Mini Trans-blot
第1节简介............................................... .................................... 1
1.1规格................................................ ............................................ 2
1.2安全说明............................................... ...................................... 3
第2节元件和准备.....
2.1迷你跨印迹细胞的描述和部件的装配............................. 4
2.2印迹.............................................. ................................ 5
2.3酸性转让............................................... .......................................... 8
第三节移送条件.............................................. ........................ 8
3.1一般指南传送缓冲区和运行条件....................... 8
3.2电泳转移条件的注意事项............................................ 9
3.3缓冲区配方............................................... .................................... 10
第4节优化电泳转移的战略.................. 11
4.1优化蛋白转移.............................................. ....................... 11
烹饪英语4.2的优化DNA和RNA转移............................................ .............. 13
第5印迹膜的选择............................................ ....... 13
5.1蛋白印迹膜.............................................. ....................... 13
5.2 DNA和RNA印迹膜............................................ ............. 14
第6节故障排除指南“.............................................. ................. 15
6.1电泳转移............................................... ............................ 15
第7条产品信息.............................................. ...................... 19
第8条参考文献............................................... .................................... 19
第1节
介绍（略）
迷你跨印迹模块可容纳2盒电泳转移。迷你跨印迹模块是用于从两者中任一蛋白或核酸印迹
琼脂糖和丙烯酰胺凝胶。它也能够从印迹等电聚焦凝胶水平电泳槽，DNA和RNA的凝胶迷你电泳槽。对于凝胶的应用场合是小于7.5×10厘米
频率的意思1.1规格（略）
1.2安全说明（略）
第2节计量单位英文
2.1迷你跨印迹细胞的描述和零件组装（略）
泡泡少儿英语怎么样2.2印迹
蓝色的冷却装置在你的实验室在-20°C冷冻保存，直到准备使用。使用后，用水冲洗外部容器上，并返回冷却单元用于存储冷冻。
1。准备转移缓冲液。 （参见第3.3节制定的缓冲区。缓冲液冷却至4℃，将改善散热。）offduty
2。剪切的膜和滤纸的凝胶的尺寸，或使用预切膜和滤纸时，一定要戴上手套处理的膜，以防止污染。平衡的凝胶和膜浸泡，过滤纸，和纤维垫在转移缓冲液（15-20分钟，取决于在凝胶厚度）。
3。准备凝胶三明治。
将磁带，黑色的一面朝下，放在一个干净的表面上。
将一个预湿侧的磁带盒上的灰色的纤维垫。
将滤纸上的纤维垫的片材。
平衡凝胶放置在滤纸上。
预湿的膜放置在凝胶上。
完成三明治放置一张滤纸上的膜。
最后的纤维垫。
*删除任何可能形成气泡的好成绩是非常重要的。使用玻璃管或滚子，轻轻地出气泡。
4。关闭磁带牢固，小心不要将凝胶和滤纸三明治。锁定的白色锁存关闭磁带。
5。在模块中放置卡带。重复的其他磁带。
6。添加蓝色冷冻冷却单元。在坦克和填充到罐体上的"蛋白印迹"标记的地方。。
7。一个标准的搅拌棒，以帮助维持液温度和离子分布的。设置的速度尽可能快，以保持离子分布均匀。
8。放在盖子上，插入电源插头的电缆，并运行的印迹。请参阅第3节的运行时间，电压设置不同的缓冲区。
9。运行完成后，拆卸印迹三明治和取出膜。清洁的小区，纤维垫，与实验室洗涤剂盒，并用去离子水冲洗干净。
2.3酸性转让
如果转移在酸性情况下，交换胶凝体和膜在设定指示。 这在胶凝体的负极边将安置膜。 在酸性情况之下，蛋白质在去往消极负极的相反方向将转移。
第3节
转移条件
3.1缓冲和运行条件的一般指南
表3.1提供指引功率条件下使用不同的缓冲区。电源条件提供各种运行时间。如果多个条件被显示时，较高的电压时，需要较少的时间运行。请务必使用蓝色的冷却装置。
标准场 过夜转移 高强度场 1小时转移圣诞快乐英语
3.2电泳转移条件的注意事项
labeled
这些变量会改变总的阻力，因此当前的读数：
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在缓冲液中的改变化妆，即另外的坑，或离子浓度的变化
哈尔滨电脑学校由于添加酸或碱来调整pH值的缓冲
•凝胶pH值，离子强度，和丙烯酰胺的百分比，特别是如果该凝胶具有不
经过适当平衡
•凝胶数目;稍微凝胶的数目增加的电流增大
•音量的缓冲液中电流增加时，体积增大
•铂质量，电流增加，当质量增加
•转移温度，电流的增大，当温度升高时
•转移的时间越长，电流通常会随着缓冲能力下降
预平衡的凝胶（15-20分钟）
所有电泳凝胶电泳转移之前，在转移缓冲液预平衡。预平衡将有助于除去ontaminating电泳缓冲液中的盐和中和的盐（从核酸变性所导致在转移前的盐）。如果不会被删除的盐，它们会增加转移缓冲液的导电性和在传输过程中产生的热量的量。此外，低比例凝胶收缩中甲醇的缓冲区。的平衡使凝胶调整到其最终尺寸之前电泳转移。
电流限制
PowerPac的®基本的电源是75瓦的输出能力。除非电流限制设定，不受控制的电导率的变化，可能会导致在全功率传递到迷你跨印迹®细胞。凝胶持有人可能会变形，并传送缓冲区的沸腾和蒸发（进一步增加导电性）。这将导致潜在的安全隐患。设置电流限制和运行时间，请参阅PowerPac的基本电源使用说明书。迷你跨印迹细胞也PowerPac的HC电源兼容。
在传输过程中使用的搅拌棒
对于所有印迹应用搅拌棒必须被放置迷你跨印迹细胞内，整个单元被放置在搅拌棒的混合器，在实验过程中，从而使转移缓冲液中搅拌。这将有助于，电泳转移过程中保持均匀的导电性和温度。没有妥善控制转印缓冲液的温度差大分子转移，带来了潜在的安全隐患。
转移缓冲液的pH
除非特别指出，不要将pH调节传送缓冲区。转印缓冲液pH值的调整，没有表示时，将导致增加缓冲液的导电性。这表现由高于预期初始电流输出端和一个抵抗力下降。它建议每次传输开始之前，缓冲液的导电性和耐核对PowerPac的基本电源。
传送缓冲区的建议
使用高品质，试剂级甲醇。受污染的甲醇可导致转印缓冲液的电导率增加，以及不良的大分子转移。不要重复使用传送缓冲区或稀释传送缓冲区低于建议的水平。传送缓冲区的重用是不妥当的，因为这些缓冲区最有可能失去了他们的能力，在传输过程中保持稳定的溶液的pH值。转移缓冲液稀释低于其建议的水平，也没有建议，因为这会降低缓冲能力。
电压范围
不要增加超过表3.1中所示的电压设置。为您的应用程序在低电压下仿佛一夜之间转让是无效的，是必要的和更高的电压，传输时间也必须下降。如果不这样做，可能会导致潜在的安全隐患。
3.3缓冲液配方
下面所提供的所有公式为缓冲液的总体积为1升。大约950毫升缓冲液中所需的冷却单元的Mini跨印迹细胞。可以使用乙醇代替甲醇，在所有的缓冲制剂。
不要添加酸或碱来调整以下缓冲液的pH值。甲醇应该是分析纯，作为低级甲醇中的金属杂质将板在电极上。
注：有些pH电极将不执行正确的Tris缓冲液的pH值测量。如果pH值的缓冲已关闭，检查，以确保电极与Tris缓冲液。如果pH电极的功能正常的Tris缓冲液，pH值低于8.0，重配缓冲液。
25 mM Tris, 192 mM glycine, 20% v/v methanol, pH 8.3
Mix 3.03 g Tris, 14.4 g glycine, and 200 ml of methanol; add distilled deionized water
(dd H2O) to 1 L.
25 mM Tris, 192 mM glycine, pH 8.3
Mix 3.03 g Tris and 14.4 g glycine; add dd H2O to 1 L.tall
48 mM Tris, 39 mM glycine, 20% v/v methanol, pH 9.2
Mix 5.82 g Tris and 2.93 g glycine in ddH2O, add 200 ml methanol.
