Agilent 1200 HPLC仪器组成及基本操作步骤
Agilent 1200 HPLC 结构图
高效液相色谱法(HPLC):是在经典液相色谱法的基础上,以高压输送流动相,采用高效固定相及高灵敏度检测器,发展而成的现代液相色谱分析方法。它具有分离效率高、选择性好、分析速度快、检测灵敏度高、操作自动化和应用范围广的特点。
一.溶剂瓶装置
溶剂
使用棕色玻璃瓶会避免藻类的生长;所用的水为重蒸水;溶剂选用色谱纯,使用前要用0.22 μm的过滤膜过滤;使用新鲜配制的流动相,特别是水溶剂或盐缓冲液,建议不超过两天;避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。
避免使用下述可腐蚀钢铁的溶剂:
碱金属卤化物及其酸溶液(如:碘化锂、氯化钾等);高浓度无机酸,如硝酸、硫酸;可能含有过氧化物的色谱醇醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。这些在 使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物;含强络合剂的溶液(如EDTA,乙二胺四乙酸);四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。
二.在线脱气装置
在线脱气机工作原理
四元泵真空脱气机由一个四通道(有四个管状塑料膜)真空箱和一个真空泵构成。打开真空脱气机的电源开关后,控制电路即开启真空泵,真空泵运行使真空箱内产生部分真空。真空度由压力传感测定,根据传感器信号,真空脱气机通过运行或关闭真空泵来维持真空度。
溶剂瓶中的溶剂在远足是什么意思>iconfinderLC泵的抽动下流过真空箱内的特殊管状塑料膜。当溶剂经过真空管时,溶剂中溶解的气体将渗透过塑料膜进入真空箱,到达真空脱气机出口时,溶剂几乎被完全脱气而不含有任何气体。
三.Agilent 1200 四元泵
当盐溶液和有机溶剂混合时,盐溶液可能与有机溶剂完全混溶,而不会出现沉淀。但是在
梯度阀的混合点,重力作用使盐颗粒沉淀下来。通常,阀的A通道用于水相/盐溶液,而泵的B通道用于有机溶剂。如果使用的是这样的配置,盐将落回到盐溶液中,并被溶解。
郑州会计培训 A:水相 B:甲醇 C:乙腈 D:缓冲盐
服装设计专业介绍●当泵头安装有冲洗附件时,由于该附件中也有密封垫,这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要打开元旦晚会唱什么歌好al-wash,用talk to me10%异丙醇冲洗泵。
●10%异丙醇有助于降低水的表面张力,并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。
decke四.手动进样器
先使阀处于装样(load)位置,用微量注射器将试样注入贮样管(sampling loop)。进样时,转动阀芯至进样(injection)位置,贮样管内的试样由流动相带入色谱柱。定量环为 20 μl。
五.检测器
按其适用范围检测器可分为通用型和专属型两大类。
●专属型检测器只能检测某些组分的某一性质,如紫外检测器和荧光检测器,它们只对有紫外吸收或荧光发射的组分有响应。
●通用型检测器检测的是一般物质均具有的性质,如示差折光和蒸发光散射检测器。adjoining>化妆
紫外检测器的工作原理是朗伯-比尔定律。紫外检测器包括固定波长、可变波长和光电二极管阵列检测器。
可变波长紫外检测器一般采用氘灯为光源,能够按需要选择组分的最大吸收波长为检测波长,从而提高灵敏度。
基本操作步骤
⑴实验前准备
①明确实验目的和检测样品的性质,选择相应的分析 色谱柱;
②配制分析的样品和流动相,选用色谱纯流动相或用0.22 μm的过滤膜过滤(进口甲醇和乙腈不用过滤) ;
③检验仪器和计算机的电源线,数据线是否连接完好。
⑵开机
①将所用的通路小心放入试剂瓶中(防止滤头破裂),色谱柱按流速的方向装好,要拧紧并在柱头和柱尾的下面垫上滤纸;
②先打开总电源的开关,然后打开计算机的电源,待计算机运行稳定;
③从上到下依次打开脱气机、泵、柱温箱、检测器的电源开关;
④待仪器自检完成后,双击桌面上的“联机”图标,打开工作站(如图一所示)
⑶设定参数
①更改样品信息:单击运行控制下的样品信息弹出对话框(如图二所示),更改操作者姓名、子目录和所存储的文件的文件名。
②设置试剂瓶的填充量:单击界面上的试剂瓶的图标,设定溶剂的体积(如图三所示)
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