头发光

第１８卷第５期 分析科学学报

ＶｏＩ．１８ Ｎｏ．５ ｊｏＵＲＮＡＩ ＯＦ ＡＮＡＩ ＹＴＩＣＡＩ，ＳＣＩＥＮＣＥ

２００２年１０月

０ｅ１． ２００２

文章编号：．１００６—６１４４（２００２）０５—０４０３—０３

两个典型头孢类 一内酰胺抗生素的化学发光特性比较

杨季冬 黄玉明。 刘绍璞。

（１．涪陵师范学院化学系，重庆，４０８００３；２．西南师范大学化学化工学院，重庆，４００７１５）

摘 要：研究发现Ｃｅ（ＩＶ）氧化含巯基（一ＳＨ）的化合物能产生弱发光，且Ｒｈ６Ｇ能大大

增强此弱发光，由此建立了测定头孢类 内酰胺类抗生素的ＦＩＡ—ＣＩ 分析法。在选定

的最佳条件下，经测试，几个典型的头孢类抗生素化学发光强度均在１．０×１０ ～

１．５×１０＿。ｇ／ｍＩ 范围内与其浓度呈良好的线性关系。头孢哌酮钠和头孢拉定的化学

发光特性具有突出的差异。

关键词：流动注射分析；化学发光；头孢类 内酰胺抗生素；铈（Ⅳ）；药物分析

中图分类号：０６５７．３９；Ｒ９７８．１ １ 文献标识码：Ａ

已见报道的测定ｐ一内酰胺类抗生素的化学发光体系主要有Ｉ ｕｍｉｎｏｌ体系 ‘－ ，Ｒｕ（ｂｐｙ）： 电化学

发光（ＥＣＩ ）体系以及ＫＯ。体系。在Ｓｃｈｕｎａｎ等 的工作中，利用头孢噻吩钠对鲁米诺（Ｉ ｕ）一Ｈ。Ｏ！一Ｃｏ？

体系的增敏作用测定了头孢噻吩钠；而Ｍａｒｔｉｎ等［４ 报道了用电化学发光法测定的 一内酰胺类抗生

素；后Ｓｕｎ等Ｉ６］发现溶于是８一冠一６一乙腈溶液中的ＫＯ：有极强的氧化性，能直接氧化测定一些 一内酰胺

类抗生素。

作者发现Ｃｅ（ＩＶ）直接氧化含巯基（一ＳＨ）的化合物能产生弱发光，且Ｒｈ６Ｇ能大大增强此弱发光，由

此建立了新的发光体系（Ｃｅ（ＩＶ）一Ｒｈ６Ｏ）用于测定头孢类Ｊ９一内酰胺类抗生素的ＦＩＡ—ＣＩ 分析法。考察了

五个有代表性的头孢类 一内酰胺类抗生素（头孢拉定、头孢呋辛、头孢噻肟钠、头孢曲松钠、头孢哌酮

钠），以Ｃｅ（ＩＶ）一Ｒｈ６Ｇ— 内酰胺类抗生素体系的化学发光分析测定，发现均具有分析价值的信号。其中

头孢哌酮钠和头孢拉定具有典型特性，其化学发光特性尤为敏感，发光强度差异显著。

１ 实验部分

１．１主要仪器与试剂

ＧＤ一１型微光测量仪（西安瑞迈电子科技有限公司）；Ｒ１０５ＵＨ型光电倍增管（滨松北京公司）；ＲＦ一

５４０型荧光分光光度计（１３本，岛津）。

分别准确称取适量的头孢拉定、头孢哌酮钠（均为石家庄制药集团有限公司，每ｍｇ效价为９１５单

位），配制成１０００ ｍｇ／Ｉ 的储备液，冰箱内保存；准确称取一定量的硫酸铈（分析纯，上海跃龙有色金属

有限公司），制成０．１ ｍｏｌ／Ｉ 的储备液；准确称取一定量的Ｒｈ６Ｇ（分析纯，中国上海五联化工厂），配制

成１．０×１０＿ ｍｏｌ／Ｉ 的储备液；上述溶液使用时用水稀释。其余试剂均为分析纯。水为二次去离子水。

１．２实验装置

如图１所示。

１．３ 实验步骤

１．３．１ 标准曲线的绘制 准确量取一定量的头孢类抗菌素试样储备液于２５ｍｉ 具塞比色管中，定容后

的浓度分别为０．０５、０．１、０．５、１、５、７．５、１０、１５ ｍｇ／Ｉ ，然后加入ＮａＯＨ使其定容后的浓度为０．１ ｍｏｌ／Ｉ ，

收稿日期：２００２—０２ ２８ 通讯联系人：杨季冬

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第５期 杨季冬等：两个典型头孢类ｐ一内酰胺抗生素的化学发光特性比较 第１８卷

在沸水中加热２０ ｍｉｎ使其降解，以此降解液为标准

溶液。按上述装置装好流路（阀池距为５ ｃｍ），开启蠕

动泵（单管泵速为２ ｍＩ ／ｍｉｎ），待基线稳定后进行测

定，以峰高定量。进样体积为７５ Ｉ 。

１．３．２ 样品测定 分别称取２个头孢类抗菌素的

标准对照品各２０．０ ｍｇ于小烧杯中，加１００ ｍｇ淀

粉，１００ ｍｇ葡萄糖，用水溶解，转入１Ｏ０ ｍＩ 容量瓶

中，定容。取５．０ ｍＩ 此液于１００ ｍＩ 容量瓶中，加入

ＮａＯＨ使其定容后的浓度为０．１ ｍｏｌ／Ｉ ，定容后于沸

水中加热２０ ｍｉｎ，冷却后用本法分析。

２结果与讨论

２．１化学发光光谱

用改进的ＲＦ一５４０型荧光分光光度计分别测定

Ｓ

Ｐ

回困

Ｗ

Ｆｉｇ．１ Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ ｄｉａｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｔｈｅ

ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ｃｅｐｈ—ｂａｓｅｄ ｌａｃｔａｍ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ

ｆｌ：Ｈ２Ｏ；ｂ：ｃｅｒｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ＋Ｈ ；Ｃ：Ｒｈ６Ｇ＋Ｈ ；Ｓ：

ｓａｍｐｌｅ；Ｐ：ｐｅｒｉｓｔａｌｔｉｃ ｐｕｍｐ；Ｖ：ｅｉｇｈｔ—ｗａｙ ｖａｌｖｅ；Ｆ：

ｆｌｏｗ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｅｌｌ；Ｗ：ｗａｓｔｅ ｌｉｑｕｉｄ；Ｄ：ｌｕｍｉｎｏｍｅｔｅｒ；Ｒ：

ｒｅｃｏｒｄｅｒ

了１０ ｍｍｏｌ／Ｉ 硫酸铈＋５×１０～ｍｏｌ／Ｉ Ｒｈ６Ｇ＋０．２ ｍｏｌ／Ｉ Ｈ２ＳＯ ４、１０ ｍｍｏｌ／Ｉ 硫酸铈＋５×１０

ｍｏｌ／Ｌ Ｒｈ６Ｇ＋０．２ ｍｏｌ／Ｉ Ｈ ＳＯ＾＋３０ ｍｇ／Ｉ。的头孢哌酮的降解产物和１０ ｍｍｏｌ／Ｉ 硫酸铈＋５×１０～

ｍｏｌ／Ｉ Ｒｈ６Ｇ＋０．２ ｍｏｌ／Ｉ Ｈ：ＳＯ ＋３０ ｍｇ／Ｉ 的头孢拉定的降解产物的化学发光光谱。结果表明，酸性

条件下硫酸铈氧化Ｒｈ６Ｇ产生很弱的化学发光，但是加入两个头孢的降解产物后均在５６０ ｎｍ附近出现

一个强的发光峰，所在的峰位置正好对应于Ｒｈ６Ｇ的荧光峰。

２．２适宜的反应条件的选择

２．２．１ Ｃｅ（ＳＯ ）２浓度及酸度的影响 分别在硫酸铈浓度为０．００３、０．００５、０．Ｏ１０、０．Ｏ１２ ｍｏｌ／Ｉ 测量体

系的化学发光强度。结果表明：对头孢拉定，硫酸铈浓度为０．０１０ ｍｏｌ／Ｉ 时化学发光强度为最大；而对

头孢哌酮，硫酸铈浓度为０．００５ ｍｏｌ／Ｉ 时化学发光强度为最大。分别以０．０５、０．１、０．２、０．３ ｍｏｌ／Ｉ 的硫

酸溶液作为反应介质加入硫酸铈溶液中进行该体系的化学发光测定。结果表明：对头孢拉定，硫酸浓度

为０．２ ｍｏｌ／Ｉ 时的化学发光强度为最大；而对头孢哌酮，硫酸浓度为０．１ ｍｏｌ／Ｉ 时的化学发光强度为

最大。

２．２．２ 能量转移剂及酸化条件的影响 分别试验了荧光素，硫酸喹啉，ＲｈＢ和Ｒｈ６Ｇ对体系的影响。

结果表明，唯有Ｒｈ６Ｇ对该体系的增敏作用显著。以１．０×１０～、５．０×１０～、ｌ１ ０×１０～、５．０×１０ ｍｏｌ／

Ｉ 的Ｒｈ６Ｇ作为增敏剂进行该体系的化学发光测定，结果表明，对头孢拉定、头孢哌酮，Ｒｈ６Ｇ浓度均在

５．０×１０～ｍｏｌ／ｌ 时的化学发光强度为最强。分别以０．００５、０．Ｏ１、０．０２、０．０５ ｍｏｌ／Ｉ 等～系列浓度的硫

酸溶液作为反应介质加入罗丹明６ Ｇ中进行该体系的化学发光测定。结果表明：对头孢拉定、头孢哌酮，

硫酸浓度均在０．０１ ｍｏｌ／Ｉ 时的化学发光强度为最强。

本文对头孢拉定（Ｃｅｆｒａｄｉｎｅ）和头孢头孢哌酮钠（Ｃｅｆｏｐｅｒａｚｏｎｅ Ｓｏｄｉｕｍ）的化学发光特性及其性构

进行比较。很明显，头孢哌酮钠比头孢拉定多一个硫亚甲基（一ＣＨ Ｓ一），水解时可能生成的巯基

（一ＳＨ）多一倍；另外具有孤对电子并参与共轭结构的氮原子增加了六个，故其化学发光强度大大超过

头孢拉定。

２．３体系对ＣＥＰ晌应特性

在选定条件下，两个头孢类抗菌素浓度在１．０×１０ ～１．５×１０一ｇ／ｍＩ 范围内与发光强度呈良好

的线性关系。在负高压为一８５０ Ｖ时，头孢哌酮钠的回归方程为－４１－－－＝１０６．１ ３ ｆ＋３９．９４，ｒ一０．９８１８；头

孢拉定的回归方程为ｚｌＩ＝３４．６８ Ｃ＋２１．２０，ｒ一０．９９ｌ１。

对５．０×１０－６ｇ／ｍＩ 头孢试样进行ｌ１次平行测定，得到相对标准偏差ＲＳＤ分别为２．２％、２．８％。计

算得到的检出限（３ｄ）为３．０×１０一ｇ／ｍＩ一４．０×１０～ｇ／ｍＩ

２．４ 干扰实验

对５．０×１０一ｇ／／ｉｒｉＩ 头孢试样进行干扰测定。共存物质以下倍数无干扰：８００倍的Ｋ 、Ｎａ一，２００倍

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第５期 分析科学学报 第１８卷

的糊精、淀粉，１００倍的葡萄糖、ＣａＨ、Ｈ２ＰＯ 一、ＭｇＨ，６Ｏ倍的Ｚｎ 、Ｃｕ ，３Ｏ倍的尿素、ＮＯ。一、ＮＨ 、

ＥＤＴＡ。可见在常见离子共存时，两个头孢药物的ＦＩＡ—ＣＬ测定的干扰因子水平相当，该体系的选择性

较好，可以直接进行测定。

２．５样品分析

取１．３．２中制得的模拟样品降解液２ ｍＩ ，按选定条件采用本法对其测定。分别在试样中加入标样

０．２Ｏ ｍｇ，其头孢拉定的回收率为９３．５ ；头孢哌酮钠的回收率为９５．５ 。

参考文献：

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Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔｗｏ Ｔｙｐｉｃａｌ Ｃｅｐｈ——Ｂａｓｅｄ］３－１ａｃｔａｍ

Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ Ｃ ｈｅｍｉｎｌ ｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ

ＹＡＮＧ ｊｉ—ｄｏｎｇ卜，ＨＵＡＮＧ Ｙｕ—ｍｉｎｇ ，ＬＩＵ Ｓｈａｏ—ｐｕ

（１．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｆｕｈ＇ｎｇ Ｔｅａｃｈｅｒ’ Ｃｏｌｌｅｇｅ．Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０８００３）

（２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，

Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４００７ １ ５）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ —ｌａｃｔａｍ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｐｒｏｄｕｃｅｓ ｍｅｒｃａｐｔｏ—ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｉ’ｎ ａｃｉｄｉｃ．

ｂａｓｉｃ．ａｎｄ ｎｅｕｔｒａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．Ｉｔ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｍｉｘｉｎｇ ｏｆ Ｃｅ（Ⅳ）ａｎｄ ｍｅｒｃａｐｔｏ—ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ

ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｃｉｄｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｅｓ ｗｅａｋ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｇｒｅａｔｌｙ ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｄ ｂｙ

Ｒｈ６Ｇ．Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ａ ＦＩＡ—ＣＩ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｏｆ ｃｅｐｈ—

ｂａｓｅｄ ８一ｌａｃｔａｍ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．Ｉｎ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ＣＩ ｉｎｔｅｎｓｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌ ｔＯ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｉｅｄ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ １．０×１０一 ～１．５×１０＿。ｇ／ｍ［ ．Ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ，ｔｈｅ ＣＩ ｏｆ

Ｃｅｆｅｒａｄｉｎｅ ａｎｄ Ｃｅｆｏｐｅｒａｚｏｎｅ ｓｏｄｉｕｍ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔＯ ｂｅ ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｆｌｏｗ—ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ；Ｃｅｐｈ—ｂａｓｅｄ —ｌａｃｔａｍ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ；Ｃｅｒｉｕｍ

（Ⅳ）：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ

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