最大吸收波长

这几天看到大家对参比波长和检测波长出现比较多的疑问，故整理下帖子，供板油们参考：

是用紫外可见分光光度计进行全扫描,然后选择最大吸收的波长,如果有几个最大吸收波长

的时候,选择杂质峰较少的波长做测定波长。检测波长不是参比波长，只有很少物质测定需

要用到参比波长,参比波长主要起到消除噪音的影响

选择参比波长的依据是被测样品在参比波长处没有吸收，参比波长应尽可能的接近检测波

长。说白了,参比波长就是空白对照的作用如果把参比波长值设成检测波长，样品在紫外光

下无吸收。

参比波长应设在样品没有吸收的地方，且越靠近样品的检测波长越好。

选择参比波长是为了更好的消除噪音的影响。一般参比波长的选择依据是样品在参比波长没

有吸收,同时跟检测波长相差不是太大,应尽量靠近，以便消除干扰物质的影响。就象做紫外

分光光度计的实验，选择参比溶液一样，为了消除空白溶液中物质的干扰。

下面是一个关于参比波长选择的例子：

例:X和Y是两种吸光物质的吸收曲线，现采用双波长吸光光度法对它们进行分别测定。如

图所示如何选择参比波长及测量波长。

（1）测量X时，Y可视为干扰物质。则选择l1作为测量波长，l2作为参比波长，因为l1

和l2两处Y的吸光度相等,可以用以消除Y对X的干扰。（2）测量Y时,X可视为

干扰物质.则选择l3作为测量波长，l4作为参比波长，因为l3和l4两处X的吸光度

相等，可以用以消除X对Y的干扰。

如果你的检测器可以设参比波长，应该是dad或者mwd检测器.这类检测器的.检测

的不是你实际设的波长，比如你设的234，16nm.450,80.表示检测器检到的从

226-242nm的紫外吸收图，再平均得到一个数据,参比设置也类似，然后2个相减,

就是工作站上显示得到峰高和峰面积。

（2）如果你的样品刚好在234nm,吸收最强,你可以设到234，2nm.（资料上一般写频宽

宽度设置是最大吸收峰的半峰宽的宽度）如果你的样品在410—530nm有紫外吸

收,你可以把参比设的更高，或者干脆不设参比.

岛津紫外检测器波长不准故障的检修

1波长不准故障的检修

在正常使用下，如果显示波长不准，根据波长自检和自校原理,故障是由光电管没有检

测到亮线引起的。当显示波长不准时，应首先检查出流动相使用得是否合适,波长设定是否

超出仪器的使用范围。当排除了这些人为因素后，利用仪器的自校功能进行一次波长校正(校

正方法见使用说明书）。校正后如仍显示波长不准，则按面板上的Func键，把波长设定为

254nm，并且使检测池充满甲醇或乙晴，查看SMPLEN（流通池）和REFEN（参比池)的

吸光度值。如果流通池和参比池的值相差很大，则故障是由光栅部分污染或氘灯能量降低引

起的，按面板上的VP和Func键，查看氘灯的使用时间是否超过2000小时.如果氘灯使用时

间过长，即使氘灯能够正常启动，有时也发不出0nm,486nm和656nm亮线，从而引起波长

不准。这时，需要更换新的氘灯。如果氘灯使用时间不长,则故障是由光栅部分引起的。

2光栅部分的检修与调试

光栅部分主要是由M1、M2、M3、石英窗口和光栅组成的，是整个光路的核心。反射

镜镜面的光洁度越高,光电池接受到的光就越强，仪器的灵敏度就越高.如果紫外光长时间故

地功能照射镜面的一个地方，会在镜面上产生光斑。如果使用环境不干燥，会在镜面上生成

霉斑.如果使用环境不洁净，灰尘也会对镜面造成污染。这些都将使镜面的光洁度下降，严

重时会使光电池无法检测出氘灯的亮