一、常用生理溶液的成分与配制
1． 配制生理溶液的主要条件
（1）渗透压：配制人工生理溶液要等渗。不同的动物对同一物质的等渗浓度要求不相同，如生理盐水溶液，冷血动物所用的是0.6％～0.75％；温血动物所用的是0.8％～0.9％。有些溶液不仅要求等渗而且要求等张，一般由溶血法测定，等渗不等于等张，只有在等渗溶液下不溶血，该等渗溶液才是等张溶液。
（2）各种离子：溶液中含有一定比例的不同电解质的离子如：Na＋、Ca2＋、K＋、Mg2＋、OH－等，是维持组织和器官功能所必需的。组织器官不同，对生理溶液中离子成分和浓度要求亦不同。
（3）pH的影响：人工生理溶液的pH值一般要求在7.0～7.8之间。制备离体器官人工生理溶液时要注意：
①蒸馏水储藏期过久，pH会有改变，故最好用新鲜的蒸馏水。
②哺乳动物心脏的冠状动脉，酸性生理溶液可使之扩张，而碱性液使之收缩。
③酸性生理溶液可使平滑肌松弛，碱性时则能加速其节律，缩小其振幅。如，猫和兔离体的小肠，pH6.0～6.2时，可停止收缩；如逐步增加其碱性，则出现兴奋，超过pH8.0时，则可出现痉挛性收缩状态。又如离体豚鼠的子宫，脑垂体后叶制剂可使之收缩，如果增加重碳酸盐则兴奋减低。
④横纹肌对pH的变化不及平滑肌敏感，但是酸过多能使张力增加。
因此，为了调节和稳定生理溶液pH，常在生理溶液中加入缓冲液，常用缓冲对有K2HPO4/KH2PO4，Na2CO3/NaHCO3等。
（4）能量：葡萄糖能提供组织活动所需的能量，但需临用时加入溶液中，特别是气温较高时尤应注意。各种细胞培养液还需加入多种氨基酸，血清等营养物质。
（5）氧气：有的离体器官需要氧气，如离体的子宫、离体的兔心、乳头肌等，一般用95％氧气、5％CO2；在肠管实验时可以用空气。
2．常用生理溶液的成分（见表1）。
3．配制生理溶液的注意事项
（1） 蒸馏水要新鲜，最好用重蒸馏水，储藏期过久，使用前需将蒸馏水煮沸一次，以驱除CO2。
（2） 配制时要用无水氯化钙。
（3） 配制时如有碳酸氢钠或有磷酸二氢钠则必须充分稀释后才可以加入已经溶好的氯化钙中，边加边搅拌，以免产生浑浊和沉淀。
（4） 含有碳酸氢钠或葡萄糖的溶液，储存的日期都不能过长。
表1 常用生理溶液的成分和配制
成分及储备液浓度 | 每1000ml需用量 |
生理盐水 Normal Saline | 任氏液 Ringer,s | 任洛氏液 Ringer-Locke,s | 台氏液 Tyrode,s | 克氏液 Krebs, | 戴雅隆氏液 De-Jalon,s sol |
NaCl do you know KCl 10% MgSO4.7H2O ?10% NaH2PO4.2H2O? 5% KH2PO4 10% soqNaHCO3 CaCl2? 1M 葡萄糖 通气 | 9g | 6.5g 1.4ml(0.14g) 0.13ml(0.0065g) 0.2g 1.03ml(0.12g) 空气 | 9g 4.2ml(0.42g) 0.5g 2.16ml(0.24g) 1g 氧气 | 8g 2.0ml(0.2g) 2.6ml(0.26g) 1.3ml(0.065g) 1g 1.8ml(0.20g) 1g 氧气或空气 | 6.9g 3.5m(0.35g) job hopping2.9ml(0.29g) 1.6ml(0.16g) 2.1g 2.52ml(0.28g) 2g O2+5%CO2 | 9g 4.2ml(0.42g) 0.5g 0.54ml(0.06g) 0.5g O2+5%CO2 |
用途 | 哺乳类， 小量静脉注射 | 用于蛙类器官 （蛙心） | 用于哺乳类心脏 | 用于哺乳类肠肌等 | 用于哺乳类及鸟类的各种组织 | 用于大鼠子宫低钙可抑制自发收缩 |
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二、常用抗凝剂的浓度
1.枸橼酸钠
常用浓度为3.8％，一般按1:9比例（即1份溶液：9份血液），其抗凝作用较弱，碱性较强，不宜作化学检验用，可用于红细胞沉降速度测定和动物急性血压实验。不同的动物对枸橼酸钠浓度的要求也不同，常用抗凝剂浓度如下：
狗：枸橼酸钠 5%～6%
猫：枸橼酸钠 2%＋硫酸钠25％
兔：枸橼酸钠 5％
2. 草酸钾：用10％草酸钾溶液吸取0.2ml于一试管内，转动试管，使其浸润管壁，然后放入80℃烘箱中烤干，备用。
3. 肝素：药厂生产的肝素钠注射液每支（2ml）含肝素12500U，相当于125mg（即1mg相当于100U）。
（1）体外抗凝：取1％肝素钠溶液0.1ml，均匀的浸润试管管壁，放入80℃左右的烘箱中烤干备用。每管可使10ml血液不凝。
（2）体内抗凝：静脉注射剂量为500U～1000U。
4. 草酸钾－草酸铵混合剂：草酸钾0.8g，草酸铵1.2g，加蒸馏水至100ml。取0.5ml于试管内，烘干备用。每管可使5ml血液不凝。只适于红细胞比容测定，不能用于血液非蛋白氮测定。
三、 药物剂量的换算
1. 同种动物间等效剂量的换算
一般动物的用药剂量均以mg/kg值表示。近年的看法已有了一些发展，认为不能一概而论，如金钱蛙用强心苷时只规定每只蛙用多少mg，小鼠用胰岛素也是每只多少单位，在规定体重范围内不再按公斤体重调整用药剂量。另一些实验，则建议按体表面积用药（每平方米用多少mg，即mg/m2），该法比按体重用药更为合理，实验误差可以明显减小。
但体表面积不易直接测得，一般可根据体重和动物体型按下式近似的推算：
A = R?W2/3
其中A是动物体表面积（m2），W是体重（kg），R是动物的体型系数，参见表2。
表2 不同动物的体型系数
动物 | 小鼠 | 大鼠 | 豚鼠 | puzzled兔 | 猫 | 狗 | 猴 | 人 |
体型系数 | 0.06 | 0.09 | 0.099 | 0.093 | 0.082 | 0.104hobbies | 0.111 | 0.1～0.11 |
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同种动物间进行剂量换算，可采用以下比例式：
D1 : D2 = A1 : A2 = W12/3 : W22/3
2. 不同种属动物间剂量的换算
不同动物间的剂量换算很复杂，药物、观察指标及动物不同，都会影响换算比值，并没有统一规律。现介绍两种方法：
（1）标准动物的等效剂量折算系数法：由表3查出折算系数（K），再按下式计算：
DA = K ? DB
DA为A种动物的剂量（mg/只），DB为B种动物的剂量（mg/只）。
表3 不同动物等效剂量（mg/只）的折算系数
| B种动物 | 小鼠 20g | 大鼠 directions200g | 豚鼠 400g | 兔 1.5kg | 猫 2kg | 猴 4kg | 狗 12kg | 人 70kg |
?????? A种动物 | 小鼠20g | 1.0 | 7.0 | 12.25 | 27.8 | 29.7 | 64.0 | 124.0 | 388.0 |
大鼠200g | 0.14 | 1.0 | 1.74 | 3.9 | 4.2 | 9.2 | 17.8 | 56.0 |
| directions是什么意思 豚鼠400g | 0.08 | 0.57 | 1.0 | 2.25 | 2.4 | 5.2 | 9.2 | 31.5 |
兔1.5kg | 0.04 | 0.25 | 0.44 | 1.0 | 1.08 | 2.4 | beat it是什么意思4.5 | 14.2 |
猫2kg | 0.03 | 0.23 | checking 0.41 | 0.92 | 1.0 | 2.2 | 4.1 | 13.0 |
猴4kg | 0.016 | 0.11 | 0.19 | 0.42 | 0.45 | 1.0 | 1.9 | 6.1 |
狗12kg | 0.008 | 0.06 | 0.10 | 0.22 | 0.23 | 0.52 | 1.0 | 3.1 |
人70kg | 0.0025 | 0.018 | 0.031 | 0.07 | 0.078 | 0.16 | 0.32 | 1.0 |
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（2）等效剂量的直接折算法：表4给出了主要参数，不仅可按此计算标准体重动物的剂量，也能直接计算任何种类动物任何实际体重的用药剂量。
对于标准体重的动物：
每只用量（mg/kg）DB = DA×KB/KA
KA、KB、RA、RB值由表4查找。
对于任何体重的动物：
每只用量（mg/kg） DB = DA×RB/RA×（WB/WA）2/3
公斤体重剂量（mg/kg）dB＝dA×RB/RA×（WB/WA）1/3
式中DB、dB是欲求算的B种动物的每只剂量及公斤体重剂量，DA、dA是已知A种动物的每只剂量及公斤体重剂量，WA、WB是已知动物体重，RB、RA是体型系数，可由表4查出。
表4 不同动物的剂量折算系数
动物种属 | 小鼠 | 大鼠 | 豚鼠 | 兔 | 猫 | 猴 | 狗 | 人 |
标准体重 | K（剂量折算系数） | 1 | 7 | 12.3 | 27.8 | 29.7 | 64 | 124 | 388 |
K(公斤体重剂量折算系数) | 1 | 0.71 | 0.62 | 0.37美国留学生活费 | 0.30 | 0.32 | 0.21 | 0.11 |
任何体重 | R（动物体型系数） | 0.059 | 0.09 | 0.099 | 0.093 | 0.082 | 0.111 | 0.104 | 0.1 |
W（标准体重 | 0.02 | 0.2 | 0.2 | 1.5 | 2 | 4 | 12 | 70 |
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【参考书目】
1. 徐叔云，卞如濂，陈修。 2002年，《药理实验方法学》第三版，北京：人民卫生出版社。202，1833
