thl

短篇报道

调节性树突状细胞对小鼠急性移植物抗宿主病及急性白血病复发的保护作用

同种异基因骨髓移植是治疗白血病及遗传性疾病的有

效途径。但是，移植物抗宿主病（

GVHD

，即由移植物中的淋

巴细胞识别宿主抗原而致敏、增生分化，攻击受者靶组织的

一种疾病）的发生是它的一个突出问题。在我们的临床治

疗中，免疫抑制剂的应用及预先去除供者骨髓中的

T

细胞

虽然在一定程度上减少了

GVHD

的发生，但同时一些严重

的并发症如严重感染及移植物抗白血病的发生率上升。因

此需要找到一条有效途径来控制

GVHD

及

GVL

的发生。

研究表明，成熟树突状细胞（

mDCS

）作为抗原呈递细胞

促进

T

细胞应激，而非成熟树突状细胞（

iDCS

）可导致外周

T

细胞耐受。但

iDCS

并不适用于临床治疗，因为它在感染状

态下会转变为

mDCS

。因此应用调节性树突状细胞（

PDCS

，指

经体外调节培养后可在体内外诱导

T

细胞低反应性及耐受

的一类树突状细胞）来治疗

GVHD

及

GVL

是一条有效途径。

该实验通过

PDCS

对小鼠白血病骨髓移植后发生

GVHD

及

GVL

的治疗及保护作用有效验证了其效果。

在以前的研究中发现，

CD8+T

细胞通过穿孔素途径参

与

GVL

的发生发展，而

GVHD

的发生与发展主要与

CD4+T

细胞有关。本实验以

H-2D小鼠为供股票套牢什么意思 者，

H-2c型小鼠为受

者，采用体内体外诱导试验进行研究。我们发现

PDCS

可以

抑制

CD4+T

细胞的活性，并且这种抑制作用具有抗原特异

性。同时

PDCS

亦可诱导

CD4+T

细胞的耐受，即致

CD4+T

细

胞对其他细胞尤其是

mDCS

细胞的低反应性，但加入

IL-2

则

可轻微地促进其反应。

PDCS

还可导致

CD8+T

细胞的无能，

且该

CD8+T

细胞对其他细胞的毒性反应是抗原特异性的。

因此，在小鼠急性

GVHD

及

GVL

模型中，与对照组相比，注

入与宿主相匹配的

PDCS

可以有效地控制或者延缓

GVHD

及

GVL

的发生。

同时，在小鼠白血病移植物模型中，用

mDCS

处理的受

体小鼠

TFN-

a

、

IL-2

等炎性分子产生细胞增加，而用

PDCS

处

理的受体小鼠该类细胞明显降低，但

IL-l0

产生细胞增加，

并且在机体炎症状况下，

PDCS

的作用不受影响。

进一步研究发现，

5

天后在经供者（

H-2D）小鼠骨髓及脾

脏巨噬细胞（

BMS

）狗作文 移植的受者小鼠（

H-2c）体内注入

mDCS

，

其

l-KD+CD3+、

l-KD+CD4+、

l-KD+CD8+细胞的数量极大地

升高，而注入

PDCS

细胞则其

l-KD+CD3+、

l-KD+CD8+细胞数

量减少，但

l-KD+CD4+细胞与未预激前无明显差别。推测

可能是由于经

PDCS

处理后通过一种受体介导机制使

CD4+

CD25-细胞转变为

CD4+CD25+及

CD4+CD25+CDl52+细胞

的缘故。而

CD4+CD25+细胞及

CD4+CD25+CDl52+细胞作

为一种调节性

T

细胞导致

CD4+T

细胞的无能应答。其分子

机制现认为由于

PDCS

分对党支部意见 子虽然表达特异性的

MHC

分子，但

协同刺激分子的表达量很微弱，而

TCR

（第一信号）如果在缺

乏足够协同刺激信号（第二信号）的情况下被启动，会通过

上调

T

细胞内的

cAMP

及

p27kipl导致

T

细胞的无能或凋亡，

从而诱导抗原特异性耐受。

因此，以调节性树突状细胞来预防及治疗小鼠白血病

骨髓移植术后发生

GVHD

及

GVL

，在该研究中得到了有效的

验证，并为临床治疗开辟了一条新的道路，然而将该成果运

用于临床还有待于进一步的研究与验证。

（吴萍萍王建莉供稿）

肺树突状细胞分泌

IL-6

阻止

Thl

介导的免疫反应

树突状细胞（

DC

）不仅是高度特异的抗原提呈细胞，而

且在介导初始

T

细胞分化为

Thl/Th2

中起关键作用。肺组

织不断受到内外环境各种抗原的刺激，此时肺组织中的

T

细胞倾向分化为

Th2

而不是

Thl

，以避免

Thl

介导慢性炎症

反应损伤肺组织。但肺组织中

T

细胞倾向分化为

Th2

的机

制不清，为探讨其机制，研究了不同来源

DC

对

T

细胞分化

的影响。

实验组摘取

BALB/c

小鼠肺脏及脾脏，分离

DC

，体外进

行了一系列实验和指标检测：

t

FACS

检测

DC

的独特型（表

面标志）：结果表明，肺中没有

CD8

a+DC

，几乎所有肺

DC

均

为

CD8

a-，并且约

l5%DC

表达高水平

CDllD

；与肺

DC

相比，

脾

DC

一致表达高水平多种共刺激分子和活化分子（

CD80

、

CD86

、

CD40

、

CD54

、

MHC

o

和

CDlc

），约

45%

脾

DC

为

CD8

a+

DC

，其余为

CD8

a-。大多数脾

DC

表达中等水平

CDllD

，

DC

表型的这种显著差异有助于初始

T

细胞在肺、脾

DC

作用下

发生不同方向分化。

＠

LPS

刺激肺、脾

DC

分泌

IL-6

、

l2

、

l0

水平：取肺、脾

DC

，加入不同浓度

LPS

孵育，分别于

6h

、

l8h

收获上清，结果肺

DC

分泌

IL-7

比脾

DC

高

3

倍，但

IL-l2

水

平极低；脾

DC

分泌

IL-l2

水平比肺

DC

高

20

倍，肺、脾

DC

分

泌

IL-l0

水平无显著差异，

l8h

结果同

6h

，

LPS

浓度为

l0

P

g/mI

时刺激作用最强，

DC

分泌细胞因子量最多。这表明肺

DC

分泌的

IL-6

和脾

DC

分泌的

IL-l2

可东南亚人体艺术 分别对初始

T

细胞分化

产生影响。

＠

除去脾

DC

中

CD8

a+DC

后

IL-6

、

l2

水平：取脾

DC

，除去其中的

CD8

a+DC

，加入

LPS

孵育

6h

，收获上清检测，

结果脾

DC

分泌

IL-l2

水平明显下降，而

IL-6

水平不变。这

表明肺

DC

能分泌高水平

IL-6

不是因为缺乏

CD8

a+DC

，而是

563

国外医学免疫学分册

2004

年第

27

卷第

6

期

FoPeignMecicaIScienceSSectionofImmunoIogy

，

NovemDeP2004

，

.6

肺

DC

所固有的特性。

＠

肺、脾

DC

对初始

T

细胞极化影响：

将肺、脾

DC

与

CD45rbhighCD4+肺

T

细胞孵育

7

天，然后用抗

CD3

和抗

CD28

抗体除去

DC

，再继续培养

T

细胞

48h

，收获上

清发现脾

DC

诱导

T

细胞比肺

DC

诱导

T

细胞分泌的

Thl

细

胞因子

IFN-

Y

高

6

倍，有显著意义；肺、脾

DC

诱导

T

细胞分

泌的

Th2

细胞因子

IL-4

水平都很高，但肺

DC

作用更强。由

此可见，脾

DC

对

T

细胞的极化作用表现为

Thl

和

Th2

两种

反应，而肺

DC

则偏向于

Th2

反应，对

Thl

反应无作用。

＠

为

明确肺

DC

分泌高水平

IL-6

在肺脏对

T

细胞偏向分化为

Th2

所起的作用，取

IL-6

基因敲除（

IL-6-/-）小鼠为实验组，

B6/

l29

小鼠为对照组功夫熊猫台词 ，取肺

DC

加入

LPS

培养

6h

，结果

IL-6-/-

小鼠肺

DC

不分泌

IL-6

，而对照组

IL-6

水平非常高；与对照

组比较，实验组肺

DC

分泌

ILl0

水平略有升高，最重要的是

IL-l2

水平，不论是与

B6/l29

小鼠还是与

BALB/c

小鼠产生

的

IL-l2

相比，

IL-6-/-小鼠分泌

IL-l2

水平都显著升高。

FACS

检测发现

IL-6-/-小鼠、

B6/l29

小鼠与

BALB/c

小鼠一

样，肺中无

CD8

a+DC

，表达的共刺激分子中

CD40

水平最低，

因此，不同种类小鼠肺

DC

表型上的差异不能解释为什么

IL-6-/-小鼠肺

DC

会分泌高水平

IL-l2

，这提示肺脏高水平

IL-6

可能下调了肺

DC

产生

IL-l2

的水平，并进而有助于抑

制肺

DC

诱导

Thl

细胞发生分化，如果没有

IL-6

所介导的抑

制作用，肺

DC

就可分泌

IL-l2

并诱导初始

T

细胞分化为

Thl

。为证明这一点，取

IL-6-/-小鼠（实验组）和

B6/l29

小鼠

（对照组）肺

DC

与

B6/l29

小鼠初始

CD45rbhigh脾

T

细胞共同

孵育，方法同上。结果实验组

Thl

细胞因子

IFN-

Y

水平明显

高于对照组，而两组

IL-4

水平无显著差异，说明尽管

IL-6

的缺乏多少会影响到

IL-6-/-小鼠肺

DC

调节

Th2

细胞分化

的能力，但是它对肺

DC

诱导

Thl

分化的增强作用更明显。

＠

IL-6

对肺、脾

DC

的影响：取

BALB/c

小鼠初始

CD45rbhig

hCD4+脾

T

细胞与脾

DC

孵育，实验组分别在

0

、

2

、

4

、

6

天加

入

lng/mIIL-6

，然后移去脾

DC

，再加入

LPS

培养

48h

收获上

清，结果在外源性

IL-6

作用下，实验组脾

DC

诱导

T

细胞分

泌

IL-4

水平显著上升（

P<0.000l

），而

IFN-

Y

水平明显下降

（

P<0.000l

），说明

IL-6

确可有效提高初始

T

细胞分化为

Th2

细胞，这样脾

DC

就转化为更多的肺

DC

。另取

BALB/c

小鼠初始

CD45rbhighCD4+脾

T

细胞与肺

DC

孵育，实验组分

别在

0

、

2

、

4

、

6

天加入

20

P

g/mI

抗

IL-6

抗体中和

IL-6

（以排除

IL-6-/-小鼠在培养过程中补偿性产生

IL-6

的可能），结果实

验组

IL-6

被中和后，肺

DC

诱导

T

细胞分泌

IFN-

Y

水平明

显升高，说明

IL-6

是肺

DC

抑制分泌

IFN-

Y

所必需的，也说明

IL-6

对肺

DC

在加强对初始

T

细胞分化为

Th2

细胞的控制中

起关键作用，这可能也是体内肺

DC

细胞偏向分化为

Th2

细

胞的机制。

（刘平李殿俊供稿）

IL-20rl

，

IL-l0r2

异源二聚体受体复合物介导

IL-26

的信号传导

IL-26

最初由

Kappe

等人从

herpesvirussaimiri

转染的

T

细

胞中克隆出来，并被命名为

AKl55

。其在活化

NK

细胞、

T

细

胞以及记忆细胞中表达，而未活化的

CD4+细胞中未见表

达。上述结果提示，

IL-26

可能影响细胞的免疫应答，因此揭

示

IL-26

的膜受体及其下游信号传导通路将有助于其作用

机制的理解和功能研究。

1

型细胞因子受体（

CrF-2

）为

rl

型和

r2

型受体组成

的异源二聚体复合物，

IL-l0

家族和

IFN

家族细胞因子通过

CrF-2

介导而发挥效应。

IL-l0

、

IL-l9

、

IL-20

、

IL-22

、

IL-24

和

IL-26

属于

IL-l0

家族，根据序列同源性，可进一步分为两组。

IL-l9

、

IL-20

和

IL-24

为一组，它们有共同的

r2

型受体链

IL-

20r2

。

IL-l0

、

IL-22

和

IL-26

为另一组。已知

IL-l0

、

IL-22

有共

同的

r2

型受体链

IL-l0r2

，因此

IL-l0r2

可能也参与构成

IL-

26

受体复常见狗狗品种 合物的

r2

链。有研究者推测

IL-26

复合受体的

rl

链可能是

IL-20rl

或

IL-22rl

。

为确证

IL-26

受体

rl

链，该作者分别构建了

pEF2-IL-

20rl/IFN-

Y

rl

和

pEF2-IL-22rl/IFN-

Y

rl

嵌合受体，然后转染

MCF-7

细胞，用

IL-26

处理后，

EMSA

法分析

IFN-

Y

rl

介导的

下游

STATl

转录因子的活化。实验结果显示

IL-20rl

为

IL-

26

复合受体

rl

链，并通过

IL-20rl

抗体中和实验、

ELISA

和

size-excIusion

色谱法进一步验证。抗体中和阻断实验表明

IL-l0r2

为

IL-26

复合受体的

r2

链。为深入研究

IL-26

结合

IL-20rl

链后激活的下游信号通路，该作者又将

IL-20rl

胞

外段用

IL-l0rl

敲除代替，构建了

FL-IL-l0rl/IL-20rl

嵌合

受体，然后转染不表达

IL-l0rl

的

HT-29

细胞。

IL-l0

刺激模

拟

IL-20rl

活化，

STATl

和

STAT3

信号通路被显著激活。这

些结果表明，

IL-26

可通过

IL-20rl

、

IL-l0r

受体复合物，激活

下游的

STATl

和

STAT3

信号传导途径而发挥作用。

rT-PCr

实验发现

IL-20rl

在皮肤、睾丸、心脏、胎盘、唾

液腺和前列腺中高表达，脑、肺、胃、胰腺、卵巢、尿道、甲状

腺和肾上腺组织中丰度表达。在脑的不同部位表达丰度也

不一样，小脑中表达最高，髓质和脊索次之。

IL-20rl

在胚胎

和成年组织中表达也有差异。有趣的是，在牛皮癣病人的

皮肤中

IL-20rl

的表达有增高现象。

最新研究发现，

IL-20

可刺激造血作用，使造血干细胞向

特异的细胞亚群分化，基于

IL-26

与

IL-20

有共有受体，

IL-26

很可能也参与了造血细胞的分化过程。

IL-l0

家族成员及其

受体的阐明，将对

IL-l0

家族配体特异性、受体共用现象以

及他们之间的相互调节关系了解得更透彻。

（张永亮曹雪涛供稿）

663

国外医学免疫学分册

2004

年第

27

卷第

6

期

ForeignMedicaISciencesSectionofImmunoIogy

，

November2004

，

.6

肺树突状细胞分泌IL-6阻止Th1介导的免疫反应

作者：刘平，李殿俊

作者单位：

刊名：

国外医学（免疫学分册）

英文刊名：FOREIGNMEDICALSCIENCESSECTIONOFIMMONOLOGY

年，卷(期)：2004,27(6)

引用本文格式：刘平.李殿俊肺树突状细胞分泌IL-6阻止Th1介导的免疫反应[期刊论文]-国外医学（免疫学分册）

2004(6)