sperm

严重生精障碍男性精子DNA碎片指数及Hcy水平的研究分析

目的探讨同型半胱酸、精子DNA碎片指数与严重生精障碍男性的精子计

数之间的相关性研究。方法2015年12月～2017年2月期间在医院就诊的严重

生精障碍男性患者56例，按WHO标准分为严重无、少精子症组25例和弱精子

症组31例，对照组为无生育障碍的男性27例。对所有纳入研究者进行精子参数、

精子DNA碎片指数和血清Hcy水平的检测。结果严重生精障碍男性的精子

DNA碎片指数和Hcy均高于正常对照组。精子DNA碎片指数与血清Hcy水平、

精子浓度呈正相关，而Hcy水平和精子浓度呈负相关。结论Hcy水平和精子DNA

碎片指数的升高，可能是严重生精障碍男性的重要病因，但其具体机制有待进一

步研究。

[Abstract]ObjectiveToexplorerearchoncorrelationbetweenhomocysteine，

spermDNAfragmentationindexandspermcountofmaleswithvere

s56malepatientswithverespermatogenesis

dysfunctionwhoweretreatedinourhospitalfromDecember2015toFebruary2017

ingtoWHOstandard，theyweredividedintothevere

azoospermiaandolig木瓜怎么做 ospermiagroupwith25casandtheasthenospermiagroup

ontrolgroup，therewere27maleswithoutfertilitybarrier.

Spermparameters，spermDNAfragmentationindexandrumHcylevelofall

sSpermDNAfragmentationindexand

Hcylevelofmaleswithverespermatogenesisdysfunctionwerebothsignificantly

NAfragmentationindexwas

positivelycorrelatedwithrumHcylevelandspermconcentrationwhileHc草莓饮品 ylevel

sionImprovementsof

HcylevelandspermDNAfragmentationindexmaybethemaincausformales

withverespermatogenesisdysfunctionbutconcretemechanismneedstobefurtherstudied.

[Keywords]Males；SpermDNAfragmentationindex；Homocysteine；Sperm

在發达国家大约有8%～10%的夫妇患有不育症，而发展中国家的数据更高，

有研究报道国内不育率达到18%[1]，在这些不育夫妇中大约有30%～55%是由

于男方因素造成的[2]。在男性生殖领域，精子发生是一个复杂的过程，受感染、

性激素失衡、吸烟、饮酒、染色体异常、Y染色体微缺失、易位、囊性纤维化跨

膜传导调节因子基因突变和其他的遗传因素等多种因素的影响[3]。近年来，国

外一些研究发现，严重生精子障碍男性的同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）

浓度明显高于正常男性，同时证实精液中的Hcy水平升高可以损害精子的质量

并引起出生缺陷[4-5]。而国内却鲜见Hcy和严重生精障碍男性的相关性研究。

有研究表明，精子DNA碎片和不明原因的不育男性密切相关[6]，也晚上盗汗吃什么药 有研究[7]

表明，精子DNA碎片指数（DNAfragmentationindex，DFI）和精子常规各参数

之间没有相关性，有学者却得出相反的结果[8]，因此精子DNA碎片指数和与精

液密度、精子活力、存活率、畸形率等参数的相关性存在争议。

本次研究旨在研究严重生精障碍男性的精子DFI和血清Hcy水平，以及精

子DFI、Hcy水平與精液参数之间的关联性的研究。1资料与方法

1.1一般资料

2015年12月～2017年2月期间，按WHO男性不育推荐标准[9]，收集南方

医科大学深圳医院遗传生殖、泌尿外科门诊的精液标本，纳入研究者共56例，

被分为两组：严重无、少精子症组（SOM组）[<5106个/mL，n=25，年龄（30.07.1）

岁]和弱精子症组（OAT组）[5～20106个/mL，n=31，年龄（31.07.7）岁]。

正常对照组（NM组）为无生育障碍的男性共27例，年龄为（29.06.1）岁，已

知的遗传因素包括严重生精障碍原因的个体（染色体异常、Y染色体AZF微缺

失等），不良的生活方式因素（酗酒、吸烟、职业等），以及临床因素（精索静脉

曲张、隐睾等）排除在本次研究外。纳入研究的对象均知情同意。

1.2试剂与仪器

美国哈密尔顿-索尼HAMILTONTHORNEIVOSⅡ型电子计算机全自动精

液分析仪（CSA）及原装进口的耗材，罗氏Cobas8000全自动生化流水线，HCY

检测用罗氏原装试剂盒，采用珠海BASODiff-Quik法精子形态学快速染色试剂

盒、深圳博锐德生物科技有限公司生产的精子DNA碎片检测试剂盒。

1.3血清Hcy水平检测

BD真空促凝采血管采集血液，自然凝固，3500r/min，分离血清，罗氏Cobas

8000自动生化流水线检测。按照试剂盒说明书，Hcy参考区间为4.5～13.6?mo凉拌花菜 l/L，

批内和批间不精密度变异系数不超过4%。

1.4精液参数和DFI分析

采集精液前，要求患者禁欲2～7d，运用美国哈密尔顿HAMILTONTHORNE

IVOSⅡ型电子计算机全自动精液分析仪（CSA）检测精子浓度，精子总活力，

精子存活率等项目，运用WHO推荐的Kruger标准[10]，运用Diff-Quik法检测

精子畸形率，运用精子染色质扩散法（spermchromatindispersion，SCD）检测精

子DFI，正常参考范围为小于25%。

1.5统计学分析

各组间精子参数、HCY水平和精子DFI指数数据分析采用Mann-Whitney

和KruskallWallis的非参数检验，采用box-whisker箱式图进行中位数比较，采

用Passing-Bablok线性回归分析进行相关性分析，对不符合Passing-Bablok线性

回归分析的采用散点线性趋势分析图，P＜0.05为差异有统计学意义，所有数据

分析均采用Medcalc统计分析（12.0版本）。

2结果

2.1各组间精子参数、精子DFI和Hcy水平比较

比较严重无、少精子症组（SOM组）和弱精子症组（OAT组）之间的存活

率（t=0.532，P=0.5971）、精子DFI（t=-0.590，P=0.5579）和Hcy水平（t=-0.968，

P=0.3357），差异无统计学意义（表1）。由于精子存活率、DFI和Hcy水平在SOM

组和OAT之间没有差异，所以本研究令两个组别数据合并与正常对照组比较分

析，运用box-whisker箱式图进行中位数比较（图1），精子存活率和DFI对照人

群明显高于精子异常人群，而Hcy水平则相反。

2.2精子DNA碎片指数、Hcy水平和精子浓度相关性分析

分析精子DFI与精子浓度以及精子Hcy和精子DFI的的相关性，采用

Passing-Bablok回归分析，回归方程分别为：Y=21.071+0.286X，Y=10.705+0.053X，

说明精子DFI與精子浓度、血清Hcy水平均呈正相关，而Hcy水平和精子浓度

研究采用散点线性回归分析，发现Hcy水平越高，精子浓度则越低（图2）。

3讨论

同型半胱氨酸是体内含硫氨基酸之一，是甲硫氨酸循环和半胱氨酸代谢的重

要中间产物，其本身不参加蛋白质的合成，尤其在叶酸代谢过程环节发生问题时，

会引起Hcy堆积，从而导致高同型半胱氨酸血症，进而对机体产生一系列有害

影响，甚至会影响男性的生殖系统[11]。叶酸参与DNA的合成，精子DFI是反

应精子DNA受损的最直接指标，研究表明，精子DNA损伤会对自周幽王烽火戏诸侯 然生育，辅

助生殖技术治疗结局产生负影响，并与复发性流产有关，甚至有可能导致胎儿畸

形率升高[12-13]。精子DFI、Hcy水平在不明原因的严重生精障碍患者中的比例

是否存在密切关系，以及它们之间是否存在相关性，缺乏相关数据。

本次研究表明，精子存活率、精子DFI和Hcy水平在严重无、少精子症组

（SOM组）和弱精子症组（OAT组）之间比较，统计学无差异。遂合并SOM

组和OAT组与正常对照组进行箱式图比较分析，精子畸形率和精子DFI两个项

目的结果在对照人群中明显高于精子异常人群，而Hcy水平则相反，说明精子

DF表白怎么说 I、Hcy和精子浓度存在一定关系。进而对精子DFI和精子浓度进行

Passing-Bablok回归分析，发现精子DFI和精子浓度呈正相关，说明精子的DNA

损伤越大和精子的数量越低，与孙超等[8]研究结果一致。而血清Hcy水平和精

子浓度存在负相关，表明精子浓度越低，Hcy水平越高，戈一峰等[14]的研究一

致。由于Hcy和精子DFI和精子浓度都存在一定的相关性，为了进一步明确Hcy

和精子DFI是否存在相关性，继续对Hcy和精子DFI进行相关行研究，发现随

着Hcy的缓慢升高，精子DFI出现了较为明显的升高，说明精子DFI的改变对

Hc军棋怎么下 y较为敏感。分析其中的原因，可能由于高Hcy使抗氧化物酶的活性受到抑制，

同时生成过多的ROS，这使精子细胞，以及细胞内蛋白质甲基化反应，造成精

子发生的减少[15]。而氧化应激是精子DNA损伤发生的其中机制之一，ROS的

产生超过了抗氧化物的清除能力，使精子DNA受到ROS的攻击，导致精子DNA

的严重损伤[16]。但是要明确精子DNA损伤和精子發生减少，是否和Hcy升高

导致的ROS升高的机制有关，还需要更加确凿的证据。严重生精障碍男性的精

子DFI和Hcy水平均和正常对照组存在差异，因此，精子DFI和Hcy水平升高

是不明原因严重生精障碍男性患者的重要病因，这两个项目的可作为这类患者的

重点监测指标，但是它们升高的机理还有待进一步的研究。

[参考文献]

[1]MengQ，RenA，ZhangL，nceofinfertilityandriskfactors

ofimpair减肥药的危害 edfecundityamongnewlymarriedcouplesinaChinepopulation[J].

ReprodBiomedOnline，2015，30（1）：92-100.

[2]WuH，SunL，WenY，pliceosomedefectscaumale

infertilityandareassociatedwithnonobstructiveazoospermiainhumans[J].ProcNatl

AcadSciUSA，2016，113（15）：4134-4139.

[3]DiaoR，FokKL，ChenH，enthumanbeta-defensin1

underliesmaleinfertilityassociatedwithpoorspermmotilityandgenitaltract

infection[J].SciTranslMed，2014，6（249）：249-258.

[4]EbischIMW，PetersWHM，ThomasCMG，steine，

glutathioneandrelatedthiolsaffectfertilityparametersinthe（sub）fertilecouple[J].

HumanReproduction，2006，21（7）：1725-1733.

[5]MolloyAM，BrodyLC，MillsJL，rchfo冬季的诗句 rgenetic

polymorphismsinthehomocysteine/folatepathwaythatcontributetotheetiologyof

humanneuraltubedefects.[J].BirthDefectsRearchPartAClinical&Molecular

Teratology，2009，85（4）：285-294.

[6]邱毅，王苏梅，张丽红，等.精子染色质扩散实验检测精索静脉曲张

及不明原因不育患者精子DNA碎片[J].生殖医学杂志，2008，17（6）：465-468.

[7]杨译，姜辉，张海娇，等.男性不育患者年龄与精子DNA碎片和精液

常规参数的相关性分析[J].中国性科学，2012，21（2）：17-19.

[8]孙超，徐志鹏，石亮，等.不育症患者精子DNA碎片化指数与如胶似漆 精子常

规参数关系的研究[J].南京医科大学学报自然科学版，2011（4）：565-567.

[9]中华医学会生殖医学分会精子库管理学组，国家人口和计划生育委员会

科学技术研究所，中华医学会男科学分会.世界卫生组织人类精液检查与处理实

验室手册[M].第五版.北京：人民卫生出版社，2017：7-192.

[10]KrugerTF，eofspermmorphologyinassisted

reproduction[J].HumReprodUpdate，1999，5（2）：172-178.

[11]趙铭佳，周善杰，袁冬，等.正常成年男性精浆同型半胱氨酸浓度及

其与精液参数关联性研究[J].生殖医学杂志，2014，23（2）：116-120.

[12]邱毅，张丽红，王磊光，等.精子染色质扩散实验检测男性不育患者

精子DNA碎片[J].国际生殖健康/计划生育杂志，2008，27（6）：387-389.

[13]LinMH，Kuo-KuangLR，LiSH，hromatinstructureassay

parametersarenotrelatedtofertilizationrates，embryoquality，andpregnancyrates

ininvitrofertilizationandintracytoplasmicsperminjection，butmightberelatedto

spontaneousabortionrates[J].Fertility&Sterility，2008，90（2）：352-359.

[14]戈一峰，汪春晖，欧阳罗璇，等.少和/或弱精子症患者血浆同型半

胱氨酸的测定及意义[J].中华男科学杂志，2008，14（12）：1112-1114.

[15]AmiriI，RabieeS，GoodarziMT，mentofCorrelation

betweenHomocysteineConcen-trationinFollicularFluidandOocyteandEmbryo

QualityinPolycysticOvarySyndromePatientsUnder-goingAssistedReproductive

Technology[J].ScientificJournalofHamadanUniversityofMedicalSciences，

2013，19（4）：11-19.

[16]楊译，姜辉.精子DNA损伤与男性不育的关系[J].中国男科学杂志，

2011，25（12）：67-69.