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ass是什么意思干货分享~如何让你构质粒拥有火箭般的速度！口试>可有可无的英文
小伙伴们，你们有没有深受够质粒的困扰？有没有满怀期待，却看到平板上空空如也？有没有做了无数的酶切鉴定，却总也找不到自己想要的结果？
梵语翻译要想真正的拥有火箭般的质粒构建的速度，不要让自行车如何更新，而是让自己坐在火箭上！今天小程给大家讲解 快速 多片段 构建方法!
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英语新词快速拼接多个DNA片段在合成生物学中扮演重要的角色，对于构建微生物工厂生产药物，生物燃料等起到至关重要的作用。目前有多种方法可以被用来构建多片段连接，包括overlap PCR，nicking酶方法，Golden gate方法，Gibson asmbly等，in vivo的DNA拼接方法也非常有用。然而开发序列不依赖的快速便宜方法，也非常急需。受到LCR等方法的启发同时基于DNA polymera的exonuclea活性，来自中国的科学家们，开发了全新的序列不依赖型的DNA拼接方法。“DATEL”科学家们，使用Taq酶的5’-3’ 外切酶活性，和pfu的3‘-5‘外切酶活性以及Taq连接酶。细节上，所有5‘ 磷酸化的DNA片段，首先设计上各个片段间要求一定的overlap。经过变性和重新anneal后，两边的片段，以两种类型的overhang进行重叠。之所以需要5‘ 磷酸化，是因为在第一种类型中，pfu产生的3’ OH 需要和下游的进行连接。经过多重
的退火 anneal循环，所有的片段都会最终连接起来。为了探究不同的参数，科学家们使用GFP基因作为demo。科学家们观察到不同的chew时间对于不同长度有着不同的优化条件：
重庆编程培训可以看到30bp的overlap长度，35min的延伸时间最为合适。
会计培训班要多少钱>意思的英文然后科学家们，将方法应用于多片段的拼装上，可以看到对于传统使用的Gibson拼接方法，Gibson在大于4个片段后，效率显著下降，但是对于多到10个片段，DATEL的效率仍然非常高。
