1 QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。
什么是 RT-PCR?
2 RT-PCR就是逆转录 PCR(rever transcription PCR)或者称反转录PCR(rever transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行 DNA扩增。
3 其实 Rea-time-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-ltime-PCR )是一码事,都是实时定量PCR,指的是PCR过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。
虽然Real-time PCR(实时荧光定量PCR)和 Rever transcription PCR(反转录PCR)看起来都可以缩写为RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是:RT-PCR特指反转录PCR,而Real-time PCR一般缩写为 qPCR(quantitative real-time PCR)
4 real-time RT-PCR中间的“RT”是 rever transcription(逆转录),整个意思就是利用 mRNA 或 总RNA 为模板的实时逆转录PCR技术(quantitative Real-time RT-PCR)。real time RT-PCR指的是 qPCR+RT-PCR的组合,是说将mRNA逆转录为cDNA后再作为模板进行实时荧光PCR分析,因为RT-PCR是可以定性的,但不能进行定量检测的。
所以不难理解 real-time RT-PCR(RT-qPCR) 就是结合了荧光定量技术的反转录PCR:先从 RNA 反转录得到 cDNA(RT),然后再用 Real-time PCR进行定量分析(qPCR)。
所以,实时荧光定量PCR,它不仅可以用cDNA作为模板,也可以用基因组DNA等作为模板。