细胞培养皿

细胞传代培养详细操作步骤

细胞传代培养是一种常见的细胞培养技术，用于维持细胞的生长和扩增。在进

行细胞传代培养前，首先需要准备好所需的培养基和培养器具，并保持无菌环境。

接下来将介绍细胞传代培养的详细操作步骤。

第一步是收集细胞。在培养细胞之前，需要将之前的细胞进行收集。方法是将

细胞培养皿中的培养基吸掉，用无菌PBS洗涤细胞，再用胰酶等消化酶将细胞从

培养皿上剥离，收集到离心管中。

第二步是计数和制备细胞悬液。将收集到的细胞进行计数，以确定需要多少细

胞才能达到所需的密度。然后将细胞转移到一个新的培养皿中，并制备细胞悬液。

制备细胞悬液的方法是将细胞沉淀在离心管中，去除上清液后，用足够量的培养基

将细胞悬浮均匀。

第三步是进行第一次传代。将制备好的细胞悬液加入到新的培养皿中，放入培

养箱中，使其在适当的环境中生长。在细胞数量达到一定程度时，将进行第一次传

代。传代时，先将培养皿中的培养基吸掉，用PBS洗涤细胞，再用胰酶等消化酶

将细胞从培养皿上剥离，按照所需比例加入新的培养皿中。

第四步是继续培养。将新的培养皿放回培养箱中，使其在适当的环境中继续生

长。在细胞数量达到一定程度时，进行下一次传代。根据所需的细胞数量和密度，

可以进行多次传代，直到达到所需的数量和密度。

需要注意的是，在进行细胞传代培养时，要保持无菌环境，避免细胞被污染。

同时，要注意细胞的状态，确保其生长正常，维持其稳定的遗传特性。