显微镜的构造与操作
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显微镜的构造与操作
一、显微镜的主要构造
普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部
分。
图1
(一)、机械部分
1、镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。
2、镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。
3、镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。
4、镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
“160”表示观察时,机械筒长为160mm。
5、物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4
个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰
叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。
6、镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,
中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),
推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片
标本作左右、前后方向的移动。
7、调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移
动。
(1)粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较
大辐度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,
通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。
(2)细调节器(细螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升
降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同
层次和不同深度的结构。
(二)、照明部分
装在镜台下方,包括反光镜,集光器。
1、反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用
是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适
于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。
2、集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其
作用是把光线集中到所要观察的标本上。
(1)聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的
照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以
调节视野中光亮度的强弱。
(2)光圈(虹彩光圈):在聚光镜下方,由十几张金属薄片组成,其外侧伸
出一柄,推动它可调节其开孔的大小,以调节光量。
(三)、光学部分
1、目镜:装在镜筒的上端,通常备有2-3个,上面刻有5×、10×或15
×符号以表示其放大倍数,一般装的是10×的目镜。
2、物镜:装在镜筒下端的旋转器上,一般有3-4个物镜,其中最短的刻
有8×或10×的物镜称为低倍镜(而将5×以下的叫做放大镜);将较长的刻有
40×或45×的称为高倍镜;将最长的刻有90×或100×的称为油镜(这种镜头
在使用时需浸在镜油中)。为了醒目,有些物镜上还标有某种颜色的环、不同
颜色的环的物镜代表不同的放大倍数。“Oil”表示油镜。
在物镜上,常刻有表示放大倍数和数值孔径,如10/、40/及100/等,其
中的10、40、100均表示该物镜的放大倍数。、、表示镜口率.),反映该镜头
分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高,各物镜的镜口率如下表:
物镜镜口率.)工作距离(mm)
10×
40×
100×
表1
表中的工作距离是指显微镜处于工作状态(物象调节清楚)时物镜的下表面
与盖玻片上表面之间的距离,物镜的放大倍数愈大,它的工作距离愈小。例如
有些物镜上刻有对镜筒长度和盖玻片厚度的数值,160/表示物镜的长度为
160mm,而盖玻片的厚度为。160/0:表示机械镜筒长度为160mm;“0”
表示无盖玻片。有些物镜刻有160/-:表示机械镜筒长度为160mm。“-”表
示可有可无盖玻片。
显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积,如物镜为
10×,目镜为10×,其放大倍数就为10×10=100。
二、显微镜的使用方法
(一)、低倍镜的使用方法
1、取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握
镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌
边1-2寸为宜,便于坐着操作。
2、对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜
台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光
圈,上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时
调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。
3、放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝
上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的
部位调到通光孔的正中。
4、调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物
镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从
右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同
时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓
慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。
如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向
与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光
器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作
距离(>而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目
地上升镜台。
(二)、高倍镜的使用方法
1、选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时
把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。
2、转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面
进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距
没有调好,应重新操作。
3、调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一
个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约-1圈,即可获得清晰
的物象(切勿用粗调节器!)
如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片
标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片
标本。
(三)、油镜的使用方法
所谓油镜是指用放大100倍的物镜观察标本的标本的玻片上先滴一滴油然
后进行观察。所用的油通常是香柏油或石蜡油。为什么要滴一滴呢因为放大
100倍的物镜其镜孔很小,光线通过标本进入物镜的量也相应减少,再加上玻
片和空气的折光率不同,使部分光线产生折射而损失掉,进一步降低光线进入
物镜的量,使事业变的暗淡、图象不清。而香柏油等与玻片的折射率相似,防
止了进入物镜光线的折射,所以能起到增加视野亮度、提高分辨率的作用。
1、在使用油镜之前,必须先经低、高倍镜观察,然后将需进一步放大的部
分移到视野的中心。
2、将集光器上升到最高位置,光圈开到最大。
3、转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴
香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距
离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。
4、用左眼观察目镜,并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。
如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:低倍
→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按:低倍→油镜程序,不得经高倍镜,
以免油沾污镜头。
5、油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦
去,然后再用干擦镜纸擦干净。
三、显微镜使用的注意事项
(一)、正确取用的问题
使用显微镜前,首先要把显微镜的目镜和物镜安装上去。目镜的安装较为
简单,主要的问题在于物镜的安装,由于物镜镜头较贵重,万一安装时螺纹没
合好,易摔到地上,造成镜头损坏,所以为了保险起见,强调操作者在安装物
镜时要用左手食指和中指托住物镜,然后用右手将物镜装上去,这样即使没安
装好,也不会摔到地上。使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内,其步骤是:
取下标本片,转动旋转器使镜头离开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集
光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,放回实
验台柜内。最后填写使用登记表。(注:反光镜通常应垂直放,但有时因集光器
没提至应有高度,镜台下降时会碰坏光圈,所以这里改为平放)
(二)、正确对光的问题
对光是使用显微镜时很重要的一步,有些操作者在对光时,随便转一个物
镜对着通光孔,而不是按要求一定用低倍镜对光。转动反光镜时喜欢用一只
手,往往将反光镜扳了下来。所一定要强调用低倍镜对光,当光线较强时用小
光圈、平面镜,而光线较弱时则用大光圈、凹面镜,反光镜要用双手转动,当
看到均匀光亮的圆形视野为止。光对好后不要再随便移动显微镜,以免光线不
能准确地通过反光镜进入通光孔。
(三)、正确使用准焦螺旋的问题
使用准焦螺旋调节焦距,找到物象可以说是显微镜使用中最重要的一步,
也是操作者感觉最为困难的一步。操作者在操作过程中极易出现以下错误:一
是在高倍镜下直接调焦;二是不管镜筒上升或下降,眼睛始终在往目镜中看视
野;三是不了解物距的临界值,物距调到2—3厘米时还在往上调,而且转动
准焦螺旋的速度很快。前两种错误结果往往造成物镜镜头抵触到装片,损伤装
片或镜头,而第三种错误则是操作者使用显微镜时最常见的一种现象。针对以
上错误,操作者要注意,调节焦距一定要在低倍镜下调,先转动粗准焦螺旋,
使镜筒慢慢下降,物镜靠近载玻片,但注意不要让物镜碰到载玻片,在这个过
程中眼睛要从侧面看物镜,然后用左眼朝目镜内注视,并慢慢反向调节粗准焦
螺旋,使镜筒徐徐上升,直当看到物像为止。一般显微镜的物距在1厘米左
右,所以如果物距已远超过1厘米,但仍未看到物像,那可能是标本未在视野
内或转动粗准焦螺旋速度过快,此时应调整装片位置,然后再重复上述步骤,
当视野中出现模糊的物像时,就要换用细准焦螺旋调节,只有这样,才能缩小
寻找范围,提高找到物像的速度。
(四)、物镜转换的问题
使用低倍镜后换用高倍镜,操作者往往喜欢用手指直接推转物镜,认为这
样比较省力,但这样容易使物镜的光轴发生偏斜,原因是转换器的材料质地较
软,精度较高,螺纹受力不均匀很容易松脱。一旦螺纹破坏,整个转换器就会
报废。操作者应手握转换器的下层转动板转换物镜。
(五)、正确用眼的问题
用显微镜观察物体时,应双眼同时睁开,左眼往目镜内注视。但有不少操
作者往往做不到这一点,喜欢用手捂住右眼或干脆闭上右眼,这是不符合实验
的观察要求的,这种不良习惯会造成左眼疲劳,同时也不能做到边观察边画
图。应该注意,左眼要尽量贴近目镜,右眼试图向视野内注视,如此反复训
练,就会达到双目同时睁开观察的要求。或者也可以通过做以下练习:睁开双
眼,用一张纸或手掌竖立在两眼之间,鼻子跟前,使左右眼不能互看对侧一
边,然后有意识地先看左边,再看右边,如此3—5次,每天早晚各做一遍,
不到一星期便可学会。
本文发布于:2023-03-01 00:18:56,感谢您对本站的认可!
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