GPC操作规程
(泵:上下四口内心箭头全部朝上)
1. 开机
稳压电源泵柱温箱检测器 Breeze软件。
(检测器:Enter——Shift,CONFIGURE(选择High,410mode2)——Home ——Enter结束)
btw
ctr2. 建立自己的文件夹
Manage Breeze Make a new project 按提示建立文件夹3. 建立操作方法
View method,进入设置界面。
设置参数:1) Pump
Flow: high pressure limit :1000,low pressure limit : 0
Pump mode: isocratic
Isocratic Flow A: 1.0
Isocratic Flow B: 0
change the world
Events and solvents可以不用设。字典 在线
2) RI Det
melodramaGeneral:Sample rate: 1
Filter time: 1.0
Polarity: +
Unit label: mV
Sensitivity: 4
Auto zero at time: 打钩
Temperature: Internal Heater: 35
External Heater 1: 35
(检测器温度达不到35时,可建完方法后先平衡一下,走基线1-2分钟,进入设置系统)
4. Purge Pump
按向导操作。
先抽泵(抽空气、),然后将阀门扳到purge,(先以1ml/min的流速purge5min,再以5ml/min的流速purge5min),完成后扳回原位。
5. 设定Purge Ramp Time
主页面Purge Ramp Time点击右键,可修改时间,一般为1或2min。
6. 设定流速
主页面Flow,可先设0.5,等流速达到后再设为 1.0,使流速慢慢上升到1.0,保护柱子。关机时操作相同,但流速往小设定。
7. Purge 检测器
检测器屏幕上,在开锁的状态下,先按shift,再按purge,此时屏幕左上角出现purge状态的图标。
8. 观察基线
Purge 检测器约1小时后,先按shift,再按purge,等检测器屏幕回零状态。在操作主页面点击左下角的平衡图标,选择步骤3建立的方法,开始平衡,在主页面的右下角屏幕可观察基线的状态。(浮动不超过0.1)
若基线一直都不稳地,则可能需要长时间的Purge检测器,然后再平衡观察。直到基线稳定为止才能开始进样。
9. 进样
点击主页面左上角的图标,进入进样参数设定。包括Sample Name(样品名),Function(作标线时选Inject Narrow Standards;测样品时选Inject Broad Samples),Method(按步骤3的方法),Vial(选1),Injection Volume(选20),Run Time(选26)。
extranet参数设好后,把泵的进样阀拨到Load位置,然后点击对话框中的Inject,等屏幕出现进样提示图标后,手动进样(针要插到底),迅速把进样阀拨到Inject 位置,然后再把进样针拔出来。并立即用氯仿清洗进样针至少4次。
点击Find Data,然后点击Channels,再点击Update,此时会在Channels 的窗口中看见新进样品的名称。
10. 标准曲线的制作
等所有的标准样品做完后,点击Find Data,然后点击Channels,同时选择所有标准样品的名称,点右键的Alter Sample — Components —从大到小输入峰均分子量(见标样的标签),保存并退出。
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再重新选择所有标准样品的名称,点右键的Review。此时看见GPC曲线,按顺序选择一标样,点击Processing Parameters Wizard(左上角第三个图标)—选择Start New Processing Parameters —Processing Type选GPC —Start 和End的方框里输入自定义的始末时间(应包括所有的标样的流出时间)—Next —Next —如此时除了主峰外还出现其他的小杂峰,可通过定义Minimum Area 和 Minimum Height,然后点击Test来除去— Next —三个方框中分别选择Relative、5th Order和 1.000 —Next —Next —输入Method Name — Finish。
即时翻译然后选择下一标样曲线,重复刚才的步骤。所有的标样都处理完毕后,点击Overlay ,再Integrate — Calibrate — Next Channel — Integrate — Calibrate —Next Channel……直到所有的标样处理完毕。点击Calibration Curve,此时可看见漂亮的标线了,最后点击保存。
newhalf恭喜你,标线作好了!
11. 数据分析
点击Find Data,然后点击Channels,选择要分析的未知样品,点右键Review。File —Open Method —选择标准曲线(此时点击Calibration Curve,如果看见标线,说明标线存在)—点击Processing Parameters Wizard —选择第二项—选择要分析的峰(杂峰的处理同前面),然后按向导一直往下走就可以得到你要的数据了,选择保存。
点击Find Data,然后点击Results,再点击Update,就会看见你保存的结果了。
12. 数据的导出
源头英文
建立导出方法:File —New Method —Export Method —Fields中选择Export ASCII File 和路径—Raw Data中选择ASCII的File和路径,并输入Filename。保存后退出。(不用)
点击Find Data,然后点击Results,选择要分析的样品,点右键Export,在Exporting中选第三项,找到自己的导出方法,点OK。
在你设定的路径下(即保存地址)就可以看到你导出的数据了。利用Origin 作图软件,你可以方便进行处理。
13. 报告的打印
点击Find Data,然后点击Results,选择要分析的样品,点右键Preview,选择第三项,找到满意的版式(即broad unknown relative)即可打印。(得到PDF格式)
14.关机
关机前先把流速逐渐降低,1.0 — 0.5 — 0.0 ml/min,然后关闭仪器和软件。
注意:本仪器的全部操作都是由软件Breeze来控制的,实验过程中一定要小心不能把软件的主窗口关闭,否则会损坏仪器。若实验中出现系统的错误,要及时把Breeze软件重新打开!
倒峰:可能是溶剂峰或杂质引起的