性评价及其对肠道菌群的影响[J].
广东饲料,2014,23(2):25-28
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