鉴定蛋白质(鉴定蛋白质的方法)

更新时间:2023-03-01 20:31:59 阅读: 评论:0

如何鉴定蛋白质

鉴定蛋白质可以用双缩脲试剂。

双缩脲(NH2CONHCONH2)由两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物,在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。

优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)。

缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

蛋白质的作用:

人体内的一些生理活性物质如胺类、神经递质、多肽类激素、抗体、酶、核蛋白以及细胞膜上、血液中起“载体”作用的蛋白都离不开蛋白质,它对调节生理功能,维持新陈代谢起着极其重要的作用。人体运动系统中肌肉的成分以及肌肉在收缩、作功、完成动作过程中的代谢无不与蛋白质有关,离开了蛋白质,体育锻炼就无从谈起。

在生物学中,蛋白质被解释为是由氨基酸借肽键联接起来形成的多肽,然后由多肽连接起来形成的物质。通俗易懂些说,它就是构成人体组织器官的支架和主要物质。蛋白质缺乏:成年人:肌肉消瘦、肌体免疫力下降、贫血,严重者将产生水肿。

未成年人:生长发育停滞、贫血、智力发育差,视觉差。蛋白质过量:蛋白质在体内不能贮存,多了肌体无法吸收,过量摄入蛋白质,将会因代谢障碍产生蛋白质中毒甚至于死亡。

以上内容参考百度百科-双缩脲试剂

以上内容参考百度百科-蛋白质


鉴别蛋白质的方法有哪些

常见的蛋白质鉴定方法有:

一、最简单的方法就是对所要鉴定的物体进行灼烧

二、使用化学药剂进行化学反应来鉴定蛋白质

三、较为精准的方法是使用仪器进行蛋白质鉴定,如质谱仪等

在生物学研究中经常会遇到一些关于蛋白质鉴定的问题,如单一蛋白质或者简单混合物的鉴定;对单一蛋白质的序列分析等。这一类蛋白质鉴定,在精密度上要求较高,所以几乎都是采用质谱仪器,来对蛋白质进行精密鉴定。

质谱技术是鉴定蛋白质的其中一种平台技术。可用到的质谱仪有Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。所在鉴定机构的不同,在硬件品牌的使用上也会有不同。

蛋白质鉴定的流程一般分三大步:蛋白质提取、纯化、鉴定。这个流程是一个将蛋白质层层“解剖”的过程,从中我们可以对蛋白分子量进行测定,蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质进行鉴定,非变性质谱分析以及Pull-down靶蛋白质谱鉴定等,较为细致的去分析蛋白质中的各种物质、性质等。

如何鉴定蛋白质

1、对物体进行灼烧,看是否能闻到烧焦的羽毛味,如果可以闻到烧焦的羽毛味,那么证明有蛋白质的存在。

2、蛋白质和浓HNO3进行反应,如果能够变性产生黄色不溶性物质,那么该物体是蛋白质。

3、把含有蛋白质的豆子磨成浆然后过滤,取滤液进行测试,可以先在滤液中加氢氧化钠(NaOH),然后再加入双缩脲试剂,如果出现紫色反应,为蛋白质。

4、通过质谱仪,它的原理主要是根据肽质量指纹图谱与蛋白质数据库中蛋白质的理论PMF进行比


蛋白质的鉴定方法?

1.最简单的方法,也是人们最耳熟能详的方法,就是对物体进行灼烧,看是否能问到烧焦的羽毛味,如果可以问到烧焦的羽毛味,那么证明有蛋白质的存在。
2.中学的化学课上也教过我们不少的方法,比如说吧蛋白质和浓HNO3进行反应,如果能够变性产生黄色不溶性物质,那么该物体是蛋白质。
3.还有一种方法就是把含有蛋白质的屋子磨成浆然后过滤,取滤液进行测试,可以先在滤液中加氢氧化钠(NaOH),然后再加入双缩脲试剂,如果出现紫色反应,就为蛋白质。

蛋白质检验实验步骤

选择高蛋白的食物浆液,比如豆浆和蛋清。然后准备检测蛋白质的双缩脲试剂,由A液和B液组成,A液:氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液。B液:硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。

在实验时,需要现在待测液体中先在加入A液,先制造出碱性环境,满足B液与蛋白质反应的条件,这样才可以方便进行蛋白质的检测。一段时间后,如果试管中的液体变为紫色,说明待测液体中含有蛋白质,而且颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

扩展资料:

蛋白质检验注意事项:

用户需要注意样品应是均匀的,若是固体样品应事先研细过筛,液体样要混合均匀。

样品放入凯氏烧瓶时,不要黏附瓶颈上,万一黏附可用少量水缓慢冲下,以免被检样消化不完全,使结果偏低。

如果称1g以上的样品,就需要K氏烧瓶最小500ml,800~1000ml的更好,这样的K氏烧瓶对于缩短氨化时间,加热的均匀性和完全氨化效果最好。

参考资料来源:百度百科-蛋白质浓度测定


怎样鉴别一种食物中含有蛋白质?

一般鉴别蛋白质的最简便方法分以下两种情况:

1、检验固体物质:最简便方法是火烧,闻其是否有烧焦羽毛的气味,有则含蛋白质,无则不含;

2、检验液体物质:最简便方法是加入适量食盐或身边易得的可溶性盐充分混合看其是否凝聚现象出现,有则含蛋白质,无则不含。

蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸通过脱水缩合形成肽链。蛋白质由一条或多条多肽链组成的生物大分子,每一条多肽链有二十~数百个氨基酸残基不等;各种氨基酸残基按一定的顺序排列。产生蛋白质的细胞器是核糖体。

扩展资料:

如果想要做实验来证明食物当中含有蛋白质,那么应该加入某一些化学试剂。比如说加入一些试剂之后会呈现别的颜色。

蛋白质是由α-氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链,再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合而成的高分子化合物。蛋白质就是构成人体组织器官的支架和主要物质,在人体生命活动中,起着重要作用,可以说没有蛋白质就没有生命活动的存在。每天的饮食中蛋白质主要存在于瘦肉、蛋类、豆类及鱼类中。

参考资料来源:百度百科-蛋白质


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