附录
一、常用溶液的配制
（一）溶液配制注意事项
1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent ，G ．R ．）、分析试剂（Antalytical reagent ，A ．R ．）化学纯（Chemical pure ，C ．P ．）和实验试剂（Laboratory reagent ，L ．R ．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2．药品称量要精确。3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH 在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。
（二）（二）0.0670.0670.067（（1/151/15）
）Mol/L 磷酸缓冲液1．1/15Mol/L 磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH 2PO 4，A ．R ．）9.08g ，用蒸馏水溶解后，倾入1000ml 容量瓶内，再稀释至刻度（1000ml ）。
2．１/15Mol/L 磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na 2HPO 4，A.R.）9.47g （或者Na 2HPO 4·2H 2O 11.87g ）用蒸馏水溶解后，放入1000ml 容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1000ml ）。
3．按附表的比例，配制成不同pH 值的缓冲溶液。
附表1磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH 1/15Mol/L Na 2HPO 4
1/15Mol/L KH 2PO 4
带宽是什么意思pH 1/15Mol/L Na 2HPO 4
1/15Mol/L KH 2PO 4
5.88.092.07.16
6.623.45.99.990.1
7.272.02
jennette mccurdy8.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.480.81
potus9.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.5
31.8
68.2
7.8
91.5
8.5
6.63
7.562.57.993.2 6.8 6.743.556.5
8.094.7 5.3 6.84
9.650.48.195.8 4.2
6.955.444.68.29
7.0 3.0
7.061.138.98.498.0 2.0
0.15Mol/L PB液
（三）
（三）0.15Mol/L
附表20.15Mol/LPB液配制法
pH0.15Mol/L Na2HPO4（ml）0.15Mol/L NaH2PO4（ml）6.426.573.5
6.63
7.562.5
6.849.051.0
7.061.039.0
7.272.028.0
7.481.019.0
7.687.013.0
Na2HPO4·2H2O分子量=175.050.15Mol/L溶液含26.7g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量=358.220.15Mol/L溶液含53.7g/L。
NaH2PO4·H2O分子量=138.000.15Mol/L溶液含20.7g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量=156.030.15Mol/L溶液含23.4g/L。
0.2Mol/L PB缓冲液
（四）
（四）0.2Mol/L
附表30.2mol/L PB缓冲液配制法
pH0.2Mol/L Na2HPO4（ml）0.2Mol/L NaH2PO4（ml）
5.88.092.0
6.012.38
7.7
6.218.581.5
6.426.573.5
6.63
7.562.5
6.849.051.0
7.061.039.0
7.272.028.0
7.481.019.0
7.687.013.0
7.891.58.5篮球训练营
8.094.7 5.3
0.2Mol/L Na 2HPO 4·2H 2O 溶液35.61g/L
Na 2HPO 4·12H 2O 溶液含71.64g/L
0.2Mol/LNaH 2PO 4·H 2O 溶液含27.60g/L
NaH 2PO 4·2H 2O 溶液含31.21g/L
欲配0.1Mol/L PB 缓冲液则在0.2Mol/L PB 缓冲液的基础上加H 2O 稀释1倍即可。欲配制PBS 液时，则在溶液中加0.85％的NaCl 溶液即可。
（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS PBS PBS）
）
（0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0g KCl 0.2g Na 2HPO 4 1.15g （如为Na 2HPO 4·12H 2O ，则为2.89g ）KH 2PO 40.2g
将上述试剂依次溶于1000ml 去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min ，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
（六）硼酸盐缓冲液（（六）硼酸盐缓冲液（Borate Borate saline buffer buffer）
）1．硼酸（Ｈ3BO 3）
0.2Mol/L 硼酸：硼酸12.37g 加水至1000ml 。2．硼砂（Na 2B 4O 7）
0.05Mol/L 硼砂：硼砂19.07g 加水至1000ml 。
附表4不同pH 的0.2Mol/L 硼酸缓冲液配制法pH 0.05Mol/L 硼砂
（ml ）
0.2Mol/L 硼酸
（ml ）
pH 0.05Mol/L 硼砂（ml ）
0.2Mol/L 硼酸（ml ）
7.4 1.09.08.2 3.5 6.57.6 1.58.58.4 4.5 5.57.8 2.08.08.7 6.0 4.08.0
3.0
7.0
9.0
8.0
2.0
（七）巴比妥缓冲液
1．pH8.2离子强度0.05Mol/L 巴比妥缓冲液
巴比妥钠47.6g
蒸馏水3000ml 1.17N HCl 55.0ml
（1.17N HCl=193ml 浓HCl 加1807ml 蒸馏水）⑴将4.76g 巴比妥钠溶于3000ml 蒸馏水。⑵加1.17N HCl 55ml 。
我会很想你
⑶用HCl 调节pH 到8.2，并加蒸馏水至4265ml 。2．pH8.40.06Mol/L 巴比妥缓冲液
巴比妥 1.84g 巴比妥钠10.30g 加蒸馏水至1000.00ml 3．pH8.60.06Mol/L 巴比妥缓冲液
巴比妥 1.66g 巴比妥钠12.76g 加蒸馏水1000.00ml （八）（八）0.2Mol/L
0.2Mol/L 醋酸盐缓冲液见表附表5附表50.2Mol/L 醋酸盐缓冲液配制法pH 0.2Mol/L Tris （ml ）
0.1Mol/L HCl （ml ）
pH 0.2Mol/L Tris （ml ）
0.1Mol/L HCl （ml ）
23℃37℃23℃37℃9.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.32
8.18
25
mattel20.0
7.36
7.22
25
42.5
（九）三羟甲基甲烷（九）三羟甲基甲烷——盐酸缓冲液（盐酸缓冲液（Tris Tris Tris——HCl 缓冲液）不同pH ，0.05Mol/L
25ml0.2Mol/L 三羟甲基氨基甲烷加хml0.1NHCl ，加水稀释至100ml （见下表）
附表6Tris—HCl 缓冲液配制法pH 0.2Mol/L Tris(ml)0.1NHCl (ml)pH 0.2Mol/L Tris(ml)0.1NHCl (ml)23℃37℃23℃37℃9.108.962558.057.902527.58.92
8.78
25
7.5
7.96
7.82
25去澳洲留学的条件
30.0
8.748.602510.07.877.732532.5 8.628.482512.57.777.632535.0 8.508.372515.07.667.522537.5 8.408.272517.57.547.402540.0 8.328.182520.07.367.222542.5 8.238.102522.57.207.052545.0 8.148.002525.025
三羟甲基氨基甲烷（Tris）
分子量=121.14
0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1000ml。
0.1NHCl：取HCl8.6ml，加水至1000ml。
0.5Mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液
（十）
以上内容
（十）0.5Mol/L
NaHCO3 3.70g
Na2CO30.60g
溶于600.00ml蒸馏水中即得。
不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。
（十一）甘油磷酸缓冲液
1．配制pH8.0磷酸缓冲液
0.1Mol/L Na2HPO494.50ml
0.1N NaH2PO4 5.50ml
混合即可
2．9份甘油与1份pH8.0磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。
用途：用于免疫荧光试验。
Hank’s液
freedom of speech（十二）
（十二）Hank
1．贮存液
NaCl80.00g
KCl 4.00g
Na2HPO4·12H2O 1.52g
KH2PO40.60g
葡萄糖 4.00g
0.4％酚红液50.00ml
双馏水加至100.00ml
115℃高压灭菌15min，冰冻保存。
2．工作液
贮存液1份双馏水9份
115℃高压灭菌15min 。临用时用灭菌的5.6％NaHCO 3液调pH 值至7.2左右（溶液呈橙红色）。
（十三）萘（钠）氏试剂（（十三）萘（钠）氏试剂（Nessler Nessler ’s reagent reagent）
）配方1：氯化汞 6.0g
碘化钾12.4g 20％NaOH 30ml 加蒸馏水至100ml
配方2：碘化汞11.5g
碘化钾8g 蒸馏水50ml
（完全溶解后）过滤，加20％NaOH 50ml 。用途：检测溶液中氨离子。
（十四）阿氏（（十四）阿氏（Alver
三月的英文Alver ’s ）液葡萄糖 2.05g 柠檬酸钠0.80g 氯化钠0.42g 蒸馏水100ml
溶解后，以10%柠檬酸调节pH 至6.1，过滤，分装，10磅10min 灭菌，4
℃保存。
（十五）青、链霉素混合液（简称S ．P ．液或双抗液）
青霉素（40万U ）5支链霉素（200万μg ）1支
分别溶于100ml 灭菌无离子水中或共同溶于200ml 灭菌无离子水中，混合
后分装小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保存备用（1万单位μg/ml ）。
临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml ，
链霉素100ug/ml 。
（十六）洗液（清洁液）配方1：重铬酸钾150g
蒸馏水300ml 浓硫酸3000ml
将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶
