血清钙（Ca）偶氮胂Ⅲ法测定
1. 实验原理
偶氮胂Ⅲ比色终点法。钙与偶氮胂Ⅲ在中性条件下形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。加入8-羟基喹啉-5-磺酸掩蔽镁的干扰。
2. 标本采集
2.1 病人准备：无特殊要求。
2.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。
3. 标本存放：血清/考雅思还是托福血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定即使英文3周；-20℃保存可稳定8个月。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4天；-20℃保存可稳定3个月；对2014广东高考查询24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。
4. 标本运输：室温条件下运输
5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料：
6.1 上海申能钙测定试剂盒（货号：111 1137170 试剂：8×70ml）
6.1.1 试剂组成
磷酸盐缓冲液 pH7.5 50mmol/L
8-羟基喹啉-5-磺酸 5mmol/L
偶氮胂Ⅲ 120mmol/L
表面活性剂 适量
6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：由于钙离子到处都有，必须严加注意采取避免污染。只使用一次性检测用品。微量螯合剂(如EDTA等)都会阻碍显色复合物的生成。须严加注意。试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件宝贝蛋
7. 仪器：贝克曼AU680生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤：参见purposAU680生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与语文学习II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品钙校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。
12. 参考值范围
血清john wall/血浆： 2.15～2.57mmol/L
尿液： 女性： <6.24mmol/24h
男性： <7.49mmol/24h
（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义：钙测量用于诊断和治疗副甲状腺病，某些骨病，慢性肾病和手足抽搐（间
歇性肌肉收缩或痉挛）等。尽管体内超过99%的钙存在于骨骼和牙齿，临床上最关心血液里的钙。骨骼作为一个储存器，通过释放钙防止低血钙和吸收钙防止血清钙水平过高，保持血清钙的相对稳定。饮食中钙的含量增加，吸收钙的百分比就减少，因此，吸收钙的数量能够保持相对稳定。在高钙饮食中钙吸收的轻微增加被反映在增加的肾排泄中。钙在许多细胞功能中起着重要作用，细胞内如肌肉收缩和糖原代谢，细胞外如骨钙化、凝血以及神经冲动传递。血浆钙有三种不同的形式：游离离子、和蛋白结合以及与阴离子（如磷酸根、柠檬酸根和碳酸氢根等）形成复合物。总钙水平的降低与多种疾病有关，如骨病（尤其是骨质疏松症），肾病（特别是透析患者），肠道吸收不良以及甲状腺功能减退。总钙水平升高为甲状旁腺机能亢进，转移性恶性肿瘤及肉瘤样恶性病变。在预防骨质疏松进行钙的补充时，钙的检测有助于临床监控。
14. 操作性能日期英文
14.1 线性范围：0.01～6.25mmol/L。
14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU680批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
批内精密度 n=20 | (mmol/L) | s (mmol/L) | CV (%) | 批间精密度 n=20 | (mmol/L) | s (mmol/L) | CV (%) |
样品1 | 2.19 | 0.02 | 0.26 | 样品1 | 2.20 | 0.04 | 0.50 |
样品2 | 3.12 | 0.04 | 0.30 | ries是什么意思样品2 | 3.07 | 0.03 | 0.22 |
样品3 | 3.49 | 0.06 | 0.43 | 样品3 | 3.42 | 0.06 | 0.48 |
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14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对70个样品进行Ca检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02x-0.005mmol/L；r=0.999。
14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。
14.5 病人结果可报告范围 0.01～6.25mmol/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。
15. 超出范围结果处理：本法线性上限为6.25mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。
16. 病危报警值的处理 当血清钙测定值>3.5mmol/L或<1.6mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。
17. 美国voa之音方法局限性
17.1 本法线性上限为6.25mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。
17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度 1704 mol/L，胆红素浓度 684 mol/L，血红蛋白浓度 5.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L，镁浓度 6.2mmol/L时没有观察到干扰。
18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
19. 参考文献
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt： TH-Books Verlagsgellschaft; 1998. p.192- 202.
2. Endres DB, Rude RK. Mineral and bone metabolism. In： Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia： W. B. Saunders Company；1999.p.1395-1457.
3. Michaylova V, Ilkova P. Photometric determination of micro amounts of calcium with arnazo III. Anal Chim Acta 1971;53：194-8.
4. Bauer PJ. Affinity and stoichiometry of calcium binding by arnazo III. Anal Biochem 1
981;110：61-72.
20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。
