高效液相色谱使用操作步骤
一、泵操作面板
PUMP：运行键START：梯度运行键PURGE：快冲键RESET：复位键HOLD：程序暂停键STOP：泵停顿键
韩文歌曲TIME：程序开启键FLOW：流速：RSVR：A B C 精品文档，超值下载
PROG：程序DEL：删除程序PMA*：最大压力PMIN：最小压力ENTER：确定
TIME 0 FLOW ENTER 〔设置流速〕TIME 0 RSVR ABC ENTER 〔设置溶剂〕TIME 0 PROG ENTER 〔设置程序〕TIME 0 % A 30 ENTER 〔设置比例〕
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TIME 0 % B 30 ENTER 〔设置比例〕
TIME 0 % C 40 ENTER 〔设置比例〕
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DEL PROG 1 ENTER 〔删除程序〕
1.对于梯度泵设定举例如下：(人参皂苷的梯度)
TIME 0 PROG 1 ENTER
TIME 0 % A 81 ENTER
TIME 15 % A 81 ENTER
TIME 60 % A 65 ENTER
TIME 65 % A 0 ENTER
TIME 80 % A 0 ENTER
TIME 81 % A 81 ENTER
TIME 100 % A 81 ENTER
因为A+B之和始终是100%，所以B相就不用设了。7．对于对照品在这种条件下只要对照品的峰全部出完后按下RESET键等20分钟即可进第二针进完针后按START 键运行梯度程序。但是对样品来说一定要等峰出完后再按下RESET键等基线基走直才可进下一针。deafen
二、检测器操作面板
RESET：复位键A/Z：调零键WL：调波长ENTER：确定fullversion
三、实验前的准备工作
1、实验前流动相提前配好过滤脱气。
2、置换流动相时把泵的滤头从原来的流动相中换到新的流
动相中滤头要轻拿轻放。
3、液路排气顺序：首先翻开排气阀—按PURGE键进展排气
完毕后—按STOP键停顿—再拧紧排气阀—按PUMP键让泵运行。
4、翻开检测器首先观察右上角氘灯指示灯确认氘灯是否点
亮，按WL键调好实验波长后按A/Z键调零。
5、翻开电脑翻开在线工站选择对应的通道，输入实验信息、方法、包括采样控制，积分和仪器条件，积分面积外标法测
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绝对含量归一法相对含量标法测绝对含量；后点数据采集，将电压调到-20~20，时间调到0~30，点零点校正后再点查看基线，大约1个小时左右基线根本稳定〔就是根本成直线，因为检测器翻开后需要一定的稳定时间，检测器根本稳定泵里面的流动一样时也就置换好了〕，就可以进样了。
6、进对照品：对照品配成溶液后要过滤再进样等对照品的峰出来以后点停顿采集输入文件名后保存。〔一般连进三针为准〕
7、进样品：样品配成溶液后要过滤再进样等样品的峰出来以后点停顿采集输入文件名后保存。
8、进样阀搬阀顺序—搬到LOAD位置时进针—打完针后搬到INJECT位置进样要求打针匀速轻快搬阀轻快每次根本一样，外标法进样量是定量管的四—五倍。
9、用以下公式算出样品含量：
C标/C样=S标/S样
暂停英文
式微翻译10、做校正曲线：翻开离线——点翻开——翻开对照品的谱图——点积分方法〔选用面积外标法〕——点组分表——点全选——输入所需要对照品的峰名——点采用——点校正——点标准含量——输入含量〔可以是对照品的浓度也可以是百分数〕——OK——点参加标样——再次翻开刚刚翻开的对照品的谱图——校正完毕——点峰名看校正曲线图——点输出——取名保存。
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11、计算样品的含量：翻开离线-翻开样品的谱图-点预览——点加载——加载刚刚对照品的校正曲线谱图——即可得出样品的含量
四、液相色谱仪考前须知：
whether1、泵正常工作时，在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的，当然在换流动相时压力变化是正常的，正常情况下如果柱压升高根本上都是由色谱柱使用时间长引起的〔只有更换色谱柱〕，如果正常情况下压力突然降低有可能是〔1〕接头处有漏液的地方，采取的方法是有滤纸检查，如有漏液的地方用扳手拧紧即可。如果没有漏液则可能是〔2〕白色的管子里面有气泡从而导致流动相进不到泵里面去，采取的方法是排气泡排气时：先STOP停泵—翻开排气阀—按PURGE〔快冲〕键—等气泡排完后先STOP停泵—拧紧排气阀，其先后步骤不要搞反了。
2、泵正常工作时最高压力最好不要超过200KG，所以翻开泵以后可以将泵的最大压力调到200KG，这样如果压力超过上限则会自动报警停机，流速最好不用超过1ML/MIN，如果使用时压力超过200KG，建议将流速调低点以降低压力〔在色谱柱正常的情况下〕，如果是因为色谱柱长时间使用造成压力升高则建议更换色谱柱〔因为色谱属于耗材长时间使用就需要更换，更换的主要依据色谱柱出峰不正常或者柱压力过高〕。
3、泵正常工作时平均每15天左右向注油孔加润滑油2~3滴。
4、流动相里面如果有盐或酸类，做完实验后要先用95%二次蒸馏水与5%甲醇洗色谱柱40分钟左右，然后用纯甲醇洗30分钟左右才可以关机。第二天如果继续做实验流动相里面仍旧有盐或酸类，最好先用95%二次蒸馏水与5%甲醇过度20分钟，再用流动相。如果流动相里面只有甲醇，水，乙腈。做完实验后就不用95%二次蒸馏水5%甲醇冲洗，可直接用纯甲醇洗30分钟即可关机。
5、C18色谱柱的耐酸PH值围3—8使用时不要超出。
6、仪器长期不用时一定要将滤头泡在甲醇里半月开机一次，如果开机时泵抽不上液可以翻开排气阀按PURGE快冲。
7、调反压器时要注意等液体流出来以后才能调一般调8—10KG，比方现在泵显示屏显示柱压50KG那再增加10KG显示屏上显示柱压60KG然后拧紧锁紧螺母。
8、色谱仪关机顺序：清洗液路时可以把检测器直接关机，清洗完毕后先按STOP让泵停顿后在关电源不允许直接关机。
