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  • overlap_pcr原理解释
        overlap pcr  重组PCR      重组PCR的应用是非常广泛的,他的原理其实很简单:比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因,你要将他们连接到一起,我们首先想到的方法当然是借助于酶切的方法,但有时我们并不一定能构找到合适的酶切位点,或者说我们找到了酶切位点,但这种酶非常特殊或者又很贵,我们可能只用一次,这
    时间:2023-07-15  热度:20℃
  • overlap_pcr原理解释
        七点半的英语overlap pcr  重组PCR      重组PCR的应用是非常广泛的,他的原理其实很简单:比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因,你要将他们连接到一起,我们首先想到的方法当然是借助于酶切的方法,但有时我们并不一定能构找到合适的酶切位点,或者说我们找到了酶切位点,但这种酶非常特殊或者又很贵,我们可能
    时间:2023-06-24  热度:14℃
  • 酶切位点
      酶切位点(Restriction Enzyme cutting site):DNA上一段碱基的特定序列,限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DNA序列切成两段。   可能存在同尾酶,不同酶的识别序列不同,   有的可能能识别多个酶切位点比如STY1识别序列有WWPCR引物设计时酶切位点的保护碱基表    不同内切酶对识别位点以外最少保护碱
    时间:2023-05-22  热度:23℃
  • 限制性内切酶酶切位点及保护碱基
    寡核苷酸近末端位点的酶切(Cleavage Clo to the End of DNA Fragments (oligonucleotides)) 为什么要添加保护碱基?在分子克隆实验中,有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点,用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开,因此在设计PCR引物时,人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外
    时间:2023-05-15  热度:16℃
  • 保护碱基
    保护碱基限制性内切酶识别特定的DNA序列,除此之外,酶蛋白还要占据识别位点两边的若干个碱基,这些碱基对内切酶稳定的结合到DNA双链并发挥切割DNA作用是有很大影响的,被称为保护碱基。 在分子克隆实验中,有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点,用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开,因此在设计PCR引物时,人为的在酶切位点序列的5‘端外
    时间:2023-05-15  热度:28℃
  • 设计引物如何设计酶切位点
    经常有战友对一些常见问题在丁香园反复问答了很多遍,所以希望园子中一些战友,特别是低分与0分战友,能将好的帖子归纳总结了一下,并结合自己的经验整理,一方面这是个学习提高的过程,另一方面也能帮助大家解决这方面的问题。同时如有不当或不完善的地方,希望各位战友不断补充,争取有朝一日我们能把园子里战友的经验系统整理,给大家以帮助。我先把设计引物如何设计酶切位点这方面的帖子整理一下,因为昨天一下子看到三个相似
    时间:2023-05-07  热度:20℃
  • 设计引物如何设计酶切位点
    经常有战友对一些常见问题在丁香园反复问答了很多遍,所以希望园子中一些战友,特别是低分与0分战友,能将好的帖子归纳总结了一下,并结合自己的经验整理,一方面这是个学习提高的过程,另一方面也能帮助大家解决这方面的问题。同时如有不当或不完善的地方,希望各位战友不断补充,争取有朝一日我们能把园子里战友的经验系统整理,给大家以帮助。我先把设计引物如何设计酶切位点这方面的帖子整理一下,因为昨天一下子看到三个相似
    时间:2023-05-06  热度:21℃
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