显微镜的使用

更新时间:2023-03-03 19:06:10 阅读: 评论:0

油污-屈直

显微镜的使用
2023年3月3日发(作者:可乐煲姜的做法)

显微镜的使用

利用自然光源镜检时,最好用朝北的光源,不宜采用直射阳光;利用

人工光源时,宜用日光灯的光源。

镜检时身体要正对实习台,采取端正的姿态,两眼自然张开,左眼观

察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标

本视野。右手记录、绘图。

镜检时载物台不可倾斜,因为当在五套载物台倾斜时,液体或油易流

出,既损坏了标本,又污染载物台,也影响检查结果。

镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便

不漏检,不重复。

显微镜的重光为对光,接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本

时,光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等,均为自然光

状态的物体,有大有小,色泽有深有浅,有的无色透明,而低倍、高倍接

物镜转换较多,故须随着镜检时对不同标本和要求,需要随时调节焦距和

光线,这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下,染色标本光线宜强,

无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强。

1.对光:

(1)将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。

(2)拨动反光镜,调节至视野最亮无阴影。反光镜有平、凹两面,光

源强时用平面,较暗时用凹面,需要强光时,将聚光器提高,光圈放大;

需要弱光时,将聚光器降低,或光圈适当缩小。

(3)将待观察的标本置载物台上,转动粗调节器使镜筒下降至接物镜

接近标本。于转动粗调节器的同时,须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本

之间的距离。

(4)左眼于接目镜观察,同时左手转动粗调节,使镜筒徐徐上升以调

节焦距,使视野内的物象看到上时即停,再调微调节器,至标本清晰为止。

2.接物镜的使用及光线的调节:

显微镜一般具有三个接物镜,即低倍、高倍及油镜,固定于接物镜转

换盘孔中。观察标本时,先使用低倍接物镜,此时,视野较大,标本较易

查出,但放大倍数较小(一般放大100倍),较小的物体不易观察其结构。

高倍接物镜放大的倍数较大(一般放大400倍),能观察微小的物体或结

构。

寄生虫的蠕虫卵,微丝蚴,原虫的滋养体及包囊,昆虫的幼虫,均使

用低、高倍镜。组织细胞内的原虫,则使用油镜。使用低、高倍镜观察,

如在低倍镜下不能准确鉴定所见的物体或其内部构造时,则转高倍镜观察。

使用油镜观察,一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。

3.低倍、高倍、油镜头的识别:

(1)标明放大倍数10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。

(2)低倍镜最短,高倍镜较长,油镜最长。

(3)镜头前面的镜孔低倍镜最大,高倍镜较大,油镜最小。

(4)油镜头上常刻有黑色环圈,或“油”字。

4.低倍镜换高倍镜的使用方法:

(1)光线对好后,移动推进器寻找需要观察的标本。

(2)如标本的体积较大,不能清楚查见其构造因而不能确认时,则将

标本移至视野中央,再旋转高倍接物镜于镜筒下方。

(3)旋转微调节器至物象清晰为止。

(4)调节聚光器及光圈,使视野内的物象达到最清晰的程度。

低倍镜的使用方法

(1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右

手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜

座后端距桌边7厘米为宜,便于操作。

(2)对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜

对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。

调节为较大光圈并将反光镜转向光源,左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时

调节反光镜偏转角度,直到视野内出现明亮光斑为止。

(3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一

面朝上,切不可放反,用压片夹夹住,然后移动玻片,将所要观察的部位

调到视野范围内。

(4)调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢地

下降至物镜距标本片约5毫米处,应注意在下降镜筒时,切勿在目镜上观

察。一定要从右侧看着镜筒下降,以免下降过多,造成镜头或标本片的损

坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转

动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。

如果物象不在视野中心,可移动玻片,将所要观察的部位调到视野范

围内。(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野

内的亮度不合适,可通过调整光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜

台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象,说明此次操作失败,则应

重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台。

高倍镜的使用方法

(1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,

同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。

(2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并

从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低

倍镜的焦距没有调好,应重新操作。

(3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能

见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5-1圈,

即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)

如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换

玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可

取下玻片标本。

想让像变大就要使物镜靠近物体,目镜远离物镜一些,像变小则反

1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。

(2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。

(3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。

(4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转

换器。

(5)物镜转换器(旋转器)简称“旋转器”:接于棱镜壳的下方,可自

由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不

同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准

通光孔中心,光路接通。转换物镜后,不允许使用粗调节器,只能用细调

节器,使像清晰。

(6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片

标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器

(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调

节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

(7)调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方

向的移动。

①粗调节器(粗准焦螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快

速和较大幅度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现

于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。

②细调节器(细准焦螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢

地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标

本的不同层次和不同深度的结构。

1)目镜:装在镜筒的上端,通常备有2-3个,上面刻有5×、10×或15×

符号以表示其放大倍数,一般装的是10×的目镜。

(2)物镜:装在镜筒下端的旋转器上,一般有3-4个物镜,其中最

短的刻有“10×”符号的为低倍镜,较长的刻有“40×”符号的为高倍镜,

最长的刻有“100×”符号的为油镜,此外,在高倍镜和油镜上还常加有一

圈不同颜色的线,以示区别。

显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积,如物

镜为10×,目镜为10×,其放大倍数就为10×10=100。

显微镜目镜长度与放大倍数呈负相关,物镜长度与放大倍数呈正

相关。即目镜长度越长,放大倍数越低;物镜长度越长,放大倍数越高。

一)正置显微镜

1、安放

右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳,要选择临

窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧,距离桌边3~4厘米处。

2、清洁

检查显微镜是否有毛病,是否清洁,镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要

用擦镜纸擦拭,如有胶或粘污,可用少量二甲苯清洁之。

3、对光

镜筒升至距载物台1~2厘米处,低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜,光线

强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动。

若使用的为带有光源的显微镜,可省去次步骤,但需要调节光亮度的旋钮。

4、安装标本

将玻片放在载物台上,注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定,转

动平台移动器的旋钮,使要观察的材料对准通光孔中央。

5、调焦

调焦时,先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒,并从侧面仔细观察,直到物镜贴近玻

片标本,然后左眼自目镜观察,左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本物

像时停止,再用细调焦旋钮回调清晰。

操作注意:不应在高倍镜下直接调焦;镜筒下降时,应从侧面观察镜筒和标本间

的间距;要了解物距的临界值。

若使用双筒显微镜,如观察者双眼视度有差异,可靠视度调节圈调节。另外双筒

可相对平移以适应操作者两眼间距。

6、观察

若使用单筒显微镜,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时

左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不

重复。

光强的调节:一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱;低

倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外,虹彩光

圈的调节也十分重要。

(1)低倍镜观察

观察任何标本时,都必须先使用低倍镜,因为其视野大,易发现目标和确定要

观察的部位。

(2)高倍镜观察

从低倍镜转至高倍时,只需略微调动细调焦旋钮,即可使物像清晰。

使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮,否则易压碎盖玻片并损伤镜头。

转动物镜转换器时,不可用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,

转换器螺纹受力不均匀而破坏,最后导致转换器就会报废。

(3)油镜的观察

先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后,再换油镜观察。油镜观察前,

应将显微镜亮度调整至最亮,光圈完全打开。

使用油镜时,先在盖玻片上滴加一滴香柏油(镜油),然后降低镜筒并从侧面仔

细观察,直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本,然后用目镜观察,并用细调焦旋

钮抬升镜筒,直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。

香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油,并

再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。

7、结束操作

观察完毕,移去样品,扭转转换器,使镜头V字型偏于两旁,反光镜要竖立,

降下镜筒,擦抹干净,并套上镜套。

若使用的是带有光源的显微镜,需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗,再

关闭电源按钮,以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯

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