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单眼剥夺大鼠视17区及外侧膝状体中生长相关蛋白(GAP一43)的表达及其意义
研究生:庄建福
导师:林发森教授
tck中文摘要
目的:研究生长相关蛋白(GAP一43)在正常大鼠和视觉剥夺性大鼠视皮层及外侧膝状体中的表达情况,为探讨视觉发育可塑性提供分子基础,为临床寻找有效预防和治疗弱视的方法提供参考依据。
方法:缝合2周龄大鼠单侧眼睑30天,切取外侧膝状体和视皮质17区,应用免疫细胞化学sP法技术染色和计算机图像分析GAP-43在正常和单眼剥夺组大鼠外侧膝状体和视皮质17区的表达及变化。
结果:1、GAP_43在正常大鼠视觉系统表达主要见于外侧膝状体全层和视皮质17区II~Ⅵ层神经元胞膜中,呈环状或点状棕黄色免疫阳性反应;2、在敏感期内剥夺眼对侧外侧膝状体和视皮质17区GhP一43表达的免疫阳性神经元染色变淡(P<0.05),且免疫阳性神经元数目减少(P<O.05)。
结论:单眼剥夺大鼠视觉系统外侧膝状体和视皮质17区GAP-43表达均降低.提示GAP一43在视觉系统的作用可能是弱视发生的分子生物学基础之一。单眼剥夺性大鼠视觉系统GAP一43表达降低可能是由于剥夺眼视觉系统神经元在发育敏感期内长期视觉剥夺效应使其在双眼竞争突触位点时处于劣
势,表达GAP一43的能力降低。
关键词:GAP一43动物模型单眼剥夺大鼠外侧膝状体
视皮质17区
ExpressionandSignificanceofGAP-43inLateralGeniculateNucleusandVisualCortex
Area17ofMonocularlyDeprivedRats
MasterCandidateMentorZhuangJianfuProf.LinFasen
Abstract
objective:ToinvestigatetheexpressionofGAP43inthelateralgeniculatenucleusandthevisualcodexarea17ofmonoeularlydeprivedrats
duringthecriticalperiod,tounderstandthemechanismandseekout
effectivemethodsforpreventingandtreatingdeprivedamblyopia
duringthedevelopmentperiod.Thestudywillofferareferencebasis
topreventandtreatamblyopiaofdeprivationamongchildren.
Methods:Bysuturingtheeyelidsofoneeyeof14·day-oldrats,onemonth
later,thelateralgeniculatenucleus(LGN)andthe
visualcortexarea17
weresectionedinturn.Thesewereinvestigatedwinlpolyclonal
antibodiesforGAP-43,whichWereusedtolabeltheneuronsofvisualyammy
systemusingtheimrnunocytochemicalSPmethod.Datawereanalyzed
fromopticalmicroscopyandcomputerimageanalysis.
Results:1、TheanalysisrevealedthatGAP-43immunopositiveneuronsinratswerelocalizedinallthelayersoflateralgeniculatenucleusandthelayers
II—VIofvisualcortexarea17,andGAP-43isstainedbyaringand
dotfigureandbrown-yellowcolourincytomembrane;
2、Inthecriticalperiod,gcneexpressionconcentrationandnumberofGAP一43immunopositiveneurons,inboththelateral
geniculate
nucleusandthevisualCOdeXarea17,receivedfromthedeprivedeyes,
o.rereduced.(P<0.05)
2
Conclusion:ExpressionlevelofGAP.43inallthelayersoflateralgeniculate成都花艺学校
nucleusandthelayersII—VIofvisualcortexarea17ofmonocularly
trafficjam
thatdeprivedratsduringthecriticalperiodarereduced.Itispossible
theoccBranceofamblyopiaisrelatedtothereductionoftheIleurons
2018英语四级答案abilitiestoexpressGAP.43invisualsystem,andthisdecreaseisin
基本英语单词
thattheroleresponsetolong-termdeprivation.Theresultsindicated
ofGAP-43invisualsystemispossiblyoneofthemolecularbiology
basisofoccuranceofamblyopia.
Keywords:GAP-43;monoeularlydeprivation;animalmodel;lateralgeniculatenucleus;visualcortexarea17:rats.
引言滞留 英文
儿童弱视主要是在,bJL视觉发育敏感期内,由于各种影响视觉发育的眼病和/或视环境的不良,使双眼视长期紊乱,视觉系统神经元功能、形态和神经生化机制异常,临床表现为外眼及眼底检查无特殊变化,而又不能完全矫正其低常视力(≤0.8)、失立体视和形觉障碍等体征“。。弱视是婴幼儿童的常见病、多发病,其危害不仅影响单眼视力,并且若不在敏感期内及时治疗患者还会成为立体视盲,这使得患病儿童将来参加社会工作择业受到严重影响。我国儿童弱视的发病率为3%左右,全国有三亿多儿童,估计弱视儿童有一千万”3。
弱视发病机制的研究是临床眼科预防和治疗弱视亟待解决的关键问题,因此,具有极其重要的意义。从理论角度看,弱视发病机制研究属中枢神经系统发育和可塑性变化机制研究范畴,是一项既复杂又必需涉及多学科多方法学的综合研究,单纯从哪一方面谈论都具有一定的片面性。从整体讲,弱视发病机制研究为脑视觉功能的学习记忆、神经元及突触的发育连接、机能状态、塑性变化、神经营养分子机制、生物活性因子及相关受体的分子机制、双眼竞争的神经生理生化机制及脑自身调节作用机制等等一系列矛盾过程的综合。进一步研究视觉系统多种生物因素及受体的关键作用,阐明其相互协同作用、竞争和抑制关系、筛选决定性因素和受体并外源提供或采取某种干预措施,以提高视觉系统可塑敏感性,则有希望在敏感期末改变敏感期内所致的弱视效应。1。
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多年来人们一直在临床和基础从不同角度进行对弱视发病机理进行研究。但初步认识弱视发病实质及变化规律,还是通过从神经生理和神经生物学角度所进行的大量研究中获得。目前,应用免疫组化、分子生物学等技术在更深层次了解弱视视觉系统变化及弱视发病机理是一个热点。
生长相关蛋白(Growthassociatedprotein,GAP一43)是一种胞膜磷酸蛋白质,与神经系统的发育、神经突触连接重建和可塑性以及再生有密切的关系。由于其在引导轴突生长和调节轴突形成新的连接上起关键作用,被认为是神经元发育和再生的一个内在决定因子“1。功夫熊猫二
本课题应用免疫组化法检测GAP一43在正常大鼠和视觉剥夺性大鼠视皮层及外侧膝状体中的表达情况,目的是为探讨视觉发育可塑性提供分子基础:为临床寻找有效预防和治疗弱视的方法提供参考依据。