多肽修饰有哪些?作用是什么?
目前大致分为以下几种: 1.氨基化及乙酰化 2.生物素及FITC标记 3.多种二硫键修饰 4.多种磷酸化 5.KLT,BSA,OVA 6.聚乙二醇修饰 7.同位素标记 8.符合抗原肽标记目前,我只知道大概有这几种你可以参考一下
多肽修饰的原理及操作步骤
目前大致分为以下几种:
1.氨基化及乙酰化
2.生物素及FITC标记
3.多种二硫键修饰
4.多种磷酸化
5.KLT,BSA,OVA
6.聚乙二醇修饰
7.同位素标记
8.符合抗原肽标记
目前,我只知道大概有这几种你可以参考一下
定制多肽的PEG修饰有哪个方面
生物学角度来说;作为药物先导化合物的多肽分子在体内的应用受到一定程度的限制,主要体现在生物体肾小球的过滤作用、体内蛋白酶的水解破坏作用以及因多肽分子引起的体内抗原反应。将多肽用PEG修饰后(Pegylation),上述三方面的限制均大幅减小,从而提高了多肽在生物体内的应用。
物理化学性质角度;因为PEG的亲水性,可以改善多肽整体的亲疏水性质,小分子PEG可以做为Link,把修饰基团和多肽结合起来,有时候要比6-氨基己酸更有优势。常见的是Biotin-PEG4-Peptide。
PEG4的结构如下:
接下来,我将详细介绍下多肽的PEG修饰。
小分子PEG修饰。分子量区间在PEG2-PEG24之间。如
AEA 5-amino-3-oxapentanoic acid
AEEA 8-Amino-3,6-Dioxaoctanoic Acid 9 atoms (mini-PEG)
TTDS 1,13-diamino-4,7,10-trioxatridecan-succinamic acid
Ebes 8 - amino - 3,6 - dioxa - octyl)succinamic acid (PEG2-Suc-OH)
AEEEA 11-Amino-3,6,9-Trioxaundecanoic Acid 11 atoms(mini-PEG3)
dPEG(4) 15-amino-4,7,10,13-tetraoxa-pentadecanoic acid
dPEG(8) alpha-amino-omega-carboxy octa(ethylene glycol)
dPEG(12) alpha-amino-omega-carboxy dodeca(ethylene glycol)
这类小分子PEG就相当于特殊的氨基酸,修饰步骤和合成氨基酸的步骤一样。
例如我们在多肽中插入AEEA,
那么所使用的原料一般为Fmoc-AEEA-OH,(CAS:166108-71-0)
大分子PEG的修饰,分子量区间在PEG500-PEG40K之间。例如PEG2000和PEG5000的修饰。具体以PEG2000为例。
常见的PEG2000的修饰位点为
1:多肽的N端,如PEG2000-DTGLIWAPQNT-OH。
2:氨基酸Lys的侧链H2N-DTGLIW-K(PEG2000)-APQNT-OH
3:Cys的侧链,如H2N-Cys(Mal-PEG2000)-DTGLIWAPQNT-OH,通过巯基和Mal结合来把PEG2000修饰在多肽上。
特殊的PEG2000修饰位点
1:在多肽中间,如H2N-DTGLIW-PEG2000-APQNT-OH,因为通过固相合成,PEG2000很难连接到H2N-APQNT-Resin上,我们之前做过大量固相合成实验,反应速率慢,收率低,使用PEG2000原料也比较多,所以通常我们采用液相分段合成,这样可以节约很多的PEG2000原料。是个产品在市场上更有优势。
2: 在多肽C端,如H2N-DTGLIWAPQNT-PEG2000,这个比在中间的要简单很多。
PEG2000其实是一个混合物,因为其n值在一个范围内,例如n=40、41、42…45…46、47等。我们可以通过下面Tof图谱看出PEG2000的峰型,是一簇比较集中的峰。
如何将小分子多肽修饰到脂质体上
用针对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的小分子多肽配体D4修饰PEG化的阳离子脂质体,观察其提高质粒DNA和siRNA对肿瘤细胞转染效率的作用。方法:将D4连接在DSPE-PEG2000的末端以修饰PEG化的阳离子脂质体,检测该载体系统对高表达EGFR的人非小细胞肺癌细胞株H1299中质粒DNA转染效率的影响,Sirius照度仪检测质粒DNA转染后H1299细胞荧光素酶的表达,荧光显微镜观察转染FAM-siRNA后H1299细胞的荧光强度。结果:制备的脂质体/质粒DNA复合物随着电荷比的提高,复合物粒径逐渐减小,复合物Zeta电位逐渐升高。在质粒DNA的转染中,与无修饰的非靶向脂质体相比,D4修饰的脂质体可以显著提高H1299细胞中荧光素酶的表达(P〈0.05或P〈0.01);D4修饰的脂质体在各个电荷比处对H1299细胞的转染效率显著高于无修饰的非靶向脂质体(P〈0.05或P〈0.01)。在FAM-siRNA的转染中,荧光显微镜下可以观察到D4修饰的脂质体组有更高水平的FAM荧光强度。结论:D4修饰的阳离子脂质体提高高表达EGFR肿瘤细胞中质粒DNA和siRNA的转染效率。
现在市场上多肽合成修饰都有哪些基本原理?
目前大致分为以下几种:
1.氨基化及乙酰化
2.生物素及FITC标记
3.多种二硫键修饰
4.多种磷酸化
5.KLT,BSA,OVA
6.聚乙二醇修饰
7.同位素标记
8.符合抗原肽标记
目前,我只知道大概有这几种你可以参考一下
多肽修饰技术的作用是什么
目前大致分为以下几种:
1.氨基化及乙酰化
2.生物素及FITC标记
3.多种二硫键修饰
4.多种磷酸化
5.KLT,BSA,OVA
6.聚乙二醇修饰
7.同位素标记
8.符合抗原肽标记
目前,我只知道大概有这几种你可以参考一下