doi:10.16736/jki41-1434/ts.2021.06.033
药食两用的中药复合组合物对
即时解酒保肝的作用研究
Study on the Effect of Medicinal and Food Dual-Purpo Traditional Chine Medicine
Compound Composition on Instantaneous Alleviation of Alcohol and Liver Protection
搞笑的英文名◎ 夏祎稚，邵卫樑
（上海交大昂立股份有限公司，上海 200233）
XIA Yizhi, SHAO Weiliang
(Shanghai Jiaoda Onlly Co., Ltd., Shanghai 200233, China)
摘 要：目的：探讨一种药食两用原料组合物产品——“甘氧片”，对小鼠的解酒作用及对醉酒小鼠肝脏功能的影响。方法：采用小鼠50%酒精灌胃，建立急性酒精中毒模型，观察醉酒行为学指标、摘眼球取血，分离血清测定肝功能、取肝脏测定肝脏中乙醇脱氢酶活性。结果：样品组为人体10倍和20倍剂量，
与模型对照组相比较，在醉酒诱导时间和醒酒时间上都具显著性；肝功能指标：与正常组相比，给予醉酒诱导的模型组小鼠谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（T-BIL）和碱性磷酸酶（ALP）活性均明显升高，表明对肝损伤模型建立。样品组10倍量和20倍量与模型组比较，ALT指标都显著降低（p＜0.05、p＜0.01）；AST 指标，样品组10倍量无显著性差异，20倍量显著低于模型组（p＜0.05）；T-BIL指标，样品组10倍和20倍量都显著低于模型组（p＜0.01、p＜0.05）；ALP指标，样品组10倍量和20倍量都显著低于模型组（p＜0.05，p＜0.05）。肝脏乙醇脱氢酶活性：模型组与正常组差异无统计意义，与正常组比较，样品组10倍量无显著性差异，20倍量具显著性差异（p＜0.05）。结论：药食两用原料组合物产品——“甘氧片”具有显著的醒酒作用并对急性酒精中毒具有保肝作用。
关键词：药食两用；急性酒精中毒；解酒；肝功能
Abstract：Objective: To explore the anti-alcoholic effect of a kind of medicinal and edible raw material composition product “GanYang tablets” on mice and the effect on liver function of drunk mice. Methods: Gavage 50% alcohol in mice to establish an acute alcoholism model, obrve the drunken behavior indicators, remove the eyeballs to take blood, parate the rum to determine liver function, and take the liver to determine the alcohol dehydrogena activity in the liver. Results: The sample group was 10 times and 20 times the human do. Compared with the model control gr
oup, it was significant in both the intoxication induction time and the sober time; liver function indicators: compared with the normal group, the model group induced by intoxication was smaller Murine alanine aminotransfera (ALT), aspartate aminotransfera (AST), total bilirubin (T-BIL) and alkaline phosphata (ALP) activities all incread significantly, indicating that a liver injury model was established. Compared with the model group with 10 times and 20 times the amount of the sample group, the ALT index was significantly reduced (p<0.05, p<0.01); AST index, the 10 times amount of the sample group has no significant difference, and the 20 times amount is significantly lower than the model group (p<0.05); T-BIL index, the sample group’s
作者简介：夏祎稚（1986—），女，本科，工程师；研究方向为保健食品开发。曼越橘
通信作者：邵卫樑（1957—），男，硕士，工程师；研究方向为植化、药化相关技术研究及保健食品开发。E-mail：rita_。
世界卫生组织（WHO）指出，酒精中毒是当今世界范围内的公害之一[1]。饮酒过度现象以及由酒精所引发的疾病和问题也日益增多，且进入体内的乙醇大部分经肝脏代谢，对肝脏具有较大的损害，例如，使肝细胞膜表面的脂质过氧化以及破坏肝细胞膜。长期饮酒还会使肝细胞内的微管和线粒体等结构受到破坏，使细胞内的代谢紊乱，产生具有细胞毒性的代谢产物，导致肝细胞肿胀、坏死等。
针对过量饮酒或酒精中毒等，目前已有相关的化学药和中药，但是化学药本身也需要经肝脏代谢，代谢过程对肝脏同样具有毒性，故西药、化学药只能在即时解决酒醉的不良反应，不能作为长期调理肝脏的药品。同样地，针对解酒的中药，大部分是根据中药古方文献记载以及根据现代药理组合形成的中药复方，虽能暂时缓解头晕、恶心等症状，但很多都含有使人兴奋的活性成分，只能治标不能治本。
因此本研究注重于所述组合为国家法规规定属无毒级别的原料，其中主要原料包括药食两用中药原料（主要包括枳椇子、葛根等）、复配益生菌与维生素等。将上述所述原料组合制备成产品——“甘氧片”。通过多个途径参与乙醇的代谢过程，降低乙醇对机体的伤害（包括降低乙醇、氧自由基和乙醛对机体的伤害）、调节乙醇代谢过程相关键酶活性尤其是提高乙醇脱氢酶活性加速乙醇代谢、提高乙醛脱氢酶活性、降低乙醛对机体伤害。
繁体字在线翻译1 材料与方法
1.1 动物
ICR小鼠，SPF级，雄性，体重20～25 g（6～8周龄），50只。来源：上海市计划生育科学研究所实验动物经营部；生产许可证：SCXK（沪）2018-0006；
质量合格证编号：20180006022598。
1.2 受试样品
“甘氧片”产品样品：由上海交大昂立股份有限公司提供；规格：0.75 g/片；保存条件：4℃保存。1.3 试剂与仪器：
ALC-210.3电子天平（赛多利斯斯泰帝（上海）贸易有限公司）、PL601-L电子天平（梅特勒.托勒多公司）、HITACHI 7080生化检测仪（日立公司）。
乙醇（批号：20190525，国药集团化学试剂公司）、羧甲基纤维素钠（CMCNa，批号：20190303，国药集团化学试剂公司）、乙醇脱氢酶测试盒（批号：20201229，上海索桥生物科技有限公司）。
1.4 实验方法
1.4.1 剂量设计
“甘氧片”的成人使用量为9 g·d-1，动物用量为人体的10倍和20倍，计算如下：9×10倍÷60 kg= 1.5 g·kg-1，拟采用1.5 g·kg-1和3 g·kg-1。试验研究过程中，考虑样品的有效性，选择人体服用量10倍和20倍的两个剂量，没有做30倍剂量组。给药途径及容积：口服（PO），25 mL·kg-1 [2]。
1.4.2 试剂与受试样品的配制fullname
试剂配制：50%乙醇；赋形剂：0.5% CMCNa。受试样品制备：受试样品按相应人体服用量倍数的浓度溶入赋形剂中。
1.4.3 操作步骤
适应性饲养后，小鼠被随机分成4组（正常组、醉酒组、醉酒+样品10倍量组、醉酒+样品20倍量组），每组10个动物。试验前一日下午小鼠禁食不禁水16 h，试验当日上午，各组小鼠称重后给予赋形剂（0.5% CMCNa）、受试物进行灌胃（体积25 mL·kg-1），0.5 h后，各组小鼠给予50%乙醇20 mL·kg-1，记录醉酒
vertical10-fold and 20-fold volume are significantly lower than the model group (p<0.01, p<0.05); ALP index, the sample group’s 10-fold and 20-fold volume are significantly lower In the model group (p<0.05, p<0.05). Liver alcohol dehydrogena activity: The difference between the model group and the normal group is not statistically significant. Compared with the normal
group, there is no significant difference in the 10-fold amount of the sample group, and the 20-fold amount has a significant difference (p<0.05). Conclusion: “GanYang Tablets”, a combination of raw materials for medicine and food, has a significant sobering effect and has a hepatoprotective effect on acute alcoholism.
Keywords：medicine and food homology; acute alcoholism; relieving hangover; liver function
中图分类号：R285
潜伏期（灌酒后至翻正反射消失）、醉酒时间（反射消失至反射恢复）。苏醒后，摘眼球取血，分离血清，测定谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（T-BIL）和碱性磷酸酶（ALP）等肝功能指标；取肝右叶0.3 g左右，精确称定，-80℃保存，用于测定乙醇脱氢酶。
1.4.4 观察指标
醉酒潜伏时间：灌酒后至翻正反射消失。醉酒恢复时间：灌酒后至翻正反射恢复。肝功能ALT、AST、T-Bil 、ALP指标变化。微量法测定肝脏中乙醇脱氢酶活性，结果以每克肝脏组织的催化能力表示，单位为μmol/min/g。
1.4.5 统计分析
数据以“平均数±标准差”表示，采用非成对t-test 检验，与模型组进行组间比较，p＜0.05认为差异有统计意义。
2 结果与分析
2.1 小鼠醉酒诱导时间、醒酒时间及死亡率
各组小鼠给予赋形剂或解酒样品处理后0.5 h，灌服50%酒精，醉酒诱导时间、醒酒时间和死亡率如表1所示。受试样品10倍剂量组与20倍剂量组醉酒诱导时间均长于模型组，且与模型组差异有统计意义（p＜0.05，p＜0.01）；醉酒恢复时间，受试样品10倍剂量组与20倍剂量组少于模型对照组（p＜0.05，p＜0.05）；从醉酒存活率观察，20倍剂量组样品存活率最高（90%），10倍剂量组样品存活率次之（80%），模型组存活率最低（60%），以上结果提示，“甘氧片”具有较好解酒作用。同时能有效提高小鼠存活率，且高剂量组存活率更高，可能与其具有保肝作用有关。
表1 小鼠醉酒存活率、诱导时间和醒酒时间表
组别死亡数/只存活率/（%）反射消失时间/min反射恢复时间/min 模型组（10只）46018.4±5.7744.5±69.7 10倍剂量组（10只）28025.5±13.8*654.8±128.9* 20倍剂量组（10只）19028.0±4.7**645.0±105.5*注：对比模型组，*表示p＜0.05，**表示p＜0.01。
2.2 对于醉酒小鼠肝功能指标影响[3]
各组小鼠肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（T-BIL）和碱性磷酸酶（ALP）结果如表2所示。与正常组相比，给予醉酒诱导的模型组小鼠ALT、AST、TBIL和ALP明显升
高（p＜0.05、p＜0.001、p＜0.0001和p＜0.05），表明酒精对肝损伤模型完成建立。与模型组比较：ALT 指标，样品组10倍剂量和20倍剂量都显著性降低（p＜0.05、p＜0.01）；AST指标，样品组10倍量无显著性差异，20倍量显著低于模型组（p＜0.05）；T-BIL指标，样品组10倍和20倍量都显著低于模型组（p＜0.01、p＜0.05）；ALP指标，样品组10倍量和20倍量都显著低于模型组（p＜0.05，p＜0.05）。
表2 小鼠肝功能指标测定结果表
组别ALT/IU·L-1AST/IU·L-1TBIL/μmol·L-1ALP/IU·L-1正常组（8只）35±8.9*107.0±25.0***1.3±0.2****416±28*
模型组（6只）163±76.9203.0±41.02.0±0.2742±299 10倍剂量组（8只）83.0±51.0*146.0±71.01.3±0.4**439±168* 20倍剂量组（9只）70±34.7**126.0±57.0*1.7±0.3*478±147*注：对比模型组，*表示p＜0.05，**表示p＜0.01，***表示p＜0.001，****表示p＜0.0001。
观澜英语培训2.3 肝脏中乙醇脱氢酶含量
各组小鼠肝脏中乙醇脱氢酶（Alcohol dehydro- gena，ADH）活性如表3所示，模型组与正常组相
比，乙醇脱氢酶活性差异无统计意义（p=0.7158），与样品组10倍量相比也无显著性差异，与20倍量组相比具显著性差异，样品20倍量组肝脏中乙醇脱氢酶活性显著高于正常组（p＜0.05）。表3 小鼠肝脏中乙醇脱氢酶活性表（单位：μmoL/ml/g）组别乙醇脱氢酶（ADH）活性正常组（8只）0.2398±0.2593
模型组（6只）0.2908±0.0760
10倍剂量组（8只）0.2643±0.1301
20倍剂量组（9只）0.3930±0.0977*
注：样品20倍剂量组对比模型组，*表示p＜0.05。
3 结论与讨论
乙醇进入人体后约20%通过胃吸收，80%经十二指肠吸收，其中绝大部分（90%以上）的酒精在肝脏代谢。乙醇经乙醇脱氢酶（ADH）和肝细胞内质网的微粒体乙醇氧化酶系统（MEOS），在肝脏中氧化了大部分的乙醇，其代谢途径的第一阶段主要是乙醇在肝细胞质经过ADH氧化为乙醛，而MEOS也将乙醇转变成为乙醛（对于嗜酒者，ADH已不能全部完成乙醇的代谢，这时机体会生成混合功能氧化酶），其限速酶主要是细胞色素酶系中亚家族P4502E1。第二阶段为乙醛在肝细胞线粒体中被乙醛脱
氢酶（ALDH）或乙醛氧化为乙酸，后者释放进入血液，在外周组织中被氧化为二氧化碳和水，进而完成整个代谢过程[4]。
乙醇通过诱导细胞色素氧化物（P4502E1），通过微粒体乙醇氧化途径，产生大量乙醛和多种氧自由基，经研究证实氧自由基及乙醛是造成肝损伤的重要原因[5]。因此，乙醇在代谢过程中，除乙醇本身对人体的组织细胞的伤害，其代谢过程产生的氧自由基和乙醛对人体也具有巨大危害。许多人饮酒过度，超出人体酒精代谢的限度，要经细胞色素氧化物（P4502E1）代谢，会产生大量氧自由基，更会加深对人体组织细胞特别是肝脏的损伤，以及加快肝脏功能的衰退，对人体的健康构成了极大的威胁。
乙醛对肝脏的主要毒性作用为：降低肝脏对脂肪酸的氧化；影响肝脏微管系统，使微粒蛋白分泌减少，造成脂质和蛋白质在肝细胞中沉积；促进脂质过氧化，使还原型谷胱甘肽（GSH）减少，并增加胶原合成，乙醛又和一些脂质过氧化产物如丙二醛（MDA）等形成蛋白加合物，引起免疫反应，损害细胞骨架功能和细胞与间质的相互作用，从而抑制重要的代谢通路[6]。
乙醛同时也使细胞色素氧化物（P4502E1）高度诱导并激活巨噬细胞，产生大量的·OH，·O2-，和H2O2等自由基。这些氧自由基可使DNA、蛋白质和脂质过氧化，产生线粒体损害（能量产生减少），使肝细胞损伤，发生肝细胞的凋亡和坏死。肝内的枯否细胞和来自血循环的单核细胞在肝损伤
后被激活，同时由于酒精使肠道通透性升高，致使循环中肠道来源的内毒素增高，内毒素血症可能通过枯否细胞、P4502E1释放氧自由基、和其他细胞因子包括肿瘤坏死因子（TNF-α）等，不但对肝细胞有损害，而且对肝窦内皮细胞有害，肝窦内皮细胞受损后，可使黏附分子表达增加并释放许多损害肝细胞的细胞因子，引起循环损伤[6]。
针对乙醇在代谢过程及其产物对人体的伤害，本研究依据中医药文献记载解酒保肝护肝经典药味及复方、根据乙醇代谢过程对机体的伤害途径从分子药理学原理阻止或减少对机体的伤害（包括降低乙醇、氧自由基、乙醛对机体的伤害）、调节过程相关酶活性及通过针对性的提高乙醇脱氢酶活性加速乙醇代谢，提高乙醛脱氢酶活性，降低乙醛对机体伤害。此外组合中增加强抗氧化活性成分，减少因乙醇代谢过程产生的自由基对机体的伤害。以期通过多途径达到即时解酒，长期调理保肝护肝的目的。
在本研究样品“甘氧片”中含有药食两用中药成分，其中药水提物有超强的抗自由基活性，可显著提高超氧化物歧化酶（SOD）活性，能显著降低丙二醛（MDA）含量，能提高神经生长因子（nerve growth factor，NGF）、脑源性神经生长因子（brain nerve growth factor，BDNF）表达，改善血液流变学，改善慢性脑缺血大鼠的认知能力，对醒酒具有显著性效果，其提高NGF和BDNF表达机理尚待进一步研究。
样品中还添加了其他有助于解酒保肝的食品原料，如B族维生素、维生素C、牛磺酸等。①B族维生素可作为机体反应酶的合成原料，可改善脂肪蛋白质的代谢，助消化，并参与体内各种蛋白酶的作用和体内多种新陈代谢反应。充足的B族维生素，能避免肝脂肪变性，提高肝脏对乙醇的耐受力，消除乙醇和烟焦油等内毒素，保护肝脏，从而具有养肝功效[7]。②维生素C是一种强还原剂，保护其他抗氧化剂，防治自由基对人体的伤害，保护细胞、解毒、保护肝脏。它还能促进许多体内抗氧化酶的氧化型转为还原型，从而持续发挥抗氧化作用[8]。③牛磺酸是动物细胞内含量最丰富的含磺酸基的β-氨基酸，可以维持组织渗透压稳定细胞膜、抗氧化应激、调节免疫力、维持细胞钙离子水平、保护线粒体、抑制肝细胞活性氧产生以及明显提高肝脏中ADH和ALDH的活性，减少过氧化物酶的释放，可有效保护肝细胞。同时牛磺酸还可以抑制脂质过氧化，减少MDA并保护胰岛B细胞功能等广泛生物学效应；还具有加速乙醇的代谢、抗炎等多种生理功能。
怎样克服紧张焦虑实验研究结果表明，样品“甘氧片”在醉酒诱导时间与醒酒时间的行为观察中，10倍和20倍剂量组与模型对照组比较都具显著性差异，表明具有显著的
account number
解酒作用。肝功能指标（ALT、AST、T-BIL和ALP）与模型对照组比较，样品组人体10倍和20倍剂量组都各具有改善肝功能指标的显著性差异。由于本产品具有保护肝脏的作用，可使小鼠在试验酒精的浓度下，致死率从40%（考虑后续实验进行，没有设计高致死率模型）显著降低至10%。试验结果中可见，对健康小鼠而言，由于乙醇有对乙醇脱氢酶（ADH）的代偿性作用，其代偿机理如前所述，乙
醇通过诱导限速酶P4502E1，加快乙醇代谢，因此在酒后短期内（2 h），ADH活性会降低，数小时后，ADH活性会恢复。本实验也证明了所述理论。模型组与正常组对照，10 h 以后，肝脏乙醇脱氢酶活性无显著性差异。但“甘氧片”样品实验组与正常组比较，20倍剂量的ADH指标具有活性提高的显著性差异，表明实验样品对乙醇伤害具有长期的保护肝脏功能作用。
综上所述，产品“甘氧片”运用各原料的合理配伍，通过多个途径参与乙醇的代谢过程，降低乙醇及其代谢过程的代谢物对机体的伤害，因此既能即时解酒，又能长期服用以保肝护肝。
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