肃红

第２０卷第１期

ＶｏＬ ２Ｏ，Ｎｏ．１

草业学报

ＡＣＴＡ ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥ ＳＩＮＩＣＡ

１２５～ｌ３Ｏ

２０１１年２月

甘肃红砂不同种群遗传多样性的ＩＳＳＲ分析

冯亮亮，唐红，李毅 ，马彦军，苏世平

（甘肃农业大学林学院，甘肃兰州７３００７０）

摘要：本实验采用ＩＳＳＲ分子标记技术，对甘肃地区５个种群共５Ｏ个单株的红砂遗传多样性水平和遗传结构进行

了研究。通过实验，从５Ｏ个引物中筛选出１２个重复性高，条带清晰的引物。１２条引物共检测到６９个位点，其中

多态位点有６ｏ个，多态位点比率（Ｐ）为８６．９６ 。用Ｍａｒｋｅｒ１１Ｉ作为分子量标准，检测到甘肃红砂ＰＣＲ产物的分子

量在５。Ｏ～３ ０００ ｂｐ。应用遗传多样性分析软件Ｐｏｐｇｅｎ ３２进行分析计算得出：在物种水平上，Ｓｈａｎｎｏｎ多样性指

数（Ｉ）为０．５４２ ９，Ｎｅｉ基因多样性指数（Ｈ）为０．３７９ ０；基因分化系数Ｇ 为０．０９６ ４，基因流Ｎ 为４．６８５ １，表明甘

肃红砂种群遗传分化大部分存在于种群内。在种群水平上，Ｉ为０．４８９ ３，Ｈ为０．３４２ ４。Ｐ、Ｈ及Ｉ都表明甘肃红

砂种群具有较高的遗传多样性。聚类分析还表明甘肃红砂种群的遗传距离与地理距离之间无显著的相关性；甘肃

红砂遗传多样性与其本身特性和所处不同种群有关。

关键词：甘肃红砂；遗传多样性；遗传距离

中图分类号：Ｑ９４３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４ ５７５９（２０１１）０１—０１２５－０６

ＩＳＳＲ（ｉｎｔｅｒ—ｓｉｍｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｒｅｐｅａｔ）即简单重复序列间多态性，用于检测ＳＳＲ（ｓｉｍｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｒｅｐｅａｔ）间

ＤＮＡ序列差异，是由Ｚｉｅｔｋｉｅｗｉｃｚ等＿１ 提出的建立在ＰＣＲ（聚合酶链式反应）反应基础上的一种新型分子标记技

术，ＩＳＳＲ技术是利用真核生物基因组中广泛存在的简单重复序列（ＳＳＲ）来设计引物，而不要求预知基因组序列

信息。ＩＳＳＲ标记技术和ＲＡＰＤ原理比较相似，不同之处在于ＩＳＳＲ所用引物序列来源于简单重复序列区域，比

ＲＡＰＤ引物序列长，退火温度高，反应体系更为稳定 ］。近年来已被广泛应用于品种鉴定、遗传作图、遗传多样性

等方面的研究 ］，黄福平等 应用ＩＳＳＲ标记技术构建茶树回交１代部分遗传图谱的研究，朱恭等口。。对红砂属

植物的进展进行了研究。对红砂（Ｒｅａｕｍｕｒｉａ ｓｏｏｎｇｏｒｉｃａ）的遗传多样性虽有一些报道，如张颖娟和王玉山＿１ 用

ＩＳＳＲ技术研究内蒙古濒危长叶红砂不同种群的遗传多样性，但对甘肃红砂种群遗传多样性的ＩＳＳＲ分析至今仍

未见报道。本研究以甘肃不同种源的红砂为材料，利用ＩｓｓＲ—ＰＣＲ技术对甘肃红砂种群的遗传多样性进行了

分析，为甘肃红砂的育种、繁育、保护等工作奠定理论基础。

红砂为原始花被亚纲柽柳科红砂属，超旱生盐柴类落叶小灌木植物。全世界约有１２种，我国有４个种和２

个变种口 ，以红砂为建群种的植被类型是温带荒漠的主要植被类型之一。其分布区东自鄂尔多斯西部，经阿拉

善、河西、北山山地、柴达木盆地、嘎顺戈壁，西到准噶尔和塔里木盆地边缘。分布区内年降水量６０～３００ ｍｍ、海

拔５ｏＯ～３ ２００ ｍ，主要生长在荒漠、半荒漠的山麓洪积平原、山地丘陵、剥蚀残丘、山前砂砾质和砾质洪积扇、戈

壁等口 。土壤一般为灰棕荒漠土，在荒漠灰钙土上也有生长，在盐渍化以至强盐渍化土壤上生长良好 。通过

对我国内蒙古、青海、新疆、甘肃、宁夏五省区草地资源数据统计分析，在温性荒漠草原类、温性草原化荒漠类和温

性荒漠类三大类草地中，红砂建群型、共建型或伴生型草地面积合计９ １００ ３２４ ｈｍ。，占三大类草地总面积的

１４．６８ ９／６，是重要的饲用植物和固土固沙植物，其枝、果也能人药，植丛是肉苁蓉（Ｃｉｓｔａｎｃｈｅ ｓａｌｓａ）的主要寄主之

一

。

由于红砂属植物在荒漠和荒漠草原区的广泛分布而具有重要的生态保护作用、经济价值和用途，特别近２０

多年，随着我国高度重视和加强荒漠化治理和生态建设，对红砂研究工作的高潮正在形成。近年来我国学者从形

态、生理、抗性、遗传等多层次对红砂属植物进行了研究［１ 。 。

收稿Ｅｔ期：２００９ １１—２２；改回日期：２００９—１２—２１

基金项目：国家林业局重点科研项目（２００６—３５）和甘肃省科技攻关项目（２ＧＳＯ６４ Ａ４１—００３—０１）资助。

作者简介：冯亮亮（１９８４），女，甘肃秦安人，在读硕士。Ｅ ｍａｉｌ：ｇｒｅａｃｅｆｌｌ １９８４＠１６３．ｃｏｒｎ

＊通讯作者。Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｙｉ＠ｇｓａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

１２６ ＡＣＴＡ ＰＲＡＴＡＣＵＩ ＴＵＲＡＥ ＳＩＮＩＣＡ（２Ｏ１１）

１材料与方法

１．１ 材料

材料来自张掖、武威、酒泉及兰州皋兰的种子播种生长的红砂嫩叶和兰州仁寿山采集的红砂嫩叶。材料来源

于５个不同生境类型（表１）的群落，于２００８年９月一２００９年１１月进行了研究。

表１ 材料来源及生境特点

Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎ ｏｆ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｈａｂｉｔａｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ

１．２ 方法

１．２．１ 总ＤＮＡ提取与检测 采用试剂盒提取总

ＤＮＡ，试剂盒由天根生化科技（北京）有限公司提

供。最后将ＤＮＡ溶于０．１×ＴＥ缓冲液后，４。Ｃ保

存，得到的ＤＮＡ片段用０．８ 的琼脂糖凝胶电泳和

紫外分光光度计检测浓度和纯度。保存于一２０℃冰

箱中。

１．２．２ ＩＳＳＲ反应条件建立及引物筛选 ＩＳＳＲ引

物参照加拿大哥伦比亚大学公布的第９套序列，由

天根生化科技（北京）有限公司合成。ＩＳＳＲ—ＰＣＲ

反应总体积为２０ Ｌ：２０ ｎｇ的ＤＮＡ模板，１．０

／ｌｍｏｌ／Ｌ的弓Ｉ物２ Ｌ，１０×Ｔａｑ Ｂｕｆｆｅｒ ２ Ｌ，２．５

Ｕ／ｕＬ的ＴａｑＤＮＡ聚合酶１ Ｌ，超纯ｄＮＴＰｓ ２ Ｌ，

重蒸水补齐２０ Ｌ。从５０个ＩＳＳＲ引物中筛选出ｌ２

个重复性高、条带清晰的引物（表２）用于ＰＣＲ扩增。

１．２．３ ＩＳＳＲ扩增及产物检测 扩增反应在Ｇｅｎｅ—

Ａｍｐ ＰＣＲ Ｓｙｅｓｔｅｍ ２４００上进行，扩增的反应条件：

９４＿Ｃ ５ ｍｉｎ，９４。Ｃ ３Ｏ Ｓ，５０℃４５ ｓ（退火温度依据引

表２引物序列和位点数

Ｔａｂｌｅ ２ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｌｏｃｉ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒ

ＵＢＣ８０９（ＡＧ）８Ｇ

ＵＢＣ８１０（ＧＡ）８Ｔ

ＵＢＣ８１１（ＧＡ）８Ｃ

ＵＢＣ８ｌ２（ＧＡ）８ Ａ

ＵＢＣ８１７（ＣＡ）８Ａ

ＵＢＣ８２５（ＡＣ）ＲＴ

ＵＢＣ８２７（ＡＣ）８Ｇ

ＵＢＣ８３５（ＡＧ）８ＹＣ

ＵＢＣ８３６（ＧＡ） ＹＡ

ＵＢＣ８４Ｏ（ＧＡ）ＲＹＴ

ＵＢＣ８４１（ＧＡ）８ ＹＣ

ＵＢＣ８８１（ＧＧＧＴ）３

物变化），７２℃９０ Ｓ，７２ Ｃ ５ ｍｉｎ，３８个循环。产物检测：１．８ 琼脂糖凝胶在１×ＴＡＥ电泳缓冲液中电泳，电压：

８Ｏ Ｖ，电泳３ ｈ后，将胶片在含溴化乙锭的水溶液中浸泡染色１５ ｍｉｎ，在紫外凝胶成像仪上观察照相。

１．２．４数据计算方法与统计处理 统计稳定且易于辨认的差异性条带数，即按同一位置上扩增产物条带的有无

进行统计有带的（包括反复出现的弱带）标记为“１”，无带的标记为“０”。从而获得０，１矩阵。应用Ｐｏｐｇｅｎ３２软

件计算多态位点数、物种水平上和种群水平上的多态位点比率（ＰＰＬ）、Ｓｈａｎｎｏｎ信息多样性指数（Ｉ）、Ｎｅｉ基因遗

传多样度指数（Ｈ）、群体问基因分化系数（Ｇ ）、基因流（Ｎ ）、种群问的遗传距离和相似一致度，采用ＵＰＧＭＡ进

行聚类分析，获得聚类图。

１）多态位点百分率（ＰＰＬ）：多态位点百分率ＰＰＬ是反映居群内变异水平的重要指标之一，对某一位点而言，

变异个体的频率大于０．０１时，即为多态位点。多态位点比例高，说明遗传多样性丰富。

第２Ｏ卷第１期 草业学报２０１１年

ＰＰＬ一（ｋ／ｎ）Ｘ １Ｏ０

式中，ｋ为多态位点数目；”为所测定位点的总数。

２）Ｓｈａｎｎｏｎ信息多样性指数（Ｉ）：用来计算群体的遗传多样性，计算公式为：

Ｊ一一∑Ｐ ｌｏｇ２

式中， 是第ｉ个位点出现的频率。

３）Ｎｅｉ＇Ｓ基因遗传多样度：Ｎｅｉ将总群体的遗传多样性（Ｈ ）划分为群体内遗传多样性（Ｈ ）和群体间遗传多

样性（Ｄ ）：

Ｈ 一Ｈ 十Ｄ

Ｈ ＝＝∑（１一∑ｑ ）／ｎ

式中，ｑ 为第ｉ个位点上的等位基因数，１＂／为检测到的位点数，这里的Ｈ 为总公式，Ｈ ，Ｈ 均用此公式计算。

４）群体间基因分化系数（Ｇ ）：Ｇ 是群体间的遗传多样性占总遗传多样性的比例。

Ｇ 一（Ｈ 一Ｈ ）／Ｈ 一Ｄ ／Ｈ

５）基因流（Ｎ ）：Ｎ 为根据遗传分化系数估算的一数值。

Ｎ ＝０．５（１一Ｇ ）／Ｇ

６）遗传相似系数、遗传一致度（Ｉ）：２个亲缘关系越近的居群，在所有的位点上的等位基因频率越相近，遗传

一致度接近１；２个亲缘关系越远的居群，在所有的位点上所有的等位基因频率差别越大，遗传一致度接近０。

一１料｜

Ｊ 一（１／ｎ）∑∑Ｘ

Ｊ 一（１／ｎ）∑∑Ｙ

式中，ｘ 为ｘ群体第ｉ个位点第Ｊ个等位基因的频率，ｙ 为ｙ群体第ｉ个位点第 个等位基因的频率，．，ｘ，．， 和

分别是所有位点上Ｊ ，Ｊｙ和Ｊ 的算术平均数。这里Ｊ 一∑ｘ ，Ｊ 一∑ｙ ， 一∑ｘ Ｙ ，ｘ ，Ｙ 分别是ｘ，ｙ

群体中的第ｉ个等位基因。

７）Ｎｅｉ’Ｓ遗传距离（Ｄ）：

Ｄ＝＝——Ｉｎ／

式中，Ｊ为遗传一致度。

２结果与分析

２．１ ＩＳＳＲ扩增的多态性位点比率

１２个引物共扩增出６９个位点，其中多态位点有６０个，多态位点比率为８６．９６ ，物种水平上达到７７．６８

（表３）。ＰＣＲ产物的分子量在５００￣３ ０００ ｂｐ，不同引物扩增的多态位点数从４到７不等，形成了带型丰富、片断

大小及其组合不同的电泳图谱（图１和２）。这说明了甘肃红砂具有较高的遗传多样性。

４ ５００ｂｐ

３ Ｏ００ｂｐ

２ Ｏ００ｂｐ

１ ２００ｂｐ

８００ｂｐ

５００ｂｐ

４ ５００ｂｐ

３ ０００ｂｐ

２０００ｂｐ

１ ２００ｂｐ

８００ｂｐ

５００ｂｐ

图１ 引物ＵＢＣ８４０在武威种群中的扩增结果 图２ 引物ＵＢＣ８１２在酒泉种群中的扩增结果

Ｆｉｇ．１ ＩＳＳＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ Ｆｉｇ．２ ＩＳＳＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ

ＷＷ ｗｉｔｈ ｐｒｉｍｅｒ ＵＢＣ８４０ ＪＱ ｗｉｔｈ ｐｒｉｍｅｒ ＵＢＣ８１２

１～１０：红砂材料Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｏｆ Ｒ．ｓｏｏｎｇｏｒｉｃａ；Ｍ：分子量标准Ｍａｒｋｅｒ［ＩＩ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ ＭａｒｋｅｒｌｌＩ

１２８ ＡＣＴＡ ＰＲＡＴＡＣＵＩ ＴＵＲＡＥ ＳＩＮＩＣＡ（２０ｌ１）

通过统计分析，得出分析结果见表３，４和５，各种群的多态位点比率差异较大（表３），其中ＪＱ的多态位点比

率最高，达到８１．１６ ，ＧＩ 和ＲＳ种群的最低（７５．３６ ），这５个种群的多态性高低为：ＪＱ＞ｗｗ＞ＺＹ＞ＧＩ 和

ＲＳ。

２．２甘肃红砂的遗传变异和遗传分化

计算得出各种群的Ｓｈａｎｎｏｎ指数（Ｉ）的多态性在０．４７０ １～０．５１５ ２，平均为０．４８９ ３（表３），其中ＪＱ的最高

（０．５１５ ２），ＧＬ的最低（Ｏ．４７０ １），各种群的Ｉ大小顺序为：ＪＱ＞ｗｗ＞ＺＹ＞ＲＳ＞ＧＬ。Ｈ的多态性在０．３２８ １～

０．３６１ ７，平均为０．３４２ ４，其中ＪＱ的最高（０．３６１ ７），ＧＬ的最低（０．３２８ １），各种群的大小顺序依次为：ＪＱ＞ｗｗ

＞ＺＹ＞ＲＳ＞ＧＬ，综上，Ｐ、Ｉ与Ｈ的计算结果基本是一致的。在物种水平上，Ｉ为０．５４２ ９，Ｈ为０．３７９ ０。２种

多样性指标及多态位点比率指标都表明ＧＬ具有相对最高的遗传多样性。通过Ｐｏｐｇｅｎ ３２软件分析，５个种群

间的Ｇ 及Ｎ 结果见表４，５个种群总的遗传多样度Ｈ 一０．３７９ ０，种群内遗传多样度Ｈ 一０．３４２ ４，Ｇ 为

０．０９６ ４，即９．６４ 的遗传变异存在于种群间，９Ｏ．３６ 的遗传变异存在于种群内。从表４中可看出，引物不同其

遗传分化系数所占的比例不同，其中引物ＵＢＣ８０９的最高，占到１５．５４ ，引物ＵＢＣ８１２的最低，为４．６３ 。基于

种群间遗传分化系数计算的基因流Ｎ ＝＝＝４．６８５ １。

表３甘肃红砂种群的遗传多样性

Ｔａｂｌｅ ３ Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｆｉｖｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｇａｎｓｕ Ｒｅａｕｍｕｒｉａ

表４甘肃红砂种群的遗传分化

Ｔａｂｌｅ ４ Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｓ ａｍｏｎｇ ｆｉｖｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｇａｎｓｕ Ｒｅａｕｍｕｒｉａ

平均Ｍｅａｎ

标准差Ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ

第２Ｏ卷第１期 草业学报２０１１年 １２９

２．３ 甘肃红砂不同种群的遗传距离与聚类分析

５个种群间遗传一致度较高，平均为０．９３０ ８，其

中ＺＹ与ＪＱ间的相似系数最高，为０．９６３ ２，即这２个

种群具有最高的遗传一致性，较高的遗传多样性；而

ＪＱ与ＲＳ间的相似系数最低，为０．９０６ ４，即这２个种

群具有相对低的遗传一致性，相对较低的遗传多样性。

５个种群的平均遗传距离为０．０４７ ８，其中ＪＱ与ＺＹ

间的遗传距离最小，为０．０３７ ５。ＲＳ与ＪＱ间的遗传

距离最大，为０．０９８ ２，同样说明了ＺＹ与ＪＱ两个种群

具有相对高的遗传多样性，ＪＱ与ＲＳ具有相对低的遗

传多样性。

根据种群间的遗传距离，采用ＵＰＧＭＡ对５个种

群进行聚类绘图（图３），大体分为三类群，ＺＹ首先和

ＪＱ相聚，再与ｗｗ相聚，可认为一类群。ＧＬ与其聚

为第２类群，最后与ＲＳ聚为第３类群。Ｍａｎｔｅｌ检验

结果表明，遗传距离与地理距离没有显著相关性。

３讨论

３．１甘肃红砂不同种群的遗传多样性

Ｓｈａｎｎｏｎ指数是根据Ｋｉｎｇ和Ｓｃｈａａｌ方法计算群

体内和群体问的遗传多样性，其指数越大，表明群体的

遗传多样性越大 。试验表明，ＩＳＳＲ技术在甘肃５

个红砂种群遗传多样性研究中确定的ＩＳＳＲ反应体系

具有稳定性和重复性；筛选出１２个重复性高，条带清

晰的引物共检测到６９个位点，其中多态位点有６Ｏ个，

表５甘肃红砂种群间遗传一致度和遗传距离

Ｔａｂｌｅ ５ Ｇｅｎｅｔｉｃ ｉｄｅｎｔｉｔｙ ａｎｄ ｄｉｓｔａｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ

ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｇａｎｓｕ Ｒｅａｕｍｕｒｉａ

种群Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ＺＹ ＷＷ ＪＱ ＧＬ ＲＳ

注：上三角是遗传一致度，下三角是遗传距离。

Ｎｏｔｅ：Ｎｅｉ’Ｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｉｄｅｎｔｉｔｙ（ａｂｏｖｅ ｄｉａｇｏｎａ１）ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｓｔａｎｃｅ

（ｂｅｌｏｗ ｄｉａｇｏｎａ）．

０ ９９１ ２８＋＿一…一ＺＹ

０ ５７３ ｌ５＋－一～一１

＋～……一２＋一……’一ＪＱ

１ ０６６ ３５ １ １

ａｒ－～……３ ＋＿………一…一ＷＷ

！ ！

｛一～一…一……一…～…………一一ＲＳ

图３甘肃５个红砂种群的遗传聚类图

Ｆｉｇ．３ Ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ ｏｆ ｆｉｖｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｇａｎｓｕ Ｒｅａｕｍｕｒｉａ

物种水平上，多态位点比率达到７７．６８ ，Ｉ为０．５４２ ９，Ｈ为０．３７９ ０；在种群水平上，多态位点比率为８６．９６ ，Ｉ

为０．４８９ ３，Ｈ为０．３４２ ４。各种群的多态位点比率差异较大，其中ＪＱ的多态位点比率最高，达到８１．１６ ，ＧＬ

和ＲＳ的最低（７５．３６ ）；各种群Ｉ的多态性在０．４７０ １（ＧＬ）～０．５１５ ２（ＪＱ），Ｈ在０．３２８ １（ＧＬ）～０．３６１ ７（ＪＱ）。

多态位点比率、Ｉ与Ｈ的计算结果基本一致，都说明甘肃５个红砂种群具有较高的遗传多样性。且各种群的大小

顺序依次为：ＪＱ＞ｗＷ＞ＺＹ＞ＲＳ＞ＧＬ。

３．２甘肃不同种群的遗传分化

Ｗｒｉｇｈｔｌ】鲴认为：当种群Ｎ ＞１时，存在一定的基因流动。本研究得出Ｎ 一４．６８５ １＞ｌ，说明甘肃５个红砂

种群问存在一定的基因流动，防止了遗传漂变引起的遗传分化。根据Ｈ计算的５个种群的Ｈ 一０．３７９ ０，Ｈ 一

０．３４２ ４，Ｇ 在０．０４６ ３～０．１５５ ４，平均为０．０９６ ４，即４．６３ ～１５．５４ 的遗传变异存在于种群间，８４．４６ ～

９５．３７ 的遗传变异存在于种群内。从遗传分化系数可看出种群间分化程度远远低于近交物种水平。

种群聚类图显示，遗传距离均较近。这与种群间存在一定的基因流有关。从聚类图也可以看出，ＺＹ首先和

ＪＱ相聚，再与ｗｗ相聚，可认为是第１类群。ＧＬ再与其聚为第２类群，最后与ＲＳ聚为第３类群。这可能与种

群所处生境条件、物种在群落中的地位等有关，造成有的种群的遗传距离与其他种群较远。影响种群遗传结构的

因素有很多，如繁育系统、分布范围、生境条件、基因流等，其中基因流被认为是种群遗传结构均质化的主要因素

之一，具有广泛基因流的物种往往比具有有限基因流的物种遗传分化小。Ｍａｎｔｅｌ检验结果表明，遗传距离与地

理距离没有显著相关性。

红砂以有性繁殖为主，雌雄同株，有利于维持个体和种群的遗传多样性，同时促进种群内基因交流，减少遗传

漂变。红砂可以在恶劣的环境中进化并积累了较多的遗传变异，以适应各种环境压力。各种群遗传多样性水平

的不同，与其种群特征有关。ＪＱ相对较高的遗传多样性水平与保护区内的小生境相关，相对适宜的小气候、保护

区内的种群较大、个体数较多可能有利于传粉和繁殖，干扰少而资源保存的较好有利于维持较高的多样性。

∞ ，。 。

９ ９ ９ ９ ＊

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９ ９ ９ ＊ Ｏ

Ｏ Ｏ ０ ＊ ０

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州

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ＦＥＮＧ Ｉ ｉａｎｇ—ｌｉａｎｇ，ＴＡＮＧ Ｈｏｎｇ，ＬＩ Ｙｉ，ＭＡ Ｙａｎ—ｉｕｎ，ＳＵ Ｓｈｉ—ｐｉｎｇ

（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ｏｆ Ｇａｎｓｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００７０，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ５ Ｒｅａｕｍｕｒｉａ ｓｏｏｎｇｏｒｉｃａ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ Ｇａｎｓｕ（ｔｏｔａｌ

ａｂｏｕｔ ５Ｏ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ），ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ＩＳＳＲ（ｉｎｔｅｒ ｓｉｍｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｒｅｐｅａｔ）ｍａｒｋｅｒｓ．Ｔｗｅｌｖｅ ｈｉｇｈｌｙ ｓｔａｂｌｅ

ａｎｄ ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ ＩＳＳＲ ｐｒｉｍｅｒｓ（ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ５０ ｐｒｉｍｅｒｓ ｔｅｓｔｅｄ）ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ６９ １ｏｃｉ ｏｆ ｗｈｉｃｈ ６Ｏ ｗｅｒｅ ｐｏｌｙ—

ｍｏｒｐｈｉｃ（８６．９６ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａ１）．Ｔｈｅ ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ５００ ｔＯ ３ ０００ ｂｐ．Ａｔ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ｌｅｖｅｌ，ｔｈｅ

Ｓｈａｎｎｏｎ ｉｎｄｅｘ（Ｉ）ｗａｓ ０．５４２ ９，Ｎｅｉ’Ｓ ｇｅｎｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘ（Ｈ）ｗａｓ ０．３７９ ０，ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｇｅｎｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉ—

ａｔｉｏｎ（Ｇ。．）ｗａｓ ０．０９６ ４，ａｎｄ ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｆｌｏｗ（Ｎ ）ｗａｓ ４．６８５ １．Ｔｈｅ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐｏｐｇｅｎ ３２ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ

ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈｉｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｔｈａｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ａｔ ｔｈｅ ｐｏｐｕ—

ｌａｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌ，Ｉ ａｎｄ Ｈ ｗｅｒｅ ０．４８９ ３ ａｎｄ ０．３４２ ４，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａ１ｌ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｒ．ｓｏｏｎｇｏｒｉｃａ

ｈａｓ ａ ｈｉｇｈ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ Ｇａｎｓｕ．Ｃｌｕｓｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｎｏ ｄｉｒｅｃｔ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｓｔａｎｃｅ

ａｎｄ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｄｉｓｔａｎｃｅ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ ｔｈａｔ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｒ．ｓｏｏｎｇｏｒｉｃａ ｉｎ Ｇａｎｓｕ ｗａｓ ｐｏｓｓｉｂｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ

ｓｐｅｃｉｅｓ ｔｒａｉｔｓ ａｎｄ ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｒｅａｕｍｕｒｉａ ｓｏｏｎｇｏｒｉｃａ；ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｓｔａｎｃｅ

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