灭菌方法(灭菌方法及适用范围)

常见的灭菌方式有哪些

（1）加热灭菌法

利用高温来杀死微生物（超过最高生长温度）的方法。加热灭菌的原理：当高温作用于微生物时，首先引起细胞内生理生化反应速率加快，机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等，随着温度的增高而遭受不可逆的破坏，尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏，从而使细胞失去了生活机能上的协调，停止了生长发育。随着高温的继续作用，细胞内原生质便发生凝固，酶结构完全破坏，活动消失，生化反应停止，渗透交换等新陈代谢活动消失，细胞死亡。加热灭菌可分干热灭菌和湿热灭菌两大类。

1）干热灭菌 利用灼烧或干热空气灭菌而没有饱和水蒸气参加的灭菌法称为干热灭菌法。由于干热灭菌使用方便，方法简单，故在生产上广泛应用。如火焰灭菌法：直接利用火焰把微生物烧死，故又称焚烧灭菌法。采用此法灭菌既彻底又迅速，但只适用于金属制的接种工具、试管口及污染物品等的处理。热空气灭菌法：即在电热恒温干燥箱中利用干热空气来灭菌。

2）湿热灭菌 即利用蒸汽进行灭菌的方法。湿热灭菌又分为高压、常压、间歇灭菌和巴氏灭菌4种。

①高压蒸汽灭菌 由于高压蒸汽具有较强的穿透力和较常压高的温度，能大大缩短灭菌时间，提高工作效率，加之蛋白质在湿热条件下容易变性，在热蒸汽条件下，细菌的芽孢在120℃，经20～30分钟可全部被杀死。如灭菌材料体积较大，不易被穿透时，可将压力增加到0.152兆帕，延长至1～2小时。在高压蒸汽灭菌中，灭菌温度随蒸汽压力的增加而升高（图2-6）。

图2-6 高压蒸汽灭菌锅

在使用高压灭菌锅时，要完全排出锅内的空气而以饱和蒸汽代之。如果空气不排除干净，则锅内温度将低于同样压力下由纯饱和蒸汽产生的温度，影响灭菌效果。

此法适用于各种耐热物品的灭菌，如一般培养基、生理盐水等各种溶液、玻璃器皿、工作服等。所采用的蒸汽压力与时间，应根据待灭菌物品的性质、体积与容器类型等决定。

②常压蒸汽灭菌 这是采用自然压力、100℃蒸汽进行灭菌的方法。它设备简单、成本低，当前使用最广泛。只要砌一个炉灶，买1～2只大锅，上面用砖和水泥砌成，也可用大铁桶、木桶等，体积大小可自行决定，但不宜过大，以装800～1500瓶为好。设计常压灶时应注意的问题：大小根据生产规模来定，灶顶部最好制成拱圆形，这样冷凝水可沿灶的内壁下流而不会打湿棉塞；灶仓内要有层架结构，以便分层装入灭菌物；灶上应安装温度计，可随时观察灶内温度的变化；因灭菌时间长，锅内水不够蒸发，故容量大的灶要安装加水装置；灶仓的密闭程度要尽可能高，这样既提高灭菌效果，又节省燃料。菇农在生产中还常用一种小型蒸汽发生装置，引出蒸汽后直接通到下边用木条堑起、四周用多层塑料布密封的菌袋堆中进行常压灭菌。这种方法不用建灶，简便省工（图2-7）。常压灭菌一般水烧开后保持8～10小时，闷一夜即可。

图2-7 简易常压灭菌法

③常压间歇蒸汽灭菌法 这是利用常压蒸汽反复几次灭菌的方法。具体做法是将待灭菌物品放在锅内，100℃处理1小时左右，杀死微生物的营养细胞，让其冷却至30℃左右，此时芽胞会萌发，再以同样方法加热处理，反复3次，可达到灭菌目的。该方法可用于不耐高温的药品、营养物、特殊培养基的灭菌。

④低温巴氏灭菌法 即在60～70℃下，经一定时间，杀死有害微生物的方法。适应于不耐高温的物品消毒。有些培养基，在高温下遭到破坏，用此法既可杀死致病微生物的营养体，又能使培养基的成分不致受到严重破坏。食用菌生产中培养料堆积发酵工艺，就是利用这个原理杀死其中的病虫、杂菌。

（2）过滤除菌法

又分液体过滤和空气过滤两种，就是采用机械的方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器，通过机械过滤，只让液体培养基或空气从筛孔流出，各种微生物菌体则留在筛子上，从而达到除菌的目的。这种方法适用于对热不稳定的体积小的液体培养基（如动物血清、蛋白质、酶、维生素等）及气体的灭菌。超净工作台的工作原理就是将带菌空气通过过滤灭菌形成无菌空气，从风洞中吹出，来造成工作台范围的无菌状态。过滤灭菌的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。常用的过滤器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的，也有用火棉胶、硝化纤维素滤膜制成的。

（3）辐射灭菌法

利用辐射产生的能量进行杀菌的方法称辐射灭菌。辐射可分电离辐射和非电离辐射两种，α-射线、β-射线、γ-射线、X-射线、中子和质子、微波等属电离辐射，紫外线、臭氧、日光为非电离辐射。

1）紫外线灭菌 紫外线杀菌的原理是利用紫外线的辐射作用。用灯管直接照射细菌使其发生光化学反应，将细菌细胞质诱导形成胸腺嘧啶双聚体，从而抑制DNA的复制而发生变性、致死。另一方面，空气在紫外线照射下产生的臭氧（O3），也具有一定的杀菌作用。紫外线的有效作用距离为1.2～2.0米。紫外灯一般悬吊在接种室或培养室的上方，个数依房间大小而定，容1～2个人操作的接种室，安装一个30瓦的紫外灯就可以了。在每次接种前，应将所需的器具一起放入接种室（箱）内，然后打开紫外灯照射。如果接种室体积较大，开灯照射2小时才能达到灭菌效果；如果较小，只需开灯半小时左右既可达到灭菌效果。由于紫外线穿透力弱，即使是普通玻璃也不能滤过，因此，只适于空气或物体表面的灭菌。紫外线对人体皮肤，尤其是眼睛有杀伤作用，应避免直视，工作时应将紫外灯关闭。紫外线消毒时工作场所如果处在稍暗无光的情况下，能提高杀菌效果。细菌接受致死量紫外线照射后，随即给予可见光照射，部分细菌有复活的可能。干细胞比湿细胞对紫外线的抗性强，孢子比其营养细胞对紫外线更具抗性。

2）微波灭菌 由于微生物的细胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波电场中被极化，并随着电场方向的改变而转动，在转动过程中分子之间高速度摩擦产生热能，这种热能不同于外部加热，可在短时间里使细胞爆破而物体本身的温度却只有极微增加，从而达到灭菌效果。用YM7601型微波炉只需60秒钟就能杀死食品中192万个大肠杆菌。

3）臭氧发生器消毒 臭氧（O3）具有强烈的氧化作用，能破坏微生物的细胞膜与核酸。O3也是一种暂态物质，常温下能自然分解，还原成氧。其灭菌原理实际上和紫外线消毒极相似。

灭菌方法分为哪几种类别？

灭菌方法分为：

1、热灭菌法

热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。

2、干热灭菌

把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧是一种最彻底的干热灭菌法，应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。

3、湿热灭菌

以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。

4、间歇灭菌

间歇灭菌连续3天，每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃，不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

5、辐射灭菌

辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法，较常用的有紫外线，其他还有电离辐射。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力，以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

6、渗透压灭菌

渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离，不能进行正常的新陈代谢，结果导致微生物的死亡。

7、化学试剂灭菌

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。

灭菌方法是什么？

1、物理灭菌法

（1）热力灭菌法 使用热力灭菌法，在温度和压力等规定的灭菌条件下，要达到一定的加热时

（2）过滤灭菌法 过滤灭菌法是用筛除或滤材吸附等物理方式除去微生物，是一种常用的灭菌方法，适用于不能受热的物品，如含有可溶性或不稳定物质的培养基、试验液体和液状医药品等，过滤法的最大缺点是不能滤除病毒。

（3）照射灭菌法放射线灭菌法是包括放射性同位素在内，利用从放射源产生射线进行照射，是杀灭微生物的一种方法。

2、化学灭菌法

（1）气体灭菌法 气体灭菌法是利用环氧乙烷或甲醛灭杀微生物的一种方法，主要用于玻璃制品、磁制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品、纤维制品等，还可用于设施、设备或粉末状的医药品等。使用气体灭菌时，其被灭菌的物品以未变质为前提条件。

（2）药液灭菌法 通常使用的药液有乙醇、甲酚、苯酚水或福尔马林水等，适用于玻璃制品、磁制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品、纤维制品等物品，还可用于手指、无菌箱或无菌设备等。

扩展资料：

临床意义

1、手术中的应用
手术器械、敷料、术者手臂及手术环境的灭菌，是手术成功、伤口愈合的关键，严格无菌操作是防止感染、保证术后患者预期恢复健康的重要条件。

2、预防疾病
灭菌法可以预防病原微生物感染，切断疾病传播途径、控制或消灭传染病。

参考资料百度百科-灭菌法

常用6种灭菌方法有哪些，附适用范围

回答
常用6种灭菌方法有干热灭菌法、湿热灭菌法、间歇灭菌法、辐射灭菌法、过滤除菌法和化学试剂灭菌法。干热灭菌法是指在干燥环境(比如火焰或者干热空气)进行灭菌的技术。湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或者流通蒸汽进行灭菌的方法。间歇灭菌法是指利用反复多次的流通蒸汽加热，从而杀灭所有微生物的方法。
一、常用6种灭菌方法有哪些
1、干热灭菌法:是指在干燥环境(比如火焰或者干热空气)进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法，适用于干燥粉末、凡士林、油脂等。火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法;干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。
2、湿热灭菌法:是指用饱和水蒸气、沸水或者流通蒸汽进行灭菌的方法，湿热灭菌法是以高温高压水蒸气为介质，因为蒸汽的潜热大，而且穿透力强，容易使蛋白质变性或者凝固，从而导致微生物的死亡。该方法的灭菌效率比干热灭菌法高，而且还是药物制剂生产过程中比较常用的灭菌方法。
3、间歇灭菌法:是指利用反复多次的流通蒸汽加热，从而杀灭所有微生物。间歇灭菌一般在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。这种方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100°C以上的温度下处理比较长时间会被破坏，用间歇灭菌法可以起到杀菌作用，又可以让被处理的物质免遭破坏。
4、辐射灭菌法:是利用电离辐射杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法，它们都可以通过特定的方式控制微生物生长或者杀死微生物，比如微波可以通过热产生杀死微生物的作用，该方法可以在常温或者低温下进行，处理过程食品温升很小，这样有利于维持食品的质量;而且辐射过的食品不会留下任何残留物。
5、过滤除菌法:是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，从而达到无菌目的，过滤除菌的原理有惯性撞击截留作用、拦截截留作用、布朗扩散截留作用等。
6、化学试剂灭菌法:是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法，该方法可以分为气体灭菌法和液体灭菌法，气体灭菌法是指采用气态杀菌剂进行灭菌的方法，比如臭氧、甲醛等;液体灭菌法是指采用杀菌剂容易如进行消毒的方法。
二、6种灭菌方法的适用范围
1、干热灭菌法:适用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品的灭菌，不耐湿热的器械的灭菌，用于蒸汽或者气体不能穿透物品的灭菌，比如玻璃、油脂、粉剂和金属等制品的消毒灭菌。
2、湿热灭菌法:适用于耐高温、耐湿热物品，如培养基、动物尸体等，比如实验室内常见压力蒸汽灭菌器。
3、间歇灭菌法:适用于不耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌。
4、辐射灭菌法:适用于食品、化妆品、药品、日用品、医疗产品和电子塑胶等领域，主要作用是产品消毒灭菌处理，通过射线作用于产品在不拆外包装的前提下可以有效降低或者杀灭产品内部不同类形的微生物。
5、过滤除菌法:适用于血清、毒素、抗生素等不耐热生物制品及空气除菌。
6、化学试剂灭菌法:适用于环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器具、设备和设施等的消毒，也用于粉末注射剂。

灭菌方法有哪几种

高压灭菌：通过加压提高蒸汽温度，然后用高压蒸汽灭菌。 紫外线灭菌：杀菌范围广，但是穿透力较弱。 干热灭菌：主要是通过灼烧完成，通常用于工具灭菌。 干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌。

灭菌的方法有哪些

1、高压灭菌

灭菌时，可以通过加压提高蒸汽温度，然后用高压蒸汽灭菌，这种方法的穿透力强，温度高，灭菌效果好，但是要注意完全排除高压灭菌器内的冷空气，否则灭菌不彻底。

2、紫外线灭菌

紫外线灭菌的效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关，这种方法的杀菌范围广，但是穿透力较弱，而且受到多种因素的限制，一般紫外灯杀菌以温度20-40℃、相对湿度40%-60%为宜。

3、干热灭菌

干热灭菌主要是通过灼烧完成，这种方法通常是用于工具灭菌，将工具放在火焰上灼烧，然后利用火焰对其进行灭菌，阻止工具受到污染，在无菌操作中应用较为广泛。

4、干烤灭菌

干烤灭菌一般是利用热辐射及干热空气进行灭菌，先把待灭菌的物品用金属、玻璃、陶瓷制品等包装好，然后放入烤箱中，加热至160℃，保温2h即可完全消灭细菌。

灭菌的方法有哪些？

1.干热灭菌法
1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要是用于接种工具灭菌，在火焰上灼烧即可达到彻底灭菌，火焰灭菌通常用于无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，阻止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌。一般将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，均可在烤箱内干热灭菌。通常加热至160℃，保温2h可完全灭菌。但不宜超过170℃，玻璃量具易变形。降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂。干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底。
2.湿热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，穿透力强，温度高，灭菌效果最好。
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气。有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多。在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除。否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底。
3.紫外线
杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制。
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关。
我国规定紫外灯照射强度距离1m处不低于70μw/cm2。一般紫外灯使用超过100h，则应更换。表面有尘土，降低灭菌效果。紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜。