雅培Murex丙肝抗体酶联免疫诊断试剂反应原理
ELISA间接法,微孔内包被HCV病毒的CORE(2011年四川高考数学核心区)和NS3、NS4、NS5蛋白抗原,若样品中有抗-HCV抗体存在,就会同微孔内包被的抗原结合,连接有辣根过氧化物酶(horradish peroxida)的单克隆抗人IgG再同上述结合物结合,形成抗原-抗体-抗人IgG抗体-酶这样一组复合物,再加入显色剂3,3′,5,5′四甲基联苯胺(tetramethyibenzidne,TMB)和过氧化氢(peroxide),在辣根过氧化物酶的作用下,TMB显紫色,加入终止液(硫酸)后显黄色,450nm处读取吸光度值,判定结果。
雅培Murex丙肝抗体酶联免疫诊断试剂实验步骤
步骤1 配置酶结合物、底物液和洗液
步骤2 根据实验要求,选择一定量的测试条
步骤3 加入90ul样品稀释液于反应孔中 园丁是什么意思 90ul
步骤4 加入20ul样品或对照品于反应孔中 20ul
每批测试的第一个反应条加对照.在孔A1和B1加2个阴性对照,在孔C1加1个阳性对照.在板上加样品再加对照.
步骤5 加入90ul样品稀释液于反应孔中 90ul
步骤6 在37 oC孵育60分钟 60分钟
步骤7 孵育结束后按清洗步骤的要求对反应板进行5次清洗. involveqq英语网名5次清洗
步骤8 加入100ul酉每 结合物 100ul
步骤9 在微板震荡器上震荡10秒钟,或手工轻轻震荡10秒钟 10秒钟
步骤10英语四级阅读技巧 在37 oC孵育箱中孵育30分钟 30分钟
步骤11 孵育结束后按清洗步骤的要求对反应板进行5次清洗. 5次清洗
步骤12 清洗结束后立即加入100ul显色液 100ul
步骤13 在37 oC孵育箱中孵育30lighter分钟进行显色.避免阳光直射. 30分钟
阳性样品的孔中颜色会变成紫色,阴性样品的孔中颜色会变成粉红色。
步骤14 加入zip是什么意思50ul的终止液,阳性样品的孔中颜色会变成橙色,阴性样品的孔中颜色仍然是粉红色。 50ul
步骤15 在15分钟内用sacrifice酉每网络营销培训 标读数仪在gfp450nm的波长处读取吸光度值.可用620nm到690nm作为参考波长.仪器空白为空气(没板在架子)
A 450/690